2026年高考真题 生物
精品
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单选题 本大题共16小题,每小题3分,共48分。在每小题给出的4个选项中,有且只有一项是符合题目要求。
1
题型: 单选题
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分值: 3分

黏菌是一类特殊的真核微生物,主要以土壤中的细菌和酵母菌为食,环境胁迫使黏菌由单细胞聚集形成多细胞聚集体(具有孢子囊结构)。关于黏菌,下列说法错误的是(  )

AC、H、O、N四种元素含量很高

B环状DNA分子存在于拟核中

C单细胞生活阶段主要以有丝分裂方式繁殖

D吞噬食物需要消耗能量

正确答案

B

解析

黏菌是真核微生物,具有成形细胞核,无拟核。细胞生物中 C、H、O、N 为基本元素,含量极高。细胞鲜重时,元素含量由高到低依次是 O、C、H、N,细胞干重时,元素含量由高到低依次是 C、O、N、H。故A正确。拟核是原核细胞结构,黏菌为真核生物,不存在拟核,故B错误。单细胞真核生物主要以有丝分裂增殖,故C正确。胞吞(吞噬食物)属于膜泡运输,需要消耗 ATP,故D正确。故选B。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

结构与功能相适应是细胞的基本特征。下列说法错误的是(  )

A染色质高度螺旋形成的染色体有利于遗传信息的转录

B线粒体内膜形成嵴并附着大量酶为能量转化提供场所

C磷脂和蛋白质等构成的细胞膜保证物质的选择性运输

D小肠上皮细胞绒毛有利于机体增强对营养物质的吸收

正确答案

A

解析

染色质与染色体形态变化影响遗传信息表达。染色体高度螺旋化,DNA 难以解旋,不利于转录;染色质松散状态才利于转录,故A错误。线粒体内膜向内折叠形成嵴,增大膜面积,附着大量呼吸酶,是有氧呼吸第三阶段场所,利于能量转化,故选项B正确。细胞膜由磷脂和蛋白质构成,载体蛋白、通道蛋白实现物质选择性运输,故C正确。小肠上皮细胞微绒毛增大吸收面积,提升营养物质吸收效率,故D正确。故选A。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

猕猴桃鲜果储藏条件如下表:

下列说法错误的是(  )

A高湿度可减少果实水分蒸发以利于果实保鲜

B低温抑制酶活性来降低果实细胞的呼吸速率

C含量低可抑制猕猴桃细胞有氧呼吸第三阶段

D有氧呼吸消耗水的量大于产生量需要人工补水

正确答案

D

解析

结合细胞呼吸原理分析果蔬保鲜条件。高湿度减少果实水分散失,防止失水萎蔫,利于保鲜,故A正确。低温降低呼吸酶活性,减弱细胞呼吸,减少有机物消耗,故B正确。低抑制有氧呼吸,有氧呼吸第三阶段消耗,因此直接抑制第三阶段,故C正确。有氧呼吸第二阶段消耗水,第三阶段产生水,正常细胞有氧呼吸产生水>消耗水,不需要人工补水,故D错误。故选D。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

生物学实验常用到不同体积分数的酒精。下列说法错误的是(  )

A用95%的酒精洗去苏丹Ⅲ染色后花生子叶薄片上的浮色

B用无水乙醇提取绿叶中的色素

C用95%的酒精冲洗经卡诺氏液浸泡的根尖

D用70%的酒精对植物组织培养的外植体进行消毒

正确答案

A

解析

高中生物实验中酒精的不同用途。苏丹Ⅲ染液染色后,用50%酒精洗去浮色,不是95%,故A错误。色素易溶于有机溶剂,无水乙醇用于提取叶绿体色素,故B正确。卡诺氏液固定细胞后,用95%酒精冲洗,故C正确。70%酒精用于外植体、皮肤、器具消毒,故D正确。故选A。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

