热门试卷

解：（1）“肺炎双球菌”转化实验证明DNA是遗传物质．基因工程中“转化”是指目的基因进入受体细胞并在受体细胞中维持稳定和表达的过程．

（2）器官移植可能会发生免疫排斥，因此在人体器官移植时，临床通过使用免疫抑制剂抑制T细胞的增殖来提高器官移植的成活率．目的基因主要指编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子．因此，利用基因工程方法对猪器官进行改造时，在改造中导入的小型猪基因组中的一些调节因子属于基因工程中的目的基因，作用是抑制抗原蛋白基因的表达．

（3）在培育转基因克隆猪时，通常以受精卵作为受体细胞．然后在恒温二氧化碳培养箱中培养至桑葚胚期或囊胚期，最后导入经同期发情处理的受体母牛子宫中．

（4）受精卵可以通过体外受精获得，首先将收集的精子放在人工配制的获能液中处理，同时将收集的卵原细胞培养到MⅡ中期，最后完成体外受精．受精时防止多精入卵的两道屏障是：透明带反应（第一道屏障）和卵黄膜封闭作用（第二道屏障）．

故答案为：

（1）DNA是遗传物质   目的基因进入受体细胞并在受体细胞中维持稳定和表达的过程

（2）免疫抑制剂   T细胞　　　　目的基因      抑制抗原蛋白基因的表达

（3）受精卵   桑葚胚期或囊胚期    同期发情

（4）获能液  　MⅡ中期  　　　　　卵黄膜封闭作用

解：（1）抗病基因属于目的基因，获取目的基因的方法：从细胞中直接分离获得、化学方法人工合成等．将目的基因导入植物细胞常采用农杆菌转化法，即借助农杆菌中的Ti质粒．

（2）构建基因表达载体时，需先用限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子．含有相同黏性末端的DNA分子片段才能在DNA连接酶的作用下连接起来，若载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该载体连接的抗病基因分子末端是．

（3）切割完成后，需采用DNA连接酶将载体与该抗病基因连接形成重组DNA分子．

（4）根据植物细胞全能性原理，采用植物组织培养技术将受体细胞培养成转基因植株，最后筛选出抗病的棉花．

（5）基因表达是指转录、翻译形成蛋白质，因此该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是蛋白质．

（6）转基因棉花获得的抗病性状是由该表达产物来体现的．

故答案为：

（1）从细胞中分离　　（Ti）质粒

（2）限制性内切酶（限制酶）　A

（3）DNA连接酶　　

（4）全能

（5）C　

（6）抗病性状

解：转B基因抗虫棉对棉虫有选择作用，能杀死抗毒素蛋白B弱的个体，而抗毒素蛋白B强的个体容易活下来，从而使棉虫种群中抗B基因的基因频率升高．通过在抗虫棉田区间隔种植非转基因棉，可减缓棉虫种群对毒素蛋白B抗性增强的速度．

故答案为：

基因频率升高     非转基因棉（普通棉）

解：（1）过程①表示基因表达载体的构建，在该过程中需要用限制性核酸内切酶对载体进行切割，以便于目的基因的插入；启动子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶识别和结合的位点，RNA聚合酶结合到该位点，可驱动转录过程．

（2）过程②表示动物细胞培养，培养过程中出现接触抑制后可以用胰蛋白酶处理，使之分散成单个的细胞，之后分装到其他培养瓶里面进行传代培养．

（3）判断目的基因是否在受体细胞中转录，可用分子杂交技术来检测，从细胞中提取mRNA和用放射性同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交．根据题中信息“肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌”知，导入let-7基因后，肺癌细胞的增殖受到抑制；据图2可知，let-7基因影响RAS基因表达的机理是：let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合，使RAS基因翻译受到抑制，引起细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞增殖受到抑制．

故答案为：

（1）限制性核酸内切酶（或限制）启动子

（2）胰蛋白

（3）RNA   RAS蛋白

解：（1）过程②由mRNA形成DNA，称为逆转录，需要的酶是逆转录酶．

（2）基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取（从基因文库中获取、利用PCR技术体外扩增、化学合成法）；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．

