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简答题

(2015秋•钦州期末)Ⅰ.一对表现型正常的夫妇,生了一个镰刀型细胞贫血症患儿.在他们欲生育第二胎时,发现妻子的双侧输卵管完全堵塞,不能完成体内受精.医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断,过程如图.

请回答:

(1)过程①是指在体外进行的______处理,从而使精子与卵子结合形成受精卵;过程②称为______

(2)在对胎儿进行镰刀形细胞贫血症的产前基因诊断时,要先从羊水中的胎儿细胞提取物质③______进行PCR扩增.然后用Ⅱ对扩增产物进行切割,产生多个片段的酶切产物.据此判断,Ⅱ是一种______酶.

(3)不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同,形成不同的电泳条带.该家庭成员的镰刀型细胞贫血症基因分析的电泳带谱如④,据此判断胎儿为______

Ⅱ.生态工程所遵循的基本原理有整体性、协调与平衡、____________等原理.一般来说,生态工程的主要任务是对______ 进行修复,对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善,并提高生态系统的生产力.

正确答案

解:Ⅰ.(1)过程①为体外受精作用前,需要对精子进行获能处理.过程②是将早期胚胎放入子宫中,专业术语为胚胎移植.

(2)产前基因诊断时,要先从羊水中的胎儿细胞提取DNA进行PCR扩增,然后用限制性核酸内切酶II对扩增产物进行切割,产生多个片段的酶切产物.

(3)不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同,形成不同的电泳条带.该家庭成员的镰刀形细胞贫血症基因分析的电泳带谱如④,可以看出父母为正常携带者,而胎儿的条带与患儿的条带完全不同,据此判断该胎儿为正常.

Ⅱ.生态工程所遵循的基本原理有整体性、协调与平衡、物质循环再生和物种多样性(系统学和工程学)等原理.一般来说,生态工程的主要任务是对已被破坏的生态环境(或受损的生态系统)进行修复,对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善,并提高生态系统的生产力.

故答案为:

Ⅰ.(1)精子获能     胚胎移植

(2)DNA    限制性核酸内切

(3)正常

Ⅱ.物质循环再生 物种多样性(系统学和工程学)  已被破坏的生态环境 (或受损的生态系统)

解析

解:Ⅰ.(1)过程①为体外受精作用前,需要对精子进行获能处理.过程②是将早期胚胎放入子宫中,专业术语为胚胎移植.

(2)产前基因诊断时,要先从羊水中的胎儿细胞提取DNA进行PCR扩增,然后用限制性核酸内切酶II对扩增产物进行切割,产生多个片段的酶切产物.

(3)不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同,形成不同的电泳条带.该家庭成员的镰刀形细胞贫血症基因分析的电泳带谱如④,可以看出父母为正常携带者,而胎儿的条带与患儿的条带完全不同,据此判断该胎儿为正常.

Ⅱ.生态工程所遵循的基本原理有整体性、协调与平衡、物质循环再生和物种多样性(系统学和工程学)等原理.一般来说,生态工程的主要任务是对已被破坏的生态环境(或受损的生态系统)进行修复,对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善,并提高生态系统的生产力.

故答案为:

Ⅰ.(1)精子获能     胚胎移植

(2)DNA    限制性核酸内切

(3)正常

Ⅱ.物质循环再生 物种多样性(系统学和工程学)  已被破坏的生态环境 (或受损的生态系统)

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如图为培育转基因小鼠的部分过程示意图.请回答下列问题:

(1)若需在短时间内获得较多的目的基因,通常采用______技术.若需在短时间内获得较多的

转基因小鼠,可以将处于______的早期胚胎进行______

(2)目的基因不能直接、单独注入A细胞的原因是______,因此需要构建含有目的基因的______

(3)图中的A细胞通常为______细胞,将目的基因导入该细胞常用的方法是______

(3)小鼠出生后可用其尾巴进行DNA检测,通过______方法,检测出携带目的基因的小鼠.至于目的基因是否合成相应的蛋白质,可从转基因小鼠中提取蛋白质,并用相应的抗体进行______杂交,若有杂交带出现,则表明小鼠体内的目的基因______

(4)在目的基因导入小鼠的A细胞时,目的基因可能随机地插入到该细胞的DNA中.这些细胞有的能发育成转基因小鼠,有的却死亡.请分析目的基因插入后导致有些A细胞死亡的最可能原因______

正确答案

解:(1)体外扩增DNA(基因)应用PCR技术.来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质,因此要在短时间内获得较多的转基因小鼠,可采用胚胎分割移植技术,一般选项发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行切割.

