热门试卷

解：（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进动物细胞融合常用的诱导因素是灭活的病毒．

（2）利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第1次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞，第2次筛选的目的是筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞．

（3）在基因工程中，获取目的基因和质粒需要使用限制酶，然后在DNA连接酶的作用下形成重组质粒；基因工程中，将目的基因导入受体细胞后，还需要目的基因的检测和鉴定，其目的是检测目的基因是否在受体细胞中成功表达．成功导入含有prG基因的细胞中，由于prG基因具有调控细胞无限增殖的功能，故Ⅲ中的细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体．

（4）由于调控细胞无限增殖的prG基因位于细胞质中，因此若要采用细胞核移植获得单克隆抗体时，只能讲浆细胞的细胞核移入到含有prG基因的细胞质中，获得重组细胞，最终获得单克隆抗体．

故答案为：

（1）灭活的病毒

（2）筛选出杂交瘤细胞　     筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞

（3）①限制性核酸内切酶　   DNA连接酶

②检测目的基因在受体细胞中是否进行了表达（或检测受体细胞是否显示出目的基因控制的性状）

（4）见下图（核质分离、重组细胞、筛选、培养）

解：（1）制备单克隆抗体时，首先将抗原注入小鼠体内，使小鼠产生特异性免疫，之后从小鼠脾脏中获得已经免疫的B淋巴细胞．

（2）因为B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖，所以直接培养经免疫过的B淋巴细胞不能生产单克隆抗体．因为骨髓瘤细胞具有在体外培养条件下无限增殖的能力，所以B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后的杂交瘤细胞具有既能产生抗体，又能无限增殖的特性．

（3）诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的容器中，一般同时存在B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交瘤细胞5种细胞（只考虑不融合和两两融合）．

（4）单克隆抗体制备过程运用了动物细胞融合、动物细胞培养等动物细胞工程技术手段．

（5）动物细胞的体外培养对环境条件有比较高要求，如培养液需适宜的温度、PH、动物血浆等．

故答案：（1）抗原

（2）B淋巴细胞不能无限增殖     既能产生抗体又能无限增殖

（3）5

（4）动物细胞融合、动物细胞培养

（5）PH、动物血浆等

解：（1）细胞融合体现了细胞膜具有一定的流动性．

（2）植物细胞有细胞壁，所以植物体细胞杂交前要先用酶解法去除细胞壁．细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，可用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁，获得原生质体．

（3）若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为效应B淋巴细胞，那么D细胞称为杂交瘤细胞，该细胞既能在体外培养条件下无限增殖，又能分泌特异性抗体．

故答案为：

（1）流动性

（2）细胞壁    纤维素酶和果胶   原生质体

（3）杂交瘤   无限增殖    特异性抗体

解：（1）首先应给小鼠注射抗原，①过程从小鼠的脾脏中取得已免疫的B细胞，该细胞能够产生抗体．

（2）B淋巴细胞能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞不产生专一性抗体，体外能无限繁殖，而杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特定抗体的特性．

（3）由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用动物细胞融合和动物细胞培养的技术手段．

（4）图中有两次筛选过程：步骤④筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；步骤⑤⑥筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．

（5）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是特异性强，灵敏度高．

故答案为：

（1）产生相应的（效应）B细胞

（2）体外无限增殖和分泌特定抗体

（3）动物细胞融合 动物细胞培养

（4）筛选杂交瘤细胞 筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞

（5）特异性强，灵敏度高

解：（1）动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础，单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高．

（2）过程①表示由RNA获得DNA过程，为逆转录．在构建A基因重组载体时，首先需用限制性核酸内切酶切割含有A基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶连接A基因和运载体形成A基因重组载体．

（3）将重组基因导入动物细胞常用显微注射技术，过程⑦是获得杂交瘤细胞过程，利用了动物细胞融合的技术；杂交瘤细胞的特点是能大量增殖，并能分泌特异性抗体．

（4）由于该病毒表面的A蛋白质为主要抗原，可用A蛋白制备疫苗，检测进采用抗原-抗体杂交技术，即用图中的抗A蛋白单克隆抗体进行检测．

（5）抗体属于分泌蛋白，与分泌蛋白的产生及分泌有关的细胞器有：核糖体（合成场所）、内质网（进行加工和运输）、高尔基体（进一步加工和分泌）、线粒体（供能），由于核糖体没有膜结构，因此该过程中涉及的具膜结构的细胞器有内质网、高尔基体、线粒体．

