- DNA重组技术的基本工具
- 共1894题
回答有关生物工程的问题.
生物工程具有广阔的运用前景.下图表示药物干扰素的生产过程.
(1)从人的淋巴细胞中提取DNA分子,用______切割分离等方法而获得干扰素基因,此含干扰素基因的DNA分子在基因工程中称为______.
(2)干扰素基因与质粒相结合要依靠______酶.然后将带干扰素基因的质粒导入到酵母菌体内,在此基因工程中酵母菌被称为______.
(3)常用质粒做运载体,因为质粒具有如下特性______.(多选)
A.具有自我复制能力
B.有多个供外源基因接入的位点
C.有便于进行重组DNA 鉴定的标记基因
D.质粒普遍存在于生物体细胞中
(4)上图过程中,若要得到成功表达干扰素基因的酵母菌,还需经过______.利用转基因酵母菌可大量生产干扰素,此种工程技术在生物工程领域中称作______.
正确答案
解:(1)获取目的基因(干扰素基因)时,需要用限制酶切割获得.
(2)构建基因表达载体时,需要用DNA连接酶将目的基因和运载体结合形成重组DNA分子.工程菌是指用基因工程的方法,使外源基因得到高效率表达的菌株类细胞系,所以此基因工程中酵母菌被称为工程菌
(3)作为运载体必须具备的条件:①要具有限制酶的切割位点;②要有标记基因(如抗性基因),以便于重组后重组子的筛选;③能在宿主细胞中稳定存在并复制;④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来.天然的质粒不能直接作为载体,基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的.
(4)需要经过筛选才能得到成功表达干扰素基因的酵母菌.利用转基因酵母菌可大量生产干扰素的工程技术称作基因工程.
故答案:(1)限制酶 目的基因
(2)DNA连接酶 工程菌
(3)ABC
(4)筛选 基因工程
解析
解:(1)获取目的基因(干扰素基因)时,需要用限制酶切割获得.
(2)构建基因表达载体时,需要用DNA连接酶将目的基因和运载体结合形成重组DNA分子.工程菌是指用基因工程的方法,使外源基因得到高效率表达的菌株类细胞系,所以此基因工程中酵母菌被称为工程菌
(3)作为运载体必须具备的条件:①要具有限制酶的切割位点;②要有标记基因(如抗性基因),以便于重组后重组子的筛选;③能在宿主细胞中稳定存在并复制;④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来.天然的质粒不能直接作为载体,基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的.
(4)需要经过筛选才能得到成功表达干扰素基因的酵母菌.利用转基因酵母菌可大量生产干扰素的工程技术称作基因工程.
故答案:(1)限制酶 目的基因
(2)DNA连接酶 工程菌
(3)ABC
(4)筛选 基因工程
回答有关生物工程的问题.
2012年诺贝尔生理学奖的获奖成就是:研究者用逆转录病毒为载体,将四个不同作用的关键基因转入体细胞内,令其与原有基因发生重组,然后让体细胞重新返回到“生命原点”,变成一个多功能的干细胞,该类细胞简称iPS细胞,具有胚胎干细胞的特性.
(1)要将四种不同作用的“关键基因”转入体细胞,首先必须与______整合.
(2)含“关键基因”的逆转录病毒进入体细胞后,首先通过逆转录合成______,进入细胞核后与______基因发生重组.
(3)多细胞个体发育过程中最原始的干细胞是______.根据分裂潜能,这类细胞在个体发育中的分化顺序是______.
A.全能→专能→多能 B.全能→多能→专能 C.多能→全能→专能 D.专能→全能→多能
(4)下列有关说法错误的是______.
A.细胞分化使同一来源的细胞间形成不同的mRNA
B.细胞的分化程度越低,越容易在体外进行细胞培养
C.细胞分化仅发生在胚胎时期
D.未离体的体细胞不会表现出全能性
(5)该项研究运用的生物技术称为______.
(6)从原理上看,让体细胞回到“生命原点”的过程类似于植物组织培养中的______过程.
(7)人体中的神经元很少进行分裂和自我更新,其细胞体一旦受损就不能复生.日常生活中,由于疾病、交通事故等造成的神经系统损伤是相当普遍的,患者很难康复,严重影响了生活质量.假设某人因高空坠落致腰部受损而下肢瘫痪,请利用“iPS细胞具有胚胎干细胞的特性”原理,从理论上提供一个解决方案:______.
正确答案
解:(1)由题意“研究者用逆转录病毒为载体”,可知四种目的基因的载体是逆转录病毒.
(2)逆转录是以RNA为模板合成DNA的过程,进入细胞核后与受体细胞的基因组发生基因重组.
(3)最原始的干细胞是胚胎干细胞,其全能性最高,进而分化为多能干细胞和专能干细胞.