(2)由于目的基因不能在受体细胞稳定存在(并遗传给下一代)和表达,因此将目的基因导入受体细胞前需要构建基因表达载体.

(3)将目的基因导入受体细胞,如受体细胞是动物细胞常用受精卵,导入的方法是显微注射法.

(4)检测外源基因是否导入受体细胞用DNA分子杂交技术,检测目的基因是否成功表达蛋白质采用抗原-抗体杂交技术,如出现杂交带,则表明已表达.

(5)外源基因导入使小鼠死亡,可能是小鼠发育所必需的蛋白质不存在,即这些基因可能被破坏不能正常表达.

答案:

(1)PCR    桑椹胚或囊胚期    胚胎分割移植

(2)目的基因不能在受体细胞稳定存在(并遗传给下一代)和表达     表达载体(或重组质粒)

(3)受精卵    显微注射法

(4)DNA分子杂交    抗原-抗体      已表达

(5)外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达

解析

解:(1)体外扩增DNA(基因)应用PCR技术.来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质,因此要在短时间内获得较多的转基因小鼠,可采用胚胎分割移植技术,一般选项发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行切割.

(2)由于目的基因不能在受体细胞稳定存在(并遗传给下一代)和表达,因此将目的基因导入受体细胞前需要构建基因表达载体.

(3)将目的基因导入受体细胞,如受体细胞是动物细胞常用受精卵,导入的方法是显微注射法.

(4)检测外源基因是否导入受体细胞用DNA分子杂交技术,检测目的基因是否成功表达蛋白质采用抗原-抗体杂交技术,如出现杂交带,则表明已表达.

(5)外源基因导入使小鼠死亡,可能是小鼠发育所必需的蛋白质不存在,即这些基因可能被破坏不能正常表达.

答案:

(1)PCR    桑椹胚或囊胚期    胚胎分割移植

(2)目的基因不能在受体细胞稳定存在(并遗传给下一代)和表达     表达载体(或重组质粒)

(3)受精卵    显微注射法

(4)DNA分子杂交    抗原-抗体      已表达

(5)外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达

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限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-GGATCC-,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-GATC-.在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点.

(1)请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端.______

(2)请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端.______

(3)在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?

______.因为:______

正确答案

解:(1)限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-GGATCC-,因此质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端为:

(2)限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-GATC-,因此目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端为:

(3)限制性内切酶Ⅰ和限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点不同,但两种切割形成的黏性末端相同,因此可在DNA连接酶的作用下连接起来.

故答案为:

(1)

(2)

(3)能    因为它们有相同的粘性末端

解析

解:(1)限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-GGATCC-,因此质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端为:

(2)限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-GATC-,因此目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端为:

(3)限制性内切酶Ⅰ和限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点不同,但两种切割形成的黏性末端相同,因此可在DNA连接酶的作用下连接起来.

故答案为:

(1)

(2)

(3)能    因为它们有相同的粘性末端

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图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图.据图回答:

(1)甲图所示为______技术,可以用来扩增目的基因.此过程中所使用的酶是______

(2)乙图为获得抗虫棉技术的流程.A过程需要的酶有____________.图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是______. 在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长.则C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入______

(3)检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用标记的______与提取出的______做分子杂交.

正确答案

解:(1)PCR技术可以在体外大量扩增目的基因;PCR过程需要较高的温度,因此需要热稳定DNA聚合酶.

