热门试卷

Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图．请回答：

（1）在上皮细胞进行培养时，应使用______酶将细胞分散开制成细胞悬液，培养基的成分除无机盐、糖、氨基酸、核苷酸微量元素等营养成分外通常还需要加入______．为了防止培养过程中的污染，细胞培养液中需添加一定量的______；为了便于清除代谢产物，防止细胞产物的积累对细胞自身造成危害，应定期更换______．

（2）核移植的受体卵母细胞应培养至______期，此时应先去除卵母细胞的______．

（3）ES细胞可由囊胚的______分离培养获得，它的功能特点是______，人类可以对其进行______形成造血干细胞．

（4）基因导入之前必须构建基因表达载体，基因表达载体的组成要有目的基因、______和终止子、______等．

（5）该治疗方式属于______（体内、体外）基因治疗．

我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质．如图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答．

（1）铁结合蛋白基因来自菜豆，可通过______扩增获取，如果该基因脱氧核苷酸序列已知且比较小，还可______方法直接人工合成．

（2）铁结合蛋白基因需插入到 重组Ti质粒上的______之间．

（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得______；培养基3与培养基2的区别是______．检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因稻米______．

（4）将T0代植株上收获的种子种植成T1代株系，检测各单株的潮霉素抗性．若少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是______．

我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质．如图为培育转基因水稻流程示意图，请回答下列问题：

（l）铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用______法获得此目的基因．

（2）构建重组Ti质粒时，通常要用分别______切割______和______．

（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得______．

（4）为研究外源基因的遗传方式，将T0代植株上收获的种子种植成T1代株系，检测各单株的潮霉素抗性．在检测的多数T1代株系内，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3：1，此结果说明外源基因的遗传符合______定律．有少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是______．

（2015秋•南京月考）内皮素（ET）是一种含21个氨基酸的多肽，它有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用．研究发现内皮素功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系．内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应．ETA是内皮素的主要受体，科研人员试图通过构建表达载体，实现ETA基因在细胞中高效表达，为后期ETA的体外研究以及拮抗剂的筛选、活性评价等奠定基础．其过程如下（图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为C↓CCGGG，限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG）．请分析回答：

（1）完成过程①需要的酶是______；与过程②相比，过程①特有的碱基配对方式是______．

（2）过程③中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使______键断开，形成目的基因的黏性末端是______．用两种限制酶切割，获得不同的黏性末端，其主要目的是______．

（3）过程⑥中，要用______预先处理大肠杆菌，使其处于容易吸收外界DNA的感受态．

（4）利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因，目的是______．

（5）人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体，内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后，会刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性，从而使黑色素急剧增加．美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果，这是因为ETA能与内皮素结合，减少了内皮素与______的结合，抑制了内皮素对黑色素细胞的增殖和黑色素的形成．