(4)细胞分化的实质是基因的选择性表达,能使同一来源的细胞间形成不同的mRNA;细胞的分化程度越低,其全能性越高,越容易在体外进行细胞培养;细胞分化发生在个体发育的整个时期;细胞只有离体才能表现出全能性,所以未离体的体细胞不会表现出全能性.
(5)该项研究运用的生物技术称为基因工程,或基因拼接技术.
(6)让体细胞回到“生命原点”的过程类似于植物组织培养中的脱分化(或去分化)过程.
(7)利用胚胎干细胞可分化为各种组织细胞,从而修复损伤的器官组织的特点,进行方案的设计.如从患者身上提取一些体细胞将其转变为iPS细胞,然后在一定的条件下进行离体培养,再通过诱导分化形成有关的神经元,最后将这些细胞移植至发病部位,从而修复相关的组织或器官.
故答案:(1)逆转录病毒
(2)DNA 体细胞
(3)胚胎干细胞 B
(4)C
(5)基因工程
(6)脱分化(去分化)
(7)从患者身上提取一些体细胞将其转变为iPS细胞,然后在一定的条件下进行离体培养,再通过诱导分化形成有关的神经元,最后将这些细胞移植至发病部位,从而修复相关的组织或器官
解析
解:(1)由题意“研究者用逆转录病毒为载体”,可知四种目的基因的载体是逆转录病毒.
(2)逆转录是以RNA为模板合成DNA的过程,进入细胞核后与受体细胞的基因组发生基因重组.
(3)最原始的干细胞是胚胎干细胞,其全能性最高,进而分化为多能干细胞和专能干细胞.
(4)细胞分化的实质是基因的选择性表达,能使同一来源的细胞间形成不同的mRNA;细胞的分化程度越低,其全能性越高,越容易在体外进行细胞培养;细胞分化发生在个体发育的整个时期;细胞只有离体才能表现出全能性,所以未离体的体细胞不会表现出全能性.
(5)该项研究运用的生物技术称为基因工程,或基因拼接技术.
(6)让体细胞回到“生命原点”的过程类似于植物组织培养中的脱分化(或去分化)过程.
(7)利用胚胎干细胞可分化为各种组织细胞,从而修复损伤的器官组织的特点,进行方案的设计.如从患者身上提取一些体细胞将其转变为iPS细胞,然后在一定的条件下进行离体培养,再通过诱导分化形成有关的神经元,最后将这些细胞移植至发病部位,从而修复相关的组织或器官.
故答案:(1)逆转录病毒
(2)DNA 体细胞
(3)胚胎干细胞 B
(4)C
(5)基因工程
(6)脱分化(去分化)
(7)从患者身上提取一些体细胞将其转变为iPS细胞,然后在一定的条件下进行离体培养,再通过诱导分化形成有关的神经元,最后将这些细胞移植至发病部位,从而修复相关的组织或器官
转基因抗病香蕉的培育过程如图所示.图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶,质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点.如图表示四种限制酶的识别序列及酶切位点.
(1)若要获得抗病基因,能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割?______,说明理由______.要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒?______.
(2)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长.欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,重组质粒中应含有______基因,作为标记基因.
(3)②、③阶段是否可使用同种培养基?______;理由是______.
(4)④阶段是否可使用不添加植物激素的培养基?______;理由是______.
正确答案
解:(1)因为限制酶SmaⅠ的切割位点位于抗病基因上,对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构,所以要获得抗病基因,不能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割.要获得含抗病基因的重组质粒,也不能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒,因为含有抗病基因的外源DNA分子上没有ApaⅠ限制酶切割位点.
(2)欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,重组质粒中应同时含有抗卡那霉素基因,作为标记基因.
(3)决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例,特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要.②、③阶段培养基中生长素与细胞分裂素的比值不同,因此这两个阶段不能是用同种培养基.
(4)因为植物的芽能产生生长素促进根的生长,所以④阶段是可以使用不添加植物激素的培养基. 故答案:(1)不能 对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构 不能
(2)抗卡那霉素
(3)不能 2个阶段培养基中生长素与细胞分裂素的比值不同
(4)可以 因为芽能产生生长素促进根的生长
解析
解:(1)因为限制酶SmaⅠ的切割位点位于抗病基因上,对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构,所以要获得抗病基因,不能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割.要获得含抗病基因的重组质粒,也不能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒,因为含有抗病基因的外源DNA分子上没有ApaⅠ限制酶切割位点.
(2)欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,重组质粒中应同时含有抗卡那霉素基因,作为标记基因.
(3)决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例,特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要.②、③阶段培养基中生长素与细胞分裂素的比值不同,因此这两个阶段不能是用同种培养基.