(2)图中A为基因表达载体的构建过程,该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒.图示将目的基因导入植物受体细胞的方法是农杆菌转化法.重组质粒上的标记基因是卡那霉素抗性基因,因此C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入卡那霉素,以淘汰不含重组质粒的细胞.

(3)检测目的基因是否转录出mRNA常采用分子杂交技术,即使用标记的目的基因(探针)与提取出的mRNA分子做分子杂交.

故答案为:

(1)PCR    Taq酶(耐高温的DNA聚合酶)

(2)限制酶、DNA连接酶     农杆菌转化法    卡那霉素

(3)目的基因    mRNA分子

解析

解:(1)PCR技术可以在体外大量扩增目的基因;PCR过程需要较高的温度,因此需要热稳定DNA聚合酶.

(2)图中A为基因表达载体的构建过程,该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒.图示将目的基因导入植物受体细胞的方法是农杆菌转化法.重组质粒上的标记基因是卡那霉素抗性基因,因此C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入卡那霉素,以淘汰不含重组质粒的细胞.

(3)检测目的基因是否转录出mRNA常采用分子杂交技术,即使用标记的目的基因(探针)与提取出的mRNA分子做分子杂交.

故答案为:

(1)PCR    Taq酶(耐高温的DNA聚合酶)

(2)限制酶、DNA连接酶     农杆菌转化法    卡那霉素

(3)目的基因    mRNA分子

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回答有关遗传信息传递与表达的问题.

一个DNA分子被限制酶H剪切,产生A~D四个片段,如图.据图回答问题.

(1)由如图可知,DNA分子被限制酶H识别的序列有______个.

(2)若用箭头和线条表示限制酶的作用位置,下面正确表示限制酶H切割DNA分子位点的是______

重症综合性免疫缺乏症(SCID)患者缺乏正常的人体免疫功能,一旦被细菌或病毒感染,就会发病死亡.如图显示转基因T淋巴细胞的制备过程,该过程用正常功能的基因(ada基因)增补患者体内缺陷基因,从而达到治疗SCID的目的.据图回答问题.

(3)正常功能的基因与患者体内缺陷基因的主要区别是______序列不同.

(4)图中,目的基因是______;充当运载体的是______

(5)ada基因导入T淋巴细胞后,整合到细胞染色体过程中,遗传信息传递的途径是______

A.RNA→RNA-DNA杂合分子→DNA         B.RNA→RNA

C.DNA→DNA-RNA杂合分子→RNA         D.DNA→DNA

(6)若将ada基因导入患者体内所有的体细胞,是否可以提高治疗效果?为什么?______

正确答案

解:(1)由如图可知,DNA分子被限制酶H切割后形成4个片段,说明DNA分子被限制酶H识别的序列有3个.

(2)A、该限制酶切割形成的是黏性末端,不是平末端,A错误;

BC、根据图中切割形成的DNA片段可知,限制酶H切割DNA分子的位点是B而不是C,B正确,C错误;

DE、限制酶的作用部位是磷酸二酯键,不包括氢键,C错误,D错误.

故选:B.

(3)患者体内缺陷基因是正常基因突变形成的,而基因突变是指基因中碱基对的增添、缺失或替换,因此正常功能的基因与缺陷基因的主要区别是脱氧核苷酸或碱基对序列不同.

(4)图中,正常功能的基因是ada基因,因此目的基因是ada基因;由图可知,充当运载体的是逆转录病毒.

(5)运载体是逆转录病毒,因此ada基因导入T淋巴细胞后,整合到细胞染色体过程中,遗传信息传递的途径是RNA→RNA-DNA杂合分子→DNA.

(6)因为基因通常只在一种类型的体细胞中表达(或只有T淋巴细胞表达ada基因;或某些疾病只需少量基因表达产物即可改善症状,不需要有关体细胞都充分表达),因此将ada基因导入患者体内所有的体细胞不能提高治疗效果.