故答案为：

（1）动物细胞培养　　特异性强、灵敏度高

（2）逆转录　　限制性核酸内切酶和DNA连接酶

（3）显微注射技术　　动物细胞融合　　能大量增殖，并分泌特异性抗体

（4）A蛋白　　抗A蛋白单克隆抗体

（5）内质网、高尔基体、线粒体

解：（1）动物细胞培养技术和动物细胞融合技术是获得单克隆抗体的基础．

（2）图中A过程是从小鼠的脾脏中取得免疫过的B淋巴细胞，该细胞能够产生特异性抗体．从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射抗原类物质．

（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比．最大的优越性是特异性强，灵敏度高，可大量制备．

（4）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的无限增殖特点，又具备淋巴细胞的产生特异性抗体特点．

故答案为：

（1）动物细胞培养        动物细胞融合

（2）免疫过的B淋巴        特异性抗体         抗原

（3）特异性强，灵敏度高，可大量制备

（4）无限增殖         产生特异性抗体

解析：（1）图1是制备抗X抗原的单克隆抗体的过程，要想获得分泌抗X抗原的抗体，需要对小鼠注射相应的抗原即X抗原．融合后经筛选的细胞为杂交瘤细胞，具备双亲细胞的遗传特性，此类细胞的特点是既能无限增殖又能产生抗X的抗体．两类细胞融合需要细胞融合技术，杂交瘤细胞在体内或体外培养，需要细胞培养技术，所以该过程所用的生物技术有动物细胞融合技术和动物细胞培养技术

（2）图2精子需要成熟和获能的过程才具备受精的能力．若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可以在体外进行胚胎分割，胚胎分割需要对囊胚中内细胞团均分．以上操作过程都在体外进行．

（3）图3所示为植物体细胞杂交和植物组织培养过程．体细胞杂交的第一步就是制备原生质体，可以利用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁分解掉．将杂种细胞培养成植株要经过脱分化和再分化等过程．

故答案为：

（1）抗原X　既能无限增殖又能产生抗X的抗体　动物细胞融合技术和动物细胞培养技术　

（2）获能　内细胞团　体外　

（3）原生质体　纤维素酶和果胶酶　④⑤（⑥）

解：（1）利用细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径．单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）．

（2）工程菌是基因工程中常用的受体细胞．

（3）大面积烧伤的病人们可以采用动物细胞培养技术获得大量自身健康皮肤进行移植．

（4）利用基因工程获得无免疫排斥的转基因猪器官，可以向动物基因组中加入某种调节因子，以抑制抗原决定簇基因，再结合克隆技术获得基因个体．

（5）胚胎干细胞具有发育全能性，可以在体外分化成各种组织由于器官移植．

故答案为：

（1）细胞融合      特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）

（2）转基因（基因工程）

（3）动物细胞培养

（4）抗原决定基因    克隆

（5）胚胎干细胞     全能性

解：（1）①要获得能够产生抗X抗原的抗体的效应B细胞，首先将X抗原注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体．

②植物体细胞杂交过程中原生质体融合的方法有物理法、化学法，而动物细胞融合中有物理法、化学法和生物法，生物法就是利用灭活的病毒处理，诱导步骤①获得的B淋巴细胞与步骤②培养的骨髓瘤细胞进行融合．

③将诱导后产生的多种细胞，如杂交瘤细胞、效应B细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞，因此放在含选择性培养基的多孔培养板上培养，筛选出杂交瘤细胞．

⑥将筛选出的阳性细胞进行体外培养或体内培养，从而制备出大量单克隆抗体．

（2）单克隆抗体制备方法中，需要利用“动物细胞融合技术”将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合；融合后的细胞需要经过筛选，筛选后需要进行培养，这两个过程中均利用了“动物细胞培养技术”．

故答案为：

（1）①X抗原

②灭活的病毒

③选择性

⑥体内培养或体外培养

（2）动物细胞培养   动物细胞融合

解：（1）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于抗原，使小鼠产生免疫产生能分泌相应抗体的B淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的体液免疫．

（2）根据题意可知，在培养基中添加氨基嘌呤后，可以阻断DNA复制的主要途径，又因为骨髓瘤细胞的DNA合成没有辅助途径，因此在此培养基中选择生存下来的细胞只有融合后的杂交瘤细胞，因为只有杂交细胞才能进行辅助途径进行DNA复制并分裂增殖．