(4)因为植物的芽能产生生长素促进根的生长,所以④阶段是可以使用不添加植物激素的培养基. 故答案:(1)不能 对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构 不能
(2)抗卡那霉素
(3)不能 2个阶段培养基中生长素与细胞分裂素的比值不同
(4)可以 因为芽能产生生长素促进根的生长
(三)回答下列有关“遗传信息传递表达和基因工程”的问题.
通过DNA重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物.运用基因工程技术可以使羊奶中含有人体蛋白质.
(1)如图表示了运用基因工程技术使羊奶中含有人体蛋白质的基本过程,在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是一G↓GATCC一,请回答:
从羊染色体中剪下羊蛋白质基因的酶是______.人体蛋白质基因“插入”后连接在羊体细胞染色体中时需要的酶是______.
(2)图为质粒被切割形成两个DNA片段的图例,请补充完善.
(3)人体蛋白质基因之所以能“插入”到羊的染色体内,原因是______.动物基因工程中通常将目的基因导入______细胞中,常用的方法是______法.
(4)II.对上述人体蛋白质的基因分析发现,在编码甘氨酸的位点上发生了三个突变,原因都是由一个碱基替换引起的.突变的来源如图(右为相关氨基酸的密码子):
则甘氨酸最可能的密码子是______.
(5)当某基因片段模板链中转录成GUC的CAG突变为CAA时,这种突变的结果对该生物是否有影响?原因是______.
(6)上述途径获得的转基因动物,其后代是否都含目的基因.为什么?______.
正确答案
解:(1)使用限制性内切酶切割目的基因和质粒;使用DNA连接酶连接目的基因和质粒.
(2)题干中,在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是一G↓GATCC一,因此,
一G↓GATCC一 一G GATCC一
→+
一CCTAG↓G一 一CCTAG G一
(3)不同生物体内遗传物质DNA的共同点是遗传物质DNA组成基本单位相同,都具有相同的双螺旋结构.将目的基因导入动物细胞的方法是使用显微注射法将目的基因导入受精卵细胞中.
(4)在编码甘氨酸的位点上发生了三个突变,原因都是由一个碱基替换引起的.甘氨酸→精氨酸,由一个碱基替换引起的,将甘氨酸与精氨酸密码子对照,发现甘氨酸可能为GGG,精氨酸可能是CGG或AGG,说明是第一个碱基发生改变G→C或A.缬氨酸→甲硫氨酸,由一个碱基替换引起的,将缬氨酸和甲硫氨酸密码子对照,甲硫氨酸肯定为AUG,发现缬氨酸可能为GUG,说明是第一个碱基发生改变G→A.根据以上分析甘氨酸GGG→缬氨酸GUG,确实是由一个碱基替换引起的.因此甘氨酸最可能为GGG.
(5)突变后转录出的密码子GUU和突变前转录的密码子GUC决定的氨基酸都是缬氨酸,不影响肽链中氨基酸序列,性状表现不受影响.因此这种突变的结果对该生物没有影响.
(6)在形成生殖细胞时等位基因会随同源染色体的分开而分离,因此获得的转基因动物,其后代不一定都含目的基因.
故答案为:
(1)限制性核酸内切酶;DNA连接酶
(2)
一G↓GATCC一 一G GATCC一
→+
一CCTAG↓G一 一CCTAG G一
(3)遗传物质DNA组成基本单位相同,都具有相同的双螺旋结构;受精卵;显微注射法
(4)GGG
(5)无,原因是突变后转录出的密码子GUU和突变前转录的密码子GUC决定的氨基酸都是缬氨酸,不影响肽链中氨基酸序列,性状表现不受影响.
(6)否,在形成生殖细胞时等位基因会发生分离
解析
解:(1)使用限制性内切酶切割目的基因和质粒;使用DNA连接酶连接目的基因和质粒.
(2)题干中,在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是一G↓GATCC一,因此,
一G↓GATCC一 一G GATCC一
→+
一CCTAG↓G一 一CCTAG G一
(3)不同生物体内遗传物质DNA的共同点是遗传物质DNA组成基本单位相同,都具有相同的双螺旋结构.将目的基因导入动物细胞的方法是使用显微注射法将目的基因导入受精卵细胞中.
(4)在编码甘氨酸的位点上发生了三个突变,原因都是由一个碱基替换引起的.甘氨酸→精氨酸,由一个碱基替换引起的,将甘氨酸与精氨酸密码子对照,发现甘氨酸可能为GGG,精氨酸可能是CGG或AGG,说明是第一个碱基发生改变G→C或A.缬氨酸→甲硫氨酸,由一个碱基替换引起的,将缬氨酸和甲硫氨酸密码子对照,甲硫氨酸肯定为AUG,发现缬氨酸可能为GUG,说明是第一个碱基发生改变G→A.根据以上分析甘氨酸GGG→缬氨酸GUG,确实是由一个碱基替换引起的.因此甘氨酸最可能为GGG.