故答案为:

(1)3

(2)B

(3)脱氧核苷酸/碱基对

(4)ada基因逆转录病毒

(5)A

(6)否.因为基因通常只在一种类型的体细胞中表达(或只有T淋巴细胞表达ada基因;或某些疾病只需少量基因表达产物即可改善症状,不需要有关体细胞都充分表达)

解析

解:(1)由如图可知,DNA分子被限制酶H切割后形成4个片段,说明DNA分子被限制酶H识别的序列有3个.

(2)A、该限制酶切割形成的是黏性末端,不是平末端,A错误;

BC、根据图中切割形成的DNA片段可知,限制酶H切割DNA分子的位点是B而不是C,B正确,C错误;

DE、限制酶的作用部位是磷酸二酯键,不包括氢键,C错误,D错误.

故选:B.

(3)患者体内缺陷基因是正常基因突变形成的,而基因突变是指基因中碱基对的增添、缺失或替换,因此正常功能的基因与缺陷基因的主要区别是脱氧核苷酸或碱基对序列不同.

(4)图中,正常功能的基因是ada基因,因此目的基因是ada基因;由图可知,充当运载体的是逆转录病毒.

(5)运载体是逆转录病毒,因此ada基因导入T淋巴细胞后,整合到细胞染色体过程中,遗传信息传递的途径是RNA→RNA-DNA杂合分子→DNA.

(6)因为基因通常只在一种类型的体细胞中表达(或只有T淋巴细胞表达ada基因;或某些疾病只需少量基因表达产物即可改善症状,不需要有关体细胞都充分表达),因此将ada基因导入患者体内所有的体细胞不能提高治疗效果.

故答案为:

(1)3

(2)B

(3)脱氧核苷酸/碱基对

(4)ada基因逆转录病毒

(5)A

(6)否.因为基因通常只在一种类型的体细胞中表达(或只有T淋巴细胞表达ada基因;或某些疾病只需少量基因表达产物即可改善症状,不需要有关体细胞都充分表达)

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天长市是全国重要的商品粮生产基地,常年种植水稻在120万亩左右.筛选适合大面积推广种植的高产、优质、抗病的水稻品种推广种植显得尤为重要.如图表示水稻育种的一些途径.请回答下列问题:

(1)以矮秆易感稻瘟病(ddrr)和高秆抗稻瘟病(DDRR)水稻为亲本进行杂交,得F1.F1自交产生F2,F2中不能稳定遗传的占______,选F2中的矮秆抗病的水稻植株进行自交,若发生性状分离,则所有子代中的ddRR和ddRr的比是______

(2)若要在较短时间内获得上述新品种水稻,可选图中______(填数字)途径所用的方法.

(3)其中⑨⑩途径的育种方法常用到的一种试剂是______

(4)科学工作者欲培育能产生人体蛋白的水稻新品种,应该选择图中______(填数字)表示的途径最为合理可行,该技术手段主要包括四个步骤,即:提取目的基因、______、将目的基因导入受体细胞、______

(5)图中______(填数字)所表示的育种途径具有典型的不定向性.

正确答案

解:(1)以矮秆易感稻瘟病(ddrr)和高秆抗稻瘟病(DDRR)水稻为亲本进行杂交,得F1(DdRr),F1自交产生F2,F2中能稳定遗传的占,不能稳定遗传的占1-=;选F2中的矮秆抗病的水稻植株(ddRR、ddRr)进行自交,子代中的ddRR和ddRr的比是():()=3:2.

(2)若要在较短时间内获得上述新品种水稻,则需要采用单倍体育种方法,即图中⑤⑦⑧途径所用的方法.

(3)其中⑨⑩途径的育种方法为多倍体育种,该方法常用到的一种试剂是秋水仙素,其作用是抑制纺锤体的形成,导致染色体数目加倍.

(4)要培育出能产生人体蛋白的水稻新品种,应该采用基因工程技术,即选择图中③④表示的途径,该技术手段主要包括四个步骤,即:提取目的基因、目的基因和运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达.

(5)图中①②所表示的育种途径为诱变育种,其原理是基因突变,具有不定向性.

