热门试卷

解：（1）根据题意和图示分析可知：图1基因表达载体中已有目的基因、启动子和标记基因，所以没有标注出来的基本结构是终止子．

（2）图1中启动子是RNA聚合酶酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达即转录过程；氨苄青霉素抗性基因的作用是作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来．

（3）构建基因表达载体的过程中，必须用相同的限制酶切割（含目的基因的外源DNA分子）和运载体，以产生相同的黏性末端，再加入DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．

（4）β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达，可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，这样可以防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解．

（5）溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键，由于β-半乳糖苷酶中含有多个甲硫氨酸，而胰岛素的A、B链中不含甲硫氨酸，所以用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链，且β-半乳糖苷酸被切成多个肽段．

（6）由于一个肽链中至少有一个游离的氨基和一个游离的羧基，在肽链内部的R基中可能也有氨基和羧基，而胰岛素含有A链和B链，所以每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量至少是2个．

故答案为：

（1）终止子   

（2）RNA聚合    作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来

（3）限制酶和DNA连接酶

（4）防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解

（5）β-半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸，而胰岛素A、B链中不含甲硫氨酸

（6）至少2个    两条肽链的一端各有一个游离的氨基，氨基酸的R基中可能还含有游离的氨基

解：（1）在获得转基因动物的过程中，最常用的运载体是质粒，限制酶识别双链DNA分子的磷酸二酯键，并切割DNA双链．

（2）小鼠弯曲尾（B）对正常尾（b）显性，将一弯曲尾雄鼠与一正常尾雌鼠交配，F1中弯曲尾雌鼠：正常尾雄鼠=1：1，说明小鼠尾形表现与性别有关，目的基因位于X染色体上，根据亲子代情况，可以推出亲本基因型是XbXb 和XBY子一代雌鼠基因型为XBXb．

故答案为：

（1）质粒   磷酸二酯键

（2）X   XBXb

解答：解：（1）基因表达载体的组成包括启动子、终止子、目的基因和标记基因等．

（2）动物细胞培养时，需用胰蛋白酶将动物组织块分散成单个细胞．

（3）要得到更多的卵（母）细胞需用促性腺激素对母畜进行超数排卵处理．

（4）图中④表示核移植过程，成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，以保证克隆后代的遗传性状主要来自于供体核．

（5）⑤表示胚胎移植过程，应该选择处于桑椹胚或囊胚期的胚胎进行移植；胚胎移植能够成功进行的生理基础是受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应．

故答案为：

（1）标记基因  

（2）胰蛋白酶（胶原蛋白酶） 

（3）促性腺激素 

（4）去核   核移殖

（5）胚胎移植    桑椹胚期或囊胚期     受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应

解：（1）纤维细胞E6启动子两侧是限制酶HindⅢ和BamHⅠ的切割位点，且用这两种限制酶切割可以去除花椰菜病毒启动子，因此过程①中所用的限制性内切酶是HindⅢ、BamHⅠ；β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2）两侧都是限制酶SmaⅠ的切割位点，因此②中所用的限制性内切酶是SmaⅠ．

（2）正、反义基因表达载体总长度相等，NotⅠ酶切位点在目的基因中的位置不一样，因此只用NotⅠ酶切反义基因表达载体可获得两种长度的DNA片段，即5.95+0.05=6.0kb、9.45+3.25=12.7kb．

（3）因为在普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），能在纤维细胞中特异性表达，产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解，棉纤维长度变短．而导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与棉花细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而抑制基因的表达，其意义是阻止β-甘露糖苷酶合成，使棉纤维更长．

故答案为：

（1）HindⅢ、BamHⅠSmaⅠ

（2）2     6.0kb、12.7kb

（3）阻止β-甘露糖苷酶合成，使棉纤维更长