(5)突变后转录出的密码子GUU和突变前转录的密码子GUC决定的氨基酸都是缬氨酸,不影响肽链中氨基酸序列,性状表现不受影响.因此这种突变的结果对该生物没有影响.
(6)在形成生殖细胞时等位基因会随同源染色体的分开而分离,因此获得的转基因动物,其后代不一定都含目的基因.
故答案为:
(1)限制性核酸内切酶;DNA连接酶
(2)
一G↓GATCC一 一G GATCC一
→+
一CCTAG↓G一 一CCTAG G一
(3)遗传物质DNA组成基本单位相同,都具有相同的双螺旋结构;受精卵;显微注射法
(4)GGG
(5)无,原因是突变后转录出的密码子GUU和突变前转录的密码子GUC决定的氨基酸都是缬氨酸,不影响肽链中氨基酸序列,性状表现不受影响.
(6)否,在形成生殖细胞时等位基因会发生分离
苎麻俗称“中国草”,大竹县被誉为“中国苎麻之乡”.苎麻纤维所制纺织品具有挺括凉爽、易洗快干、牢固舒适等特点,颇受国内外消费者青睐.
(1)苎麻的葡糖基转移酶基因(GT-like)指导合成β-葡糖基转移酶的过程包括______和______两个基本阶段.β-葡糖基转移酶能催化纤维素合成,该酶能提高反应速率的机理是______.
(2)如图表示在适宜的光照、CO2浓度等条件下,苎麻在不同温度条件下的净光合作用速率和呼吸作用速率曲线.
①光合作用的光反应阶段产生的[H]和ATP用于暗反应中的______过程.光合作用和呼吸作用都受温度的影响,其中与______作用有关的酶的最适温度更高.
②光合速率与呼吸速率相等时对应的温度是______℃.在温度为40℃的条件下,该苎麻叶肉细胞叶绿体利用的CO2来源是______.
③若温度保持在20℃的条件下,长时间每天交替进行12h光照、12h黑暗,该苎麻能否正常生长?______,原因是______.
(3)为解决苎麻纤维颜色单一和提高苎麻品质,市农科所的科研人员利用基因工程对苎麻进行了改良,其基本流程如图.请分析回答下列问题:
①构成质粒的基本组成单位是______.
②构建重组质粒时,需要用到______酶,质粒的③端会和切出的目的基因的______端 (填①或②) 相连接.
③苎麻茎尖细胞通过______(填生物技术名称)获得完整植株的过程,有力地证明了即使高度分化的细胞仍具有______性.
④若把植株A自交,获得的子代中能产生蓝色纤维素的植株所占比例为______.
正确答案
解:(1)β-葡糖基转移酶是蛋白质,基因控制蛋白质合成包括转录和翻译两个基本阶段.酶能降低化学反应所需的活化能,从而提高化学反应速率.
(2)实线代表净光合作用速率曲线,虚线代表呼吸作用速率曲线.
①光合作用光反应阶段产生的[H]和ATP,用于暗反应中三碳化合物的还原的过程.温度通过影响酶的活性来影响光合作用和呼吸作用速率,由图可知:与光作用有关的酶的最适温度约为30℃,而与呼吸作用有关的酶的最适温度约为40℃,可见,与呼吸作用有关的酶的最适温度更高.
②净光合速率=真光合速率-呼吸速率,当光合速率与呼吸速率相等时,净光合速率为零,对应的温度是40℃.在温度为40℃的条件下,苎麻的呼吸速率与光合速率相等,说明苎麻叶肉细胞的呼吸速率小于光合速率,所以该苎麻叶肉细胞叶绿体利用的CO2除来自自身呼吸产生外,还来自外界环境.
③植物一昼夜有机物的积累量大于零时,植物才能生长.温度保持在20℃的条件下,植物白天的净光合速率为2,晚上呼吸速率也为2,则一昼夜有机物的积累量=12×2-12×2=0,所以长时间每天交替进行12h光照、12h黑暗,该苎麻将不能正常生长.
(3)①质粒是双链环状DNA分子,其基本组成单位是脱氧核苷酸.
②构建重组质粒时,先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒,再用DNA连接酶将目的基因和质粒连接形成重组质粒.DNA连接酶能将相同的黏性末端连接起来,所以质粒的③端会和切出的目的基因的②端相连接.
③采用植物组织培养技术能将苎麻茎尖细胞培养成完整植株,这也有力地证明了高度分化的细胞仍具有全能性.
④植株A是导入目的基因的杂合子,根据基因分离定律,其自交后代中能产生蓝色纤维素的植株所占比例为3/4.