故答案为:

(1)   3:2      

(2)⑤⑦⑧

(3)秋水仙素

(4)③④目的基因和运载体结合      目的基因的检测和表达

(5)①②

解析

解:(1)以矮秆易感稻瘟病(ddrr)和高秆抗稻瘟病(DDRR)水稻为亲本进行杂交,得F1(DdRr),F1自交产生F2,F2中能稳定遗传的占,不能稳定遗传的占1-=;选F2中的矮秆抗病的水稻植株(ddRR、ddRr)进行自交,子代中的ddRR和ddRr的比是():()=3:2.

(2)若要在较短时间内获得上述新品种水稻,则需要采用单倍体育种方法,即图中⑤⑦⑧途径所用的方法.

(3)其中⑨⑩途径的育种方法为多倍体育种,该方法常用到的一种试剂是秋水仙素,其作用是抑制纺锤体的形成,导致染色体数目加倍.

(4)要培育出能产生人体蛋白的水稻新品种,应该采用基因工程技术,即选择图中③④表示的途径,该技术手段主要包括四个步骤,即:提取目的基因、目的基因和运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达.

(5)图中①②所表示的育种途径为诱变育种,其原理是基因突变,具有不定向性.

故答案为:

(1)   3:2      

(2)⑤⑦⑧

(3)秋水仙素

(4)③④目的基因和运载体结合      目的基因的检测和表达

(5)①②

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请回答有关下图的问题:

(1)图1中①~⑤所示的生物工程称为蛋白质工程.该工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过对______的修饰或合成,对现有蛋白质进行改造,或制造出一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求.

(2)图1中④所示过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是______ (请将模板链上的碱基写在前面).

(3)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产,则构建基因表达载体时,图2中序号[1]代表的是乳腺蛋白基因的______;且在图1中⑨过程之前,要对精子进行筛选,保留含性染色体______的精子.

(4)图中[3]______的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来.

(5)为获得较多的受精卵进行研究,图1中⑥过程一般需要对供体用______激素处理,使其超数排卵;为提高培育成功率,进行⑩过程之前,要对供、受体动物做______处理.

(6)对早期胚胎进行______技术,可获得同卵双胎或多胎.

正确答案

解:(1)蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过对基因的修饰或合成,对现有的蛋白质进行改造,或制造出一种新的蛋白质,以满足人类生产生活的需求.

(2)图2中④表示反转录过程,该过程遵循的碱基互补原则为U-A、A-T、C-G、G-C,而翻译过程中遵循的碱基互补原则为U-A、A-U、C-G、G-C,前者不同于翻译过程的是A-T.

(3)基因表达载体主要由目的基因、标记基因、启动子和终止子.图中3是标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来.

(4)制备乳腺生物反应器过程中,在构建基因表达载体时,需在目的基因前加上乳腺蛋白基因的启动子;因为只有雌性个体能分泌乳汁,所以在图甲中⑨过程之前,要对精子进行筛选、保留含性染色体X的精子.

(5)为获得较多的受精卵进行研究,图甲中⑥过程一般用促性腺激素对供体做超数排卵处理;为提高培育成功率,进行胚胎移植过程之前,要对供、受体动物做同期发情处理.

(6)对早期胚胎进行胚胎分割移植技术,可获得同卵双胎或多胎.

故答案为:

(1)基因                               

(2)A-T

(3)标记基因                           

(4)启动子   X

(5)促性腺   同期发情               

(6)胚胎分割移植

解析

解:(1)蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过对基因的修饰或合成,对现有的蛋白质进行改造,或制造出一种新的蛋白质,以满足人类生产生活的需求.

(2)图2中④表示反转录过程,该过程遵循的碱基互补原则为U-A、A-T、C-G、G-C,而翻译过程中遵循的碱基互补原则为U-A、A-U、C-G、G-C,前者不同于翻译过程的是A-T.

(3)基因表达载体主要由目的基因、标记基因、启动子和终止子.图中3是标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来.