（3）上述人类胰岛素的合成是在大肠杆菌核糖体上进行的．由于生物共用一套遗传密码，因此大肠杆菌可以合成的人类胰岛素．

故答案为：

（1）逆转录 逆转录酶

（2）目的基因 目的基因 运载体 重组DNA（目的基因） 受体细胞（大肠杆菌细胞）

（3）核糖体 所有生物共用一套遗传密码

解：（1）E属于基因工程育种，基因工程所需要的两种重要的工具酶是限制酶和DNA连接酶．

（2）B常用的方法是花药离体培养；F属于多倍体育种，其原理是染色体变异．

（3）秋水仙素的作用是抑制纺锤体的形成，导致染色体数目加倍，在单倍体育种和多倍体育种常用到该化学试剂，因此图中需要秋水仙素的过程有C、F．

（4）假设你想培育一个稳定遗传的水稻品种，它的性状都是由隐性基因控制的，最简单的育种方法是杂交育种，即图中过程AD；如果都是由显性基因控制的，为缩短育种年限，常采用单倍体育种，即图中过程ABC．

（5）A杂交、B花药离体培养（涉及减数分裂形成配子）、D自交、E基因工程过程中都涉及基因重组．

故答案为：

（1）限制酶和DNA连接酶  

（2）花药离体培养　 染色体数目变异

（3）CF  

（4）AD　   ABC   

（5）ABDE

解：（1）质粒为小型环状的DNA分子，环状DNA分子中没有游离的磷酸基团；外源DNA分子的每一条链都含有一个游离的磷酸基团，因此共含有2个游离的磷酸基团．经Sma切割后在切口处每端各含1个游离的磷酸基团．

（2）DNA分子中，C与G之间有三个氢键，A与T之间有两个氢键，所以C与G含量越多，DNA分子的热稳定性越高．由表中信息可知，SmaⅠ的识别序列为CCCGGG，酶切位点在C与G之间，因此插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性将越高．

（3）含目的基因的片段与质粒连接形成重组质粒，需DNA连接酶将两个DNA片段的末端“缝隙”连接起来．

（4）重组质粒中的抗性基因是作为标记基因，便于鉴别和筛选含有目的基因的细胞．         

故答案为：

（1）2

（2）高

（3）DNA连接

（4）筛选含有目的基因的细胞

解：（1）通常情况下，获得的目的基因需要进行扩增，最简便的方法是PCR扩增技术．

（2）根据启动子和终止子的生理作用可知，目的基因应导入启动子和终止子之间．图中看出，两者之间存在于三种限制酶切点，但是由于Xbal在质粒不止一个酶切位点，因此本实验中没有选择XbaI酶切割质粒．

（3）分析如图，以防止质粒自身环化，扩增的bglB基因两端需分别引入NdeⅠ和BamHⅠ不同限制酶的识别序列，在用DNA连接酶将其与目的基因和质粒连接成重组质粒．如果受体细胞是动物细胞，常用显微注射技术将目的基因导入受体细胞．

（4）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶．

故答案为：

（1）PCR扩增

（2）由于Xbal在质粒不止一个酶切位点

（3）NdeⅠBamHⅠDNA连接酶   

（4）转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶

解：（1）①表示获取目的基因的过程，该过程中限制酶能够识别双链DNA分子 的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，获得目的基因A．也可采用PCR（多聚酶链式反应）从苏云金芽孢杆菌中对已知序列的A进行分离并扩增．

（2）B表示重组质粒，其结构至少包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因，在构建重组质粒时需要用到运载体．

（3）⑤过程指的是转基因抗虫棉形成时用到植物组织培养技术，但若在③过程中采用花粉管通道法则不需要植物组织培养技术．B→C为转基因绵羊的培育过程，其中②过程常用的方法是显微注射技术，使用的绵羊受体细胞为受精卵，④用到的生物技术主要有动物细胞培养和胚胎移植．

（4）检验目的基因是否表达可以用抗原抗体杂交法，若有杂交带出现，说明基因已形成蛋白质产品．

故答案为：

（1）双链DNA分子        PCR、多聚酶链式反应

（2）目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因            载体

（3）花粉管通道     显微注射      受精卵      胚胎移植

（4）相应的抗体进行抗原-抗体杂交，若有杂交带出现