故答案:(1)转录 翻译 酶能显著降低有关化学反应的活化能
(2)①C3的还原(或三碳化合物的还原,或CO2的还原) 呼吸
②40 由线粒体移向叶绿体(自身呼吸产生的)和从细胞外(外界环境吸收)吸收的
③不能 该植株24h内净积累的有机物为0
(3)①脱氧核苷酸 ②限制性核酸内切酶(或限制酶)、DNA连接 ②
③植物组织培养 全能 ④3/4
解析
解:(1)β-葡糖基转移酶是蛋白质,基因控制蛋白质合成包括转录和翻译两个基本阶段.酶能降低化学反应所需的活化能,从而提高化学反应速率.
(2)实线代表净光合作用速率曲线,虚线代表呼吸作用速率曲线.
①光合作用光反应阶段产生的[H]和ATP,用于暗反应中三碳化合物的还原的过程.温度通过影响酶的活性来影响光合作用和呼吸作用速率,由图可知:与光作用有关的酶的最适温度约为30℃,而与呼吸作用有关的酶的最适温度约为40℃,可见,与呼吸作用有关的酶的最适温度更高.
②净光合速率=真光合速率-呼吸速率,当光合速率与呼吸速率相等时,净光合速率为零,对应的温度是40℃.在温度为40℃的条件下,苎麻的呼吸速率与光合速率相等,说明苎麻叶肉细胞的呼吸速率小于光合速率,所以该苎麻叶肉细胞叶绿体利用的CO2除来自自身呼吸产生外,还来自外界环境.
③植物一昼夜有机物的积累量大于零时,植物才能生长.温度保持在20℃的条件下,植物白天的净光合速率为2,晚上呼吸速率也为2,则一昼夜有机物的积累量=12×2-12×2=0,所以长时间每天交替进行12h光照、12h黑暗,该苎麻将不能正常生长.
(3)①质粒是双链环状DNA分子,其基本组成单位是脱氧核苷酸.
②构建重组质粒时,先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒,再用DNA连接酶将目的基因和质粒连接形成重组质粒.DNA连接酶能将相同的黏性末端连接起来,所以质粒的③端会和切出的目的基因的②端相连接.
③采用植物组织培养技术能将苎麻茎尖细胞培养成完整植株,这也有力地证明了高度分化的细胞仍具有全能性.
④植株A是导入目的基因的杂合子,根据基因分离定律,其自交后代中能产生蓝色纤维素的植株所占比例为3/4.
故答案:(1)转录 翻译 酶能显著降低有关化学反应的活化能
(2)①C3的还原(或三碳化合物的还原,或CO2的还原) 呼吸
②40 由线粒体移向叶绿体(自身呼吸产生的)和从细胞外(外界环境吸收)吸收的
③不能 该植株24h内净积累的有机物为0
(3)①脱氧核苷酸 ②限制性核酸内切酶(或限制酶)、DNA连接 ②
③植物组织培养 全能 ④3/4
【生物-现代生物科技专题】
我省有大量的盐碱地,科学家利用耐盐碱植物中的耐盐基因,培育出了耐盐水稻新品系.下图是培育过程简图,请回答:
(1)目的基因的获取需要______,阶段Ⅰ的核心是______.
(2)为保证耐盐基因的正常转录,b上耐盐基因的两端应含有______,将b导入c常用______法.
(3)对耐盐基因转录和表达产物的检测分别采用______、______技术.
(4)阶段Ⅱ的核心过程是______,由耐盐水稻细胞培育成了耐盐水稻植株,说明植物细胞具有______.
正确答案
解:(1)基因工程中,目的基因的获取需要用限制性核酸内切酶.基因工程的核心内容是基因表达载体的构建.
(2)重组质粒应包括:目的基因、启动子、终止子、标记基因.启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列,是基因的一个组成部分,控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度.终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列.目的基因导入植物细胞的方法一般选择农杆菌转化法.
(3)基因转录的产物为mRNA,检测mRNA一般用DNA探针进行分子杂交;基因表达产物是蛋白质,蛋白质的检测一般用抗原-抗体杂交技术.
(4)植物组织培养技术中,首先将离体的组织细胞进行脱分化形成愈伤组织,然后再进行再分化形成新个体.该过程体现了植物细胞的全能性.
故答案为:
(1)限制性核酸内切(限制)酶 构建耐盐基因(目的基因)表达载体
(2)启动子、终止子(答不全不得分) 基因枪(农杆菌转化)
(3)分子杂交 抗原-抗体杂交
(4)脱分化和再分化 全能性
解析
解:(1)基因工程中,目的基因的获取需要用限制性核酸内切酶.基因工程的核心内容是基因表达载体的构建.
(2)重组质粒应包括:目的基因、启动子、终止子、标记基因.启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列,是基因的一个组成部分,控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度.终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列.目的基因导入植物细胞的方法一般选择农杆菌转化法.