(4)制备乳腺生物反应器过程中,在构建基因表达载体时,需在目的基因前加上乳腺蛋白基因的启动子;因为只有雌性个体能分泌乳汁,所以在图甲中⑨过程之前,要对精子进行筛选、保留含性染色体X的精子.

(5)为获得较多的受精卵进行研究,图甲中⑥过程一般用促性腺激素对供体做超数排卵处理;为提高培育成功率,进行胚胎移植过程之前,要对供、受体动物做同期发情处理.

(6)对早期胚胎进行胚胎分割移植技术,可获得同卵双胎或多胎.

故答案为:

(1)基因                               

(2)A-T

(3)标记基因                           

(4)启动子   X

(5)促性腺   同期发情               

(6)胚胎分割移植

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融合蛋白是通过DNA重组技术将两个或多个基因的编码区首尾连接,由同一调控序列控制合成的蛋白质.人的表皮生长因子受体(EGFR)是影响癌症发生发展的重要因素,它在肺癌、脑肿瘤等实体瘤中均有大量表达.天花粉蛋白(TCS)是重要天花粉的有效成分,具有抗肿瘤作用.下图是通过基因工程方法将人表皮生长因子基因(EGF)和TCS基因连接起来,利用大肠杆菌生成人表皮生长因子-天花粉蛋白融合蛋白的过程示意图.请回答:

(1)为了建立含有EGF的cDNA文库,应从健康人体的______细胞中提取总mRNA,通过______法合成cDNA.从cDNA文库中提取的EGF的长度比从基因组文库中提取的EGF______.利用______技术可以大量扩增EGF,该技术所利用的原理是______

(2)在①过程中,应使用的限制酶是______,在融合蛋白基因的首端还应

插入______,它是______识别和结合的位点.

(3)在②过程中,首先用______处理大肠杆菌,使其转变为______细胞.

(4)应用_______技术可检测大肠杆菌是否表达出融合蛋白.

(5)单纯使用天花粉蛋白治疗癌症疗效甚微,而人表皮生长因子--天花粉蛋白融合蛋白疗效显著,其原因是______

(6)某同学为了筛选插入目的基因的表达载体,将处理过的载体分别置于含有氨苄青霉素和四环素的培养基上培养,观察其增殖和表达情况.此设计方案是否合理,______请说明理由______

正确答案

解:(1)EGF基因只在表皮细胞中表达,即只有表皮细胞中含有相应的mRNA,因此要获得EGF基因,应从健康人体的表皮细胞中提取其mRNA,通过逆转录法合成.通过逆转录法合成的EGF基因不含内含子、启动子等结构,因此其长度比从基因组文库中获取的EGF基因短.利用PCR技术可以大量扩增EGF,该技术所利用的原理是DNA双链复制.

(2)EGF基因两侧的限制酶是BamHI和Sph I,因此在①过程中,应使用的限制酶是BamHI和SphI,而且在融合蛋白基因的首端还应插入启动子.

(3)在②过程中,首先用Ca2+处理大肠杆菌,使其转变为感受态细胞.

(4)应用抗原--抗体杂交_技术可检测大肠杆菌是否表达出融合蛋白.

(5)人表皮生长因子能与肿瘤细胞表面的受体特异性结合,从而使天花粉蛋白定向地作用于肿瘤细胞,因此单纯使用天花粉蛋白治疗癌症疗效甚微,而人表皮生长因子--天花粉蛋白融合蛋白疗效显著.

(6)由于表达载体不能在培养基上增殖和表达,只有导入大肠杆菌,才能增殖和表达,因此不能采用该方案.

故答案为:

(1)表皮    反(逆)转录    短   PCR     DNA双链复制

(2)BamHⅠ和SphⅠ启动子       RNA聚合酶

(3)Ca2+      感受态

(4)抗原--抗体杂交     

(5)人表皮生长因子能与肿瘤细胞表面的受体(EGFR)特异性结合,从而使天花粉蛋白定向的作用于肿瘤细胞

(6)不合理     表达载体不能在培养基上增殖和表达,只有导入大肠杆菌,才能增殖和表达

解析

解:(1)EGF基因只在表皮细胞中表达,即只有表皮细胞中含有相应的mRNA,因此要获得EGF基因,应从健康人体的表皮细胞中提取其mRNA,通过逆转录法合成.通过逆转录法合成的EGF基因不含内含子、启动子等结构,因此其长度比从基因组文库中获取的EGF基因短.利用PCR技术可以大量扩增EGF,该技术所利用的原理是DNA双链复制.