红花是药食两用的经济作物,其分枝类型由A/a、B/b两对等位基因控制,用分散型和紧密型两株纯合植株杂交,全为分散型;自交,中分散型∶紧密型=13∶3。下列说法错误的是(  )

AA/a与B/b的遗传遵循自由组合定律

B紧密型亲本的基因型为AAbb(或aaBB)

C分散型植株中纯合子占2/13

D紧密型植株自由交配,子代中分散型占1/9

正确答案

C

解析

由题中自交,中分散型:紧密型=13:3,符合9:3:3:1的变式,因此可知A/a,B/b两对等位基因的遗传遵循自由组合定律。故A选项正确。由题意和A选项可知,基因型双显性(A_B_)、双隐性(aabb)均表现为分散型,若(A_bb)表现为分散型,则(aaB_)表现为紧密型。若(A_bb)表现为紧密型,则(aaB_)表现为分散型,且均为分散型,可得亲本组合为AAbb与aaBB杂交,因此紧密型亲本的基因型为AAbb(或aaBB)。故B选项正确。由题意和B选项可知,基因型为AaBb,自交得到后代基因型为AABB:AABb:AaBB:AaBb:AAbb:Aabb:aaBB:aaBb:aabb=1:2:2:4:1:2:1:2:1。因此可知分散型植株中纯合子占3/13。故C选项错误。

由题意和A、B、C选项可知,紧密型的基因型为AAbb:Aabb=1:2或紧密型的基因型为aaBB:aaBb=1:2,因此中的紧密型植株自由交配,子代中分散型:紧密型=1:8,因此中的紧密型植株自由交配,子代中分散型占1/9。故D选项正确。故选C。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

用某试剂处理体外培养的小鼠卵母细胞后,发现部分初级卵母细胞的纺锤体形态出现异常。纺锤体异常会导致减数分裂Ⅰ(  )

A中期染色体排列异常

B后期着丝粒异常分裂

C末期细胞板无法形成

D产生的次级卵母细胞数目异常增多

正确答案

A

解析

纺锤体功能:牵引染色体运动,决定染色体位置和分离。减数第一次分裂中期,纺锤丝牵引染色体排列在赤道板,纺锤体异常直接导致染色体排列异常,故A正确。着丝粒分裂发生在减数第二次分裂后期,且着丝粒分裂与纺锤体无关,故B错误。

动物细胞减数分裂不形成细胞板,细胞板是植物细胞分裂结构,故C错误。纺锤体异常会导致染色体分离异常,不会使次级卵母细胞数目增多,故D错误。

故选A。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

对长臂猿科的21个物种进行基因组信息分析,证实分布于云南高黎贡山的天行长臂猿是白眉长臂猿属的一个独立物种;推测出白眉长臂猿的有效种群大小在约18.7万年前下降,群体数量同步下降,约7万年前出现了一定程度的恢复,这与历史气候变化吻合;现存的白眉长臂猿各种群内存在高水平的近亲交配。下列说法错误的是(  )

A气候变化是影响白眉长臂猿数量的因素之一

B白眉长臂猿基因库组成难以恢复至7万年前水平

C当今环境促使天行长臂猿种群产生更多有利变异

D高水平的近亲交配使种群的遗传多样性降低

正确答案

C

解析

现代生物进化理论 + 种群特征。题干表明种群数量变化与历史气候变化吻合,气候是影响因素,故A正确。种群数量下降后,部分基因丢失,基因库难以恢复原有水平,故B正确。变异是不定向的,环境只能选择有利变异,不能诱导产生更多有利变异,故C错误。近亲交配使隐性致病基因纯合概率升高,种群基因交流减少,遗传多样性降低,故D正确。故选C。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

下列成语与神经调节的对应关系正确的是(  )