(3)基因转录的产物为mRNA,检测mRNA一般用DNA探针进行分子杂交;基因表达产物是蛋白质,蛋白质的检测一般用抗原-抗体杂交技术.
(4)植物组织培养技术中,首先将离体的组织细胞进行脱分化形成愈伤组织,然后再进行再分化形成新个体.该过程体现了植物细胞的全能性.
故答案为:
(1)限制性核酸内切(限制)酶 构建耐盐基因(目的基因)表达载体
(2)启动子、终止子(答不全不得分) 基因枪(农杆菌转化)
(3)分子杂交 抗原-抗体杂交
(4)脱分化和再分化 全能性
1997年,科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组,并且在大肠杆菌中表达成功.请据图回答:
(1)首先根据胰岛素的氨基酸序列,推测出原胰岛素mRNA上的碱基序列,再根据______原则,用人工方法合成⑧DNA,通过这一过程获得了______基因.
(2)图中①从大肠杆菌的细胞中提取______,过程②须用______酶切割.
(3)图中⑤表示的是______的过程,图中③表示的是______分子.
(4)④过程表示将______分子导入______细胞.
(5)若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因,并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb,1kb=1000对碱基)上相应的E-F区域(0.2kb),操作过程见图2,那么所形成的重组质粒pZHZ2______.
A.既能被E也能被F切开 B.能被E但不能被F切开
C.既不能被E也不能被F切开 D.能被F但不能被E切开.
正确答案
解:(1)首先根据胰岛素的氨基酸序列,推测出原胰岛素mRNA上的碱基序列,再以mRNA为模板,根据碱基互补配对原则,逆转录法合成⑧DNA,进而获得目的基因.
(2)图中①从大肠杆菌的细胞中提取质粒,②过程须用限制酶切割质粒,以形成黏性末端,便于构建基因表达载体.
(3)图中⑤表示目的基因与运载体重组形成重组质粒的过程,所以③是重组DNA分子.
(4)④过程表示将重组DNA分子导入受体细胞.
(5)用限制酶从基因组DNA上切下目的基因,并取代质粒pZHZ1(3.7kb,1kb=1000对碱基)上相应的E-F区域(0.2kb),用DNA连接酶连接后形成重组质粒,则在重组质粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位点,形成的重组质粒pZHZ2既能被E也能被F切开.故选:A.
故答案:(1)碱基互补配对 目的
(2)质粒 限制
(3)目的基因与运载体重组 重组DNA
(4)重组DNA 受体
(5)A
解析
解:(1)首先根据胰岛素的氨基酸序列,推测出原胰岛素mRNA上的碱基序列,再以mRNA为模板,根据碱基互补配对原则,逆转录法合成⑧DNA,进而获得目的基因.
(2)图中①从大肠杆菌的细胞中提取质粒,②过程须用限制酶切割质粒,以形成黏性末端,便于构建基因表达载体.
(3)图中⑤表示目的基因与运载体重组形成重组质粒的过程,所以③是重组DNA分子.
(4)④过程表示将重组DNA分子导入受体细胞.
(5)用限制酶从基因组DNA上切下目的基因,并取代质粒pZHZ1(3.7kb,1kb=1000对碱基)上相应的E-F区域(0.2kb),用DNA连接酶连接后形成重组质粒,则在重组质粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位点,形成的重组质粒pZHZ2既能被E也能被F切开.故选:A.
故答案:(1)碱基互补配对 目的
(2)质粒 限制
(3)目的基因与运载体重组 重组DNA
(4)重组DNA 受体
(5)A
野生稻中存在抗白叶枯病的基因.利用基因克隆技术从野生稻中克隆得到对白叶枯病的抗性基因,并转入水稻细胞,获得转基因水稻植株.转基因水稻植株自交得到的后代中,抗白叶枯病植株:不抗白枯叶病植株=15:1.回答下列问题:
(1)转基因水稻的培育遵循的原理是______,转基因水稻与普通水稻是否存在生殖隔离______(是/不是)
(2)转基因水稻中抗白叶枯病基因遗传______(遵循/不遵循)孟德尔的基因自由组合定律?理由是______
(3)如果抗性基因用R表示,转基因水稻能产生______种配子,比例是______请图示转基因水稻的体细胞中R在染色体上的位置(表示染色体)
(4)如果抗性基因用R+ 表示,无抗性基因用R-表示,请用遗传图解写出转基因水稻自交获得后代的过程(配子不作要求).
______.
正确答案
解:(1)基因工程利用的原理为基因重组.转基因水稻只是多了一个基因,它仍然能与普通水稻进行杂交产生可育后代,因此它们之间不存在生殖隔离.
(2)基因的自由组合定律适用于两对位于非同源染色体上的基因,转基因水稻中抗白叶枯病基因没有等位基因,并且其非同源染色体上没有相应的非等位基因,因此转基因水稻中抗白叶枯病基因遗传不遵循孟德尔的基因自由组合定律.