（3）杂交瘤细胞的特点是能无限增殖并分泌特异性抗体．

（4）此过程生产的单克隆抗体可以与人绒毛膜促性腺激素（或HCG）特异性结合，从而诊断早孕．

故答案为：

（1）抗原  体液

（2）氨基嘌呤  ab  产生特定抗体（抗HCG）的ab

（3）能无限增殖并分泌特异性抗体

（4）人绒毛膜促性腺激素（或HCG）

解：（1）单克隆抗体的特点是化学性质单一，特异性强的抗体特异性强，灵敏度高．

（2）图示的融合过程常用聚乙二醇（灭活病毒）作为诱导剂．科学家用针对鼠的单克隆抗体应用与人体，会作为异物产生免疫反应．

（3）制备单克隆抗体的B淋巴细胞一般从脾脏中采集．分析表格可见筛选杂交瘤的培养基是一种选择性培养基，只有杂交瘤细胞才能在其中生长．

（4）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种：体内培养操作简单，但是产量低，体外培养要求培养条件高，但是可以大规模生产．

故答案为：

（1）化学性质单一，特异性强的抗体特异性强，灵敏度高

（2）聚乙二醇（灭活病毒）鼠异物免疫反应

（3）脾选择因为有多种杂交瘤细胞，不经筛选不能得到单克隆抗体

（4）大量生产选①，小规模生产选②（答案合理即可）

解：（1）单克隆抗体制备的基础是动物细胞培养．制各单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于抗原，使小鼠产生分泌相应抗体的B淋巴细胞，此过程属于特异性免疫的体液免疫．

（2）图中诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的促融剂一般是PEG（或聚乙二醇）．

（3）最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖又能分泌特异性抗体．抗体在核糖体中合成，在内质网和高尔基体中加工，最后由细胞膜的外排作用分泌出去．因此若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜．

（4）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是特异性强、灵敏度高，可大量制备

故答案为：

（1）动物细胞培养　  抗原      体液

（2）PEG（或聚乙二醇）

（3）既能无限增殖又能分泌特异性抗体     核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜

（4）特异性强、灵敏度高，可大量制备

解：（1）杂交瘤细胞是通过动物细胞工程中的细胞融合技术获得的，其具备了两个细胞的特点，既能产生特定的抗体 又能能无限增值．

（2）杂交瘤细胞是通过细胞融合 形成的，再对其细胞培养，可合成大量的单克隆抗体．

（3动植物细胞都可以通过离心、聚乙二醇的方法融合，此外动物细胞还可以通过灭活的仙台病毒诱导融合．

（4）在动物细胞培养过程中，需要对组织细胞用胰蛋白酶处理，使组织相互细胞分散开来．

（5）瘤细胞B具有癌变 的特点，可以无限增值；细胞A是B淋巴细胞，确切的说应该是一种能够分泌特异性抗体的浆细胞（效应B细胞）．

故答案为：

（1）动物细胞      能产生特定的抗体      能无限增值

（2）细胞融合   细胞培养

（3）A

（4）胰蛋白酶

（5）癌变    浆

解：（1）单克隆抗体制备的技术涉及动物细胞融合和动物细胞培养，基础是动物细胞培养．

（2）制备单克隆抗体至少需要经过2次筛选．据图分析，骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长，所以骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞也不能在该培养基上存活；淋巴细胞和淋巴细胞自身融合的细胞能在HAT培养基上正常生活，但不能增殖，所以经过培养后，HAT培养基上没有淋巴细胞和淋巴细胞自身融合的细胞；骨髓瘤细胞与淋巴细胞之间形成的杂交瘤细胞能在HAT培养基上正常生活，并无限增殖．因此将细胞混合并诱导融合后转到HAT培养基中培养，其目的是筛选获得杂交瘤细胞．

（3）在诱导细胞融合过程中，与植物原生质体融合方法不同的是常用灭活的病毒作为诱导剂．在细胞培养过程中，首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境中．

（4）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞进行稀释，然后再将其滴入多孔细胞培养板的小孔中培养，目的是使每个小孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的．

（5）选出的杂交瘤细胞具备迅速大量增殖（或大量增殖）、产生专一的抗体（或分泌特定抗体）的特点．

故答案为：

（1）动物细胞培养

（2）2       筛选获得杂交瘤细胞

（3）灭活的病毒       无毒

（4）稀释

（5）迅速大量增殖（或大量增殖）         产生专一的抗体（或分泌特定抗体）