A“手舞足蹈”——小脑对运动的协调加强

B“巧舌如簧”——大脑皮层W区活动加强

C“面红耳赤”——自主神经系统活动减弱

D“怒发冲冠”——副交感神经活动占优势

正确答案

A

解析

神经系统分级调节、自主神经功能。小脑负责维持身体平衡、协调运动,“手舞足蹈” 体现小脑协调运动加强,故A正确。巧舌如簧是语言表达,对应大脑皮层S 区(运动性语言中枢);W 区为书写中枢,故B错误。面红耳赤是肾上腺素分泌增加,交感神经兴奋,自主神经系统活动增强,故C错误。怒发冲冠由交感神经占优势,副交感神经负责安静状态,故D错误。故选A。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

胰岛素可调节机体糖和脂肪代谢,调节失衡易引发肝细胞内脂肪堆积,形成脂肪肝。下列说法错误的是(  )

A胰岛素的靶细胞包括肝细胞、脂肪细胞和骨骼肌细胞等

B胰岛素能促进肝内脂肪的分解和氧化,减少脂肪堆积

C脂肪肝会影响胰岛素对肝细胞的调节效应

D胰岛素分泌不足会引起高血糖及肝脏脂质代谢紊乱

正确答案

B

解析

胰岛素的生理功能(降血糖)。 胰岛素作用:促进组织细胞摄取、利用、储存葡萄糖;促进葡萄糖转化为糖原、脂肪、非必需氨基酸;抑制肝糖原分解和非糖物质转化。胰岛素靶细胞几乎全身细胞,包括肝细胞、脂肪细胞、骨骼肌细胞,故A正确。胰岛素促进肝细胞合成脂肪,若胰岛素调节失衡,脂肪堆积形成脂肪肝,并非促进脂肪分解,故B错误。脂肪肝使肝细胞结构受损,影响胰岛素的调节效应,故C正确。胰岛素不足,血糖升高,同时脂质代谢紊乱,易诱发脂肪肝,故D正确。

故选B。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

黄瓜的花有雌花、雄花和两性花,但只有雌花能够结出商品瓜。我国科学家发现基因ARF3在雌花形成过程中起重要作用,如图。

注:心皮发育形成雌蕊。

下列说法正确的是(  )

A喷施生长素浓度越高,越有利于雌花形成

B适当低温刺激可促进乙烯合成,抑制雄蕊发育

CARF3缺失突变体补喷乙烯利,可促进雌花形成

D在促进雌花形成过程中,乙烯与生长素的作用相抗衡

正确答案

B

解析

植物激素与环境因素对花发育的调控。

生长素作用具有两重性,浓度过高会抑制雌花形成,并非越高越好,故A错误。

结合题图,低温促进基因3表达,进而促进乙烯合成,乙烯抑制雄蕊发育、促进心皮(雌蕊)发育,故B正确。ARF3缺失突变体,自身无法完成雌花发育通路,仅补喷乙烯利不能恢复雌花形成,故C错误。生长素、乙烯均促进雌花形成,二者协同作用,并非抗衡,故D错误。故选B。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

在水稻种植中,中密度冠层结构单位面积的产量比低密度和高密度的更高。下列解释合理的是(  )

A低密度冠层降低了单位面积水稻获取的光能

B低密度冠层水稻的群落空间结构更简单

C高密度冠层单位面积水稻的养分利用率更高

D高密度冠层使水稻的种间竞争加剧

正确答案

A

解析

种群密度与光合作用、种内 / 种间竞争。低密度冠层植株少,单位面积捕获光能少,总光合速率低,产量低,故A正确。群落空间结构指垂直、水平结构,同一地块水稻为同一种群,无群落结构,故B错误。高密度冠层植株拥挤,种内斗争剧烈,养分、光照不足,养分利用率下降,故C错误。同一块稻田中水稻是同种生物,属于种内斗争,不是种间竞争,故D错误。故选A。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

杜鹃花是云南八大名花之一。云南某高山的杜鹃花属植物分布情况如下表。

下列说法正确的是(  )