(2)EGF基因两侧的限制酶是BamHI和Sph I,因此在①过程中,应使用的限制酶是BamHI和SphI,而且在融合蛋白基因的首端还应插入启动子.

(3)在②过程中,首先用Ca2+处理大肠杆菌,使其转变为感受态细胞.

(4)应用抗原--抗体杂交_技术可检测大肠杆菌是否表达出融合蛋白.

(5)人表皮生长因子能与肿瘤细胞表面的受体特异性结合,从而使天花粉蛋白定向地作用于肿瘤细胞,因此单纯使用天花粉蛋白治疗癌症疗效甚微,而人表皮生长因子--天花粉蛋白融合蛋白疗效显著.

(6)由于表达载体不能在培养基上增殖和表达,只有导入大肠杆菌,才能增殖和表达,因此不能采用该方案.

故答案为:

(1)表皮    反(逆)转录    短   PCR     DNA双链复制

(2)BamHⅠ和SphⅠ启动子       RNA聚合酶

(3)Ca2+      感受态

(4)抗原--抗体杂交     

(5)人表皮生长因子能与肿瘤细胞表面的受体(EGFR)特异性结合,从而使天花粉蛋白定向的作用于肿瘤细胞

(6)不合理     表达载体不能在培养基上增殖和表达,只有导入大肠杆菌,才能增殖和表达

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简答题

2006年10月2日,瑞典皇家科学院诺贝尔奖委员会宣布将2006年度诺贝尔生理学或医学奖授予两名美国科学家安德鲁•费里和克拉格•米洛,以表彰他们发现了RNA干扰现象.他们发现一些RNA小片段能够使特定的植物基因处于关闭状态,这种现象被称作RNA干扰(RNA Interference简称RNAi).番茄又叫西红柿,双子叶植物纲,茄科,一年生草本植物,其果实营养丰富,是一种人们喜爱的果蔬.普通番茄中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制多聚半乳糖醛酸酶的合成,该酶能够破坏细胞壁,使番茄不易储藏,科学家通过基因工程的方法,将一种抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞,获得了抗软化番茄,保鲜时间长,口味也更好.主要机理是采用了RNAi技术,使相关基因保持沉默.如图所示:

(1)基因工程实施的第一步是获取目的基因,在本例中目的基因是______

(2)第二步,需进行______工作,在这一步工作中,需要用____________工具.

(3)第三步是______.就本题的要求来说,最好采用______法将该目的基因整合到番茄细胞的______DNA上,可使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达.

(4)第四步是______,这也是检查基因工程是否做成功的一步.

正确答案

解:(1)基因工程实施的第一步是获取目的基因,根据题意和图示分析可知:抗软化番茄的目的基因是抗多聚半乳糖醛酸酶基因.

(2)第二步需进行基因表达载体的构建工作,是整个过程的核心.需要用限制性核酸内切酶和DNA连接酶,将目的基因和运载体重组. 一个完整的基因表达载体包括:目的基因、启动子、终止子、标记基因.

(3)第三步是将目的基因导入受体细胞.由于受体细胞是植物番茄细胞,所以最好采用农杆菌转化法将该目的基因导入并整合到番茄细胞的染色体DNA上,从而使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达.

(4)第四步是目的基因的检测与鉴定.转基因生物的DNA是否插入了目的基因可用DNA分子杂交技术;目的基因是否转录出了mRNA可用分子杂交技术.