(3)根据题意可知,转基因水稻植株自交得到的后代中,抗白叶枯病植株:不抗白枯叶病植株=15:1,该比例为9:3:3:1的变式,因此该转基因水稻的基因型可以用R+R+R-R-.因此该转基因水稻能产生R+R+、R+R-、R-R-3种配子,比例是1:2:1. 由于该性状的遗传遵循基因的自由组合定律,因此两个R基因应位于两条非同源染色体上.即画图时画两对同源染色体,而两个R基因在非同源染色体上即可.
(5)由于该转基因水稻的基因型可以用R+R+R-R-,因此该转基因水稻能产生R+R+、R+R-、R-R-3种配子,因此写出相应的遗传图解.
故答案为:
(1)基因重组 不是
(2)不遵循 转基因水稻中抗白叶枯病基因没有等位基因(或者非同源染色体上没有相应的非等位基因)
(3)3 1:1:2
(基因位置,染色体数目、大小)
(符号、基因型、表现型、比例)
解析
解:(1)基因工程利用的原理为基因重组.转基因水稻只是多了一个基因,它仍然能与普通水稻进行杂交产生可育后代,因此它们之间不存在生殖隔离.
(2)基因的自由组合定律适用于两对位于非同源染色体上的基因,转基因水稻中抗白叶枯病基因没有等位基因,并且其非同源染色体上没有相应的非等位基因,因此转基因水稻中抗白叶枯病基因遗传不遵循孟德尔的基因自由组合定律.
(3)根据题意可知,转基因水稻植株自交得到的后代中,抗白叶枯病植株:不抗白枯叶病植株=15:1,该比例为9:3:3:1的变式,因此该转基因水稻的基因型可以用R+R+R-R-.因此该转基因水稻能产生R+R+、R+R-、R-R-3种配子,比例是1:2:1. 由于该性状的遗传遵循基因的自由组合定律,因此两个R基因应位于两条非同源染色体上.即画图时画两对同源染色体,而两个R基因在非同源染色体上即可.
(5)由于该转基因水稻的基因型可以用R+R+R-R-,因此该转基因水稻能产生R+R+、R+R-、R-R-3种配子,因此写出相应的遗传图解.
故答案为:
(1)基因重组 不是
(2)不遵循 转基因水稻中抗白叶枯病基因没有等位基因(或者非同源染色体上没有相应的非等位基因)
(3)3 1:1:2
(基因位置,染色体数目、大小)
(符号、基因型、表现型、比例)
如图表示培育转荧光蛋白基因克隆猪的流程,请回答有关问题:
(1)过程①表示______,其中用到的工具酶有______和限制酶.
(2)过程②最常用的方法是______.
(3)该培育流程中涉及的细胞工程技术有______、______.
(4)若要同时获得多头转荧光蛋白基因克隆猪,可在______期进行胚胎分割然后移植,进行该过程时应注意将______均等分割.
(5)第一代转荧光蛋白基因克隆猪体细胞中只含一个荧光蛋白基因.理论上它们的后代中,能发出荧光的个体占总数的______.
正确答案
解:(1)过程①表示表示基因工程的核心内容:基因表达载体的构建.该过程中需要用限制性核酸内切酶和DNA连接酶.
(2)目的基因导入动物细胞的方法一般为显微注射法.
(3)上述过程中,导入目的基因的猪胎儿成纤维细胞要经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞,然后该细胞的细胞核与去核卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞,重组细胞经过早期胚胎培养到桑葚胚或囊胚期,最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母猪子宫内,最后生成荧光克隆猪.其中涉及到的细胞水平现代生物技术主要有动物细胞培养、细胞核移植.
(4)进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚.如果对囊胚进行分割时,应对内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育.
(5)第一代转荧光蛋白基因克隆猪体细胞中只含一个荧光蛋白基因,可以把该猪看成是Aa杂合子,该杂合子自交时,AA+Aa基因型的个体占全部后代的3/4.
故答案为:
(1)基因表达载体的构建 DNA连接酶
(2)显微注射法
(3)动物细胞培养 细胞核移植
(4)桑椹胚或囊胚 内细胞团
(5)3/4
解析
解:(1)过程①表示表示基因工程的核心内容:基因表达载体的构建.该过程中需要用限制性核酸内切酶和DNA连接酶.
(2)目的基因导入动物细胞的方法一般为显微注射法.
(3)上述过程中,导入目的基因的猪胎儿成纤维细胞要经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞,然后该细胞的细胞核与去核卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞,重组细胞经过早期胚胎培养到桑葚胚或囊胚期,最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母猪子宫内,最后生成荧光克隆猪.其中涉及到的细胞水平现代生物技术主要有动物细胞培养、细胞核移植.