A不同植被类型分布于不同海拔范围,体现了群落的垂直结构特征

B不同杜鹃花属植物分布于不同植被类型,体现出物种生态位差异

C在各植被类型中,杜鹃花属物种丰富度由大到小为森林、草甸、灌丛

D在常绿阔叶林中建园集中种植本山的杜鹃花属植物,属于就地保护

正确答案

B

解析

群落结构、物种丰富度、生态位、生物多样性保护。不同海拔分布不同植被,属于群落水平结构(地形起伏导致);垂直结构指同一地段不同高度的分层,故A错误。不同杜鹃分布在不同植被类型,利用资源、生存空间不同,体现生态位差异,故选项B正确。物种数:寒温性针叶林 (57个物种)>寒温性灌丛 (56个物种)>高山草甸 (30个物种)>常绿阔叶林 (8个物种),C选项顺序错误,故C错误。在本地人工建园种植,属于易地保护;就地保护是建立自然保护区、原地保护,故D错误。故选B。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

全球珊瑚礁生态系统退化严重,其中多种鱼的种群数量低于环境容纳量的一半。下列说法错误的是(  )

A渔业捕捞体现了生物多样性的直接价值

B人工恢复珊瑚礁生态系统应遵循生态工程的整体原理

C人工恢复可以辅助珊瑚礁生态系统提升稳定性

D生态系统恢复过程中鱼的环境容纳量将维持稳定

正确答案

D

解析

生态系统恢复、生物多样性价值、生态工程原理。渔业捕捞为人类提供食物,属于直接价值,故A正确。生态工程整体原理:兼顾自然、经济、社会整体效益,恢复珊瑚礁需遵循,故B正确。人工辅助恢复可加快演替,提升生态系统抵抗力稳定性,故C正确。生态系统恢复过程中,环境条件不断变化,鱼的环境容纳量K值会发生改变,并非维持稳定,故D错误。故选D。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

肉类在低温下可经过高盐腌制、晾挂、发酵(乳酸菌、酵母菌为主)后延长保存期。下列说法错误的是(  )

A高盐腌制提高了细胞外渗透压使细胞脱水

B其中微生物大多数属于耐盐或嗜盐微生物

C发酵产生的乳酸可抑制杂菌生长强化防腐

D乳酸菌、酵母菌发酵过程中均可产生

正确答案

D

解析

微生物呼吸类型、发酵原理。高盐使外界渗透压高于微生物细胞,细胞失水,抑制微生物生长,故A正确。高盐环境下存活的微生物多为耐盐 / 嗜盐菌,故B正确。乳酸菌发酵产生乳酸,降低pH,抑制杂菌繁殖,防腐,故C正确。乳酸菌为无氧呼吸只产生乳酸,不产;酵母菌无氧呼吸产酒精+,故D错误。故选D。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

菊花的组织培养实现了从茎段到植株的转变。下列说法正确的是(  )

A培养基、玻璃器皿和金属器具需进行干热灭菌

B诱导愈伤组织的培养基中,生长素与细胞分裂素的质量比大于1

C外植体茎段先脱分化形成愈伤组织,再诱导生芽

D愈伤组织后续分化培养过程一般不需要光照Y

正确答案

C

解析

植物组织培养技术。培养基采用高压蒸汽灭菌;玻璃器皿、金属器具可干热灭菌,培养基不能干热灭菌,故A错误。生长素/细胞分裂素比值偏高,促进生根;比值偏低促进生芽,故B错误。组织培养流程:外植体→脱分化→愈伤组织→再分化(生芽、生根),故C正确。再分化阶段需要光照,叶绿素合成需要光,故D错误。故选C。

1
题型: 单选题
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分值: 3分

内含肽(Int)可通过自我催化实现自我切除并无痕连接两侧肽链。构建编码“内含肽+X蛋白”和“内含肽+Y蛋白”的基因,将其导入真核细胞表达后,内含肽自我切除生成X+Y融合蛋白,如图。

下列说法正确的是(  )