故答案为:

(1)抗多聚半乳糖醛酸酶基因

(2)基因表达载体的构建  限制性核酸内切酶  DNA连接酶

(3)将目的基因导入受体细胞   农杆菌转化法   染色体  

(4)目的基因的检测与鉴定

解析

解:(1)基因工程实施的第一步是获取目的基因,根据题意和图示分析可知:抗软化番茄的目的基因是抗多聚半乳糖醛酸酶基因.

(2)第二步需进行基因表达载体的构建工作,是整个过程的核心.需要用限制性核酸内切酶和DNA连接酶,将目的基因和运载体重组. 一个完整的基因表达载体包括:目的基因、启动子、终止子、标记基因.

(3)第三步是将目的基因导入受体细胞.由于受体细胞是植物番茄细胞,所以最好采用农杆菌转化法将该目的基因导入并整合到番茄细胞的染色体DNA上,从而使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达.

(4)第四步是目的基因的检测与鉴定.转基因生物的DNA是否插入了目的基因可用DNA分子杂交技术;目的基因是否转录出了mRNA可用分子杂交技术.

故答案为:

(1)抗多聚半乳糖醛酸酶基因

(2)基因表达载体的构建  限制性核酸内切酶  DNA连接酶

(3)将目的基因导入受体细胞   农杆菌转化法   染色体  

(4)目的基因的检测与鉴定

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题型:简答题
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简答题

科学家从某抗旱植物中得到抗旱基因(R),培育出抗旱转基因农作物.回答下列问题:

(1)在基因工程中,抗旱基因(R)被称为______.“分子缝合针”DNA连接酶按来源不同可分为____________两类.

(2)如果用农杆菌转化法将R基因导入农作物细胞的染色体DNA上,应先将R基因插入农杆菌Ti质粒的______上,然后再让该农杆菌去感染农作物细胞.

(3)转基因农作物细胞经植物组织培养可得到转基因农作物植株,该过程的技术关键是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞先后进行______

(4)若得到的抗旱转基因农作物植株的基因类型有甲或乙两种(R基因的整合位点如图,只考虑其中的两对染色体,且R基因都能正常表达),让该植株自花传粉,若子代抗旱植株所占比例为100%,则R基因的整合位点属于图______类型.

正确答案

解:(1)在基因工程中,抗旱基因(R)被称为目的基因.DNA连接酶按来源不同可分为E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类.

(2)如果用农杆菌转化法将R基因导入农作物细胞的染色体DNA上,应先将R基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA上,然后再让该农杆菌去感染农作物细胞.

(3)在利用植物组织培养获得转基因农作物植株,该过程的技术关键是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞先后进行脱分化和再分化.

(4)图甲中,两个R基因分别位于两对同源染色体上,因此相当于双杂合子(R1r1R2r2),该双杂合子自交后代会出现15:1的性状分离;而乙图中,两个R基因位于一对同源染色体上,即相当于纯合子(RR),由于纯合子自交后代不发生性状分离,因此自花传粉获得的子代抗旱植株所占比例为100%.

故答案为:

(1)目的基因    E.coliDNA连接酶    T4DNA连接酶

(2)T-DNA

(3)脱分化和再分化

(4)乙

解析

解:(1)在基因工程中,抗旱基因(R)被称为目的基因.DNA连接酶按来源不同可分为E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类.

(2)如果用农杆菌转化法将R基因导入农作物细胞的染色体DNA上,应先将R基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA上,然后再让该农杆菌去感染农作物细胞.

(3)在利用植物组织培养获得转基因农作物植株,该过程的技术关键是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞先后进行脱分化和再分化.

(4)图甲中,两个R基因分别位于两对同源染色体上,因此相当于双杂合子(R1r1R2r2),该双杂合子自交后代会出现15:1的性状分离;而乙图中,两个R基因位于一对同源染色体上,即相当于纯合子(RR),由于纯合子自交后代不发生性状分离,因此自花传粉获得的子代抗旱植株所占比例为100%.

故答案为:

(1)目的基因    E.coliDNA连接酶    T4DNA连接酶

(2)T-DNA

(3)脱分化和再分化

(4)乙

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