(4)进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚.如果对囊胚进行分割时,应对内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育.
(5)第一代转荧光蛋白基因克隆猪体细胞中只含一个荧光蛋白基因,可以把该猪看成是Aa杂合子,该杂合子自交时,AA+Aa基因型的个体占全部后代的3/4.
故答案为:
(1)基因表达载体的构建 DNA连接酶
(2)显微注射法
(3)动物细胞培养 细胞核移植
(4)桑椹胚或囊胚 内细胞团
(5)3/4
[生物--选修模块3:现代生物科技技术]
如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线.图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点.
据图回答:
(1)获得人乳铁蛋白基因的方法有______、______和根据已知蛋白质中的氨基酸序列推知基因的脱氧核苷酸序列再进行化学合成.
(2)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用______限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因.筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含______的培养基上进行.
(3)人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达时RNA聚合酶识别和结合的位点是______(填字母代号),其合成的产物是______(添具体内容).
A.启动子 B.tetR C.复制原点 D.ampR
(4)过程①可采用的操作方法是______(填字母代号)
A.农杆菌转化 B.大肠杆菌转化 C.显微注射 D.细胞融合
(5)在体外培养受精卵时,除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外,还需要提供______气体以维持______.
(6)若对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体,这利用了细胞的______性.
(7)为检测牛基因组中是否含有人乳铁蛋白基因可采用______(填字母代号)技术
A.DNA分子杂交 B.基因序列分析 C.抗原-抗体杂交 D.PCR
(8)上述操作过程中采用的生物技术有______.
正确答案
解:(1)基因工程中获取目的基因的方法有三种:从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因、人工合成法:包括反转录法和化学合成法.
(2)据图,仅将人乳铁蛋白基因切割下来,需要在人乳铁蛋白基因的左侧用BamHⅠ切割,右侧用HindⅢ切割.当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后,tetR基因被人乳铁蛋白基因隔开,不是完整的,而ampR基因是完整的,所以筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要含氨苄青霉素的培养基上进行.
(3)启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列,是基因的一个组成部分,控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度.RNA聚合酶作用于转录阶段,转录的产物为mRNA.
(4)目的基因导入动物细胞的方法一般为显微注射法.
(5)在动物细胞培养中需要一定的培养条件:无菌、无毒的环境;营养物质;适宜的温度和PH;气体环境:95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2,CO2用于维持培养液的PH.
(6)若对早期胚胎进行切割,经胚胎移植可获得多个新个体,这利用了细胞的全能性.
(7)检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因利用DNA分子杂交技术.
(8)上述操作过程中,首先利用基因工程技术将目的基因导入受精卵中,然后利用动物细胞培养技术将受精卵培养至桑葚胚或囊胚,再经胚胎移植技术将早期胚胎移植入代孕母牛子宫内.
故答案为:
(1)从基因文库中获取目的基因 利用PCR技术扩增目的基因
(2)HindⅢ和BamHⅠ氨苄青霉素
(3)A 人乳铁蛋白基因转录产生的mRNA
(4)C
(5)CO2; 培养液(基)的pH
(6)全能
(7)A
(8)转基因技术 动物细胞培养 胚胎移植
解析
解:(1)基因工程中获取目的基因的方法有三种:从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因、人工合成法:包括反转录法和化学合成法.
(2)据图,仅将人乳铁蛋白基因切割下来,需要在人乳铁蛋白基因的左侧用BamHⅠ切割,右侧用HindⅢ切割.当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后,tetR基因被人乳铁蛋白基因隔开,不是完整的,而ampR基因是完整的,所以筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要含氨苄青霉素的培养基上进行.
(3)启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列,是基因的一个组成部分,控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度.RNA聚合酶作用于转录阶段,转录的产物为mRNA.
(4)目的基因导入动物细胞的方法一般为显微注射法.
(5)在动物细胞培养中需要一定的培养条件:无菌、无毒的环境;营养物质;适宜的温度和PH;气体环境:95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2,CO2用于维持培养液的PH.
(6)若对早期胚胎进行切割,经胚胎移植可获得多个新个体,这利用了细胞的全能性.
(7)检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因利用DNA分子杂交技术.
(8)上述操作过程中,首先利用基因工程技术将目的基因导入受精卵中,然后利用动物细胞培养技术将受精卵培养至桑葚胚或囊胚,再经胚胎移植技术将早期胚胎移植入代孕母牛子宫内.
故答案为:
(1)从基因文库中获取目的基因 利用PCR技术扩增目的基因
(2)HindⅢ和BamHⅠ氨苄青霉素
(3)A 人乳铁蛋白基因转录产生的mRNA
(4)C
(5)CO2; 培养液(基)的pH
(6)全能
(7)A
(8)转基因技术 动物细胞培养 胚胎移植
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