A构建X+Y融合蛋白基因导入细胞,会因碱基序列相互影响而使蛋白功能异常

B内含肽序列需嵌入X蛋白的功能结构内,以保证获得的融合蛋白功能正常

C不同内含肽之间通过能匹配的结构相互识别,发挥特异性切除和连接作用

D为X+Y融合蛋白提供“内含肽+某蛋白”,可赋予X+Y融合蛋白新的结构

正确答案

C

解析

蛋白质加工、内含肽的作用机制。内含肽可自我切除并无痕连接,不会影响X、Y蛋白原有功能,故A错误。若内含肽嵌入X蛋白功能区,切除过程会破坏蛋白功能结构,因此不能嵌入功能区,故B错误。内含肽依靠特异性空间结构相互识别,完成精准切除和肽链连接,故C正确。额外提供“内含肽 + 某蛋白”,无法改变已有X+Y融合蛋白的结构,故D错误。故选C。

填空题 本大题共5小题,每小题10分,共50分。把答案填写在题中横线上。
1
题型:填空题
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分值: 10分

研究人员使用人工气候室探究温度对某品种水稻产量的影响,实验结果如下表。

回答下列问题:

(1)水稻叶绿体中吸收光能的色素分布在________上。光能被吸收后转化为________储存在NADPH和ATP中参与暗反应。暗反应将转化为储存能量的________,部分来自细胞呼吸。细胞中产生的场所包括________。

(2)在实验设置的三个温度下,水稻固定速率最高的是________℃,理由是________。

(3)某地持续高温(34~38℃)伴随干燥天气,此时,在大田生产中水稻的光合速率会降低,其原因是________。

正确答案

(1) 类囊体薄膜(基粒);活跃的化学能;有机物(糖类/碳水化合物);细胞质基质、线粒体基质

(2) 38;总光合速率(真正光合速率)=净光合速率+呼吸速率,38℃时二者之和最大

计算:28℃:(22.52+3.26=25.78;  34℃:23.41+4.56=27.97;  38℃:24.15+5.59=29.74,故38℃总光合速率最高。

高温、干旱天气下,植物气孔部分关闭,吸收减少,暗反应速率下降,光合速率降低。

解析

(1) 光合色素分布在叶绿体类囊体薄膜;光能转化为 ATP、NADPH 中活跃化学能;暗反应固定合成有机物。

(2) 细胞呼吸产:有氧呼吸第二阶段(线粒体基质)、无氧呼吸(细胞质基质)。

真正光合速率 = 光照下吸收速率(净光合作用速率)+ 黑暗下释放速率(呼吸作用速率)。

(3) 干旱导致气孔关闭, 供应不足,是大田光合速率下降的主要原因。

1
题型:填空题
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分值: 10分

研究人员在水稻辐射诱变群体中筛选到一株黄叶植株(突变型),将其与绿叶植株(野生型)杂交,全部为绿叶;自交,中绿叶196株,黄叶63株。回答下列问题:

(1)水稻叶色性状中,隐性性状为________。让中的绿叶植株全部自交,后代表型及比例为________。

(2)基因组分析发现,突变型的基因的序列上有1个碱基发生缺失(图a)。起始密码子:AUG;终止密码子:UAA、UAG、UGA。

注:省略部分不含有起始密码子、终止密码子对应的序列,碱基数为3的倍数。

①基因通过________过程形成mRNA。在该mRNA中,片段1对应的碱基序列是5′-________-3′。

②与野生型的基因Y相比,基因编码的肽链长度________(填“变长”“变短”或“不变”),原因是_________。

(3)基因编码的肽链无法形成有活性的蛋白质,根据图b推测基因Y的作用是________。

正确答案

(1) 黄叶;绿叶∶黄叶=5:1

(2) ① 转录;GUGCA(根据模板链互补推导)

② 变短;碱基缺失导致转录的mRNA中提前出现终止密码子,翻译提前终止

(3) 控制叶绿素的合成(维持叶绿素含量稳定)

解析

遗传分析:绿叶×黄叶→全绿叶,黄叶为隐性;绿叶:黄叶≈3:1,由一对等位基因控制。

绿叶基因型及比例:AA:Aa=1:2。

AA自交全为绿叶;Aa自交后代3/4绿叶、1/4黄叶。

子代黄叶比例:2/3×1/4=1/6;绿叶5/6,即绿叶:黄叶=5:1。

(2) mRNA与DNA的模板链互补,与编码链相同。基因转录形成 mRNA;碱基缺失引发基因突变,使mRNA提前出现终止密码子,肽链翻译提前终止,长度变短。

(3) 图b显示突变体叶绿素a、b含量大幅下降,说明基因Y调控叶绿素合成。

1
题型:填空题
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分值: 10分

活化的T细胞表面的PD-1与正常细胞表面的PD-L1结合,不触发免疫反应,而肿瘤细胞会过量表达PD-L1以逃避机体免疫系统的“追杀”。回答下列问题:

(1)细胞毒性T细胞(CTL)是机体抗肿瘤免疫的核心细胞,其活化过程需要________(答出2点即可)等细胞参与,CTL可以________肿瘤细胞使其死亡。

(2)肿瘤细胞过量表达PD-L1与CTL表面的PD-1结合,从而实现________。

(3)临床上,可用PD-L1抗体治疗肿瘤。制备该抗体时,可将编码PD-L1抗体基因导入受体细胞,筛选出能稳定分泌PD-L1抗体的细胞,筛选的原理是________。

(4)目前PD-L1抗体、化疗药物A和PD-L1抗体—化疗药物A偶联物(ADC)已用于肿瘤治疗,科研小组为比较三者的抗肿瘤效果,用肿瘤小鼠进行以下实验。

①预期结果:与甲组相比,乙、丙、丁三组肿瘤生长均受到抑制,抑制效果最优的是________组,理由是________。

②实验中发现,丁组小鼠出现正常细胞受损,可能的原因是________。

正确答案

(1) 抗原呈递细胞、辅助性 T 细胞(答2种即可);裂解(使靶细胞裂解死亡)

(2) 免疫逃逸(逃避细胞免疫的攻击)

(3) 只有导入目的基因的受体细胞能合成PD-L1抗体,可通过抗原-抗体特异性结合进行筛选

(4) ① 丁;ADC同时具备抗体的靶向识别作用和化疗药物的杀伤作用,能够更大程度的抑制肿瘤

② 正常细胞也表达PD-L1,ADC结合正常细胞表面PD-L1后,化疗药物杀伤正常细胞

解析

细胞毒性T细胞活化需要抗原呈递细胞处理并呈递抗原,并且辅助性T细胞分泌的细胞因子能够促进细胞毒性T细胞增殖分化;CTL可裂解肿瘤靶细胞。

(2)肿瘤细胞PD-L1与CTL的PD-1结合,抑制免疫作用,实现免疫逃逸。

(3)单克隆抗体筛选原理:抗原与抗体特异性结合。

(4)ADC是抗体+化疗药物偶联物,靶向性+药物杀伤效果最强;正常细胞也有PD-L1,因此会被误伤。

1
题型:填空题
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分值: 11分

研究人员在某海滨荒滩开展生态恢复实验。实验基于当地的一条食物链“海三棱藨草(藨草)→天津厚蟹(厚蟹)→锯缘青蟹(青蟹)”,在样方内种植藨草并引入厚蟹,随后设置实验组(引入青蟹)与对照组(不引入青蟹),结果如图。

回答下列问题:

(1)该食物链中,青蟹属于________级消费者。

(2)实验组藨草种群密度的变化符合________(填“A”或“B”)曲线,6月中旬样方内厚蟹种群密度可能会________(填“高于”“低于”或“等于”)对照组。若A曲线的模式使海滨生态恢复,而B曲线的模式使海滨回到荒滩状态,则可说明种间相互作用结果影响了群落演替的________。

(3)增加植物固碳量是实现“双碳”目标的措施之一,碳流入藨草的途径为光合作用,流出藨草的途径有________(答出3点即可)。“下行效应”理论认为高营养级会调控低营养级,从而调控生产者的固碳量。理论上,一条食物链的偶数营养级生物量增加会使生产者固碳量________,但在自然生态系统中难以验证,其原因是________。要提升本实验中植物的固碳量,可以采取的措施有________(答出1点即可)。

正确答案

(1) 次

(2) A;低于;速度和方向

(3) 自身呼吸作用消耗、被厚蟹捕食、枯枝落叶被分解者分解、流向分解者(答3点);增加;自然生态系统食物网复杂,存在多条食物链、多种生物相互制约;适量增加青蟹数量/合理调控各营养级生物数量/适度种植藨草(答1点)

解析

(1) 食物链:海三棱藨草(第一营养级、生产者)→厚蟹(第二营养级、初级消费者)→青蟹(第三营养级、次级消费者)。

(2) 引入青蟹(捕食厚蟹),厚蟹数量下降,藨草被捕食减少,种群密度上升(A 曲线);实验组厚蟹被青蟹捕食,密度低于对照组。种间关系改变群落演替的速度和方向。

(3) 生产者碳流出途径:呼吸作用、流向下一营养级、遗体残体(枯枝败叶)流向分解者。下行效应:偶数营养级(青蟹,第三营养级为奇数;厚蟹第二营养级为偶数)生物量增加,捕食压力改变,生产者固碳量上升;自然生态系统食物网复杂,难以单独验证单一食物链效应。

1
题型:填空题
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分值: 11分

UW4菌株可表达ACC脱氨酶减少植物乙烯合成,促进植物生长,但定殖植物根部能力较弱。现欲将增强定殖能力的五肽整合到UW4中ACC趋化受体(ACCR)的羧基端。回答下列问题:

第一步:构建pEX质粒(图a),复制原点(ori)不能在UW4菌株中启动复制(质粒不复制策略)。

(1)PCR每次循环一般可以分为变性、复性和________三步。

(2)构建pEX质粒时,用2种限制酶的目的是________(答出2点)。

第二步:将pEX质粒导入UW4菌株中,利用DNA同源区段可发生交换的原理,改造得到工程菌UW4-2(图b)。

(3)我国科学家将来自玉米的α-淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中,使花粉失活,防止转基因花粉传播;在UW4-2菌株构建中使用了质粒不复制策略。此类设计的主要目的是________。

(4)要获得UW4-2菌株,需筛选三次。第一次在培养基中添加_________,即可筛选出UW4-1菌株,筛选的原理是________;在第二次筛选培养基中添加________。筛选后,培养基中仍同时存在两种菌株,第一种菌株是UW4-2,另一种菌株的拟核DNA结构是________(填图c中序号);可以通过设计特异性引物进行PCR扩增相应序列并________。

正确答案

(1) 延伸

(2) 防止质粒自身环化、防止目的基因与质粒反向连接

(3) 防止外源基因(质粒/工程菌)扩散,避免基因污染

(4) 庆大霉素;只有发生第一次同源交换的UW4-1菌株含有庆大霉素抗性基因,可在含庆大霉素培养基上存活;蔗糖;②;鉴定扩增产物(电泳检测、测序)

解析

(1) PCR三个步骤:变性→复性→延伸。

(2) 双酶切优点:两种限制酶产生不同黏性末端,避免质粒自连、目的基因反向插入。(3) 质粒不复制、花粉失活设计,均为防止转基因扩散,杜绝基因污染。

(4) 筛选逻辑:

第一次筛选:加庆大霉素,仅含抗性基因的UW4-1存活;

第二次筛选:换用其他抗生素,筛选完成双交换的UW4-2;

剩余杂菌为未完成同源重组的菌株;利用特异性PCR扩增后,通过电泳/测序鉴定目标菌株。

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