热门试卷

解：（1）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．

（2）Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现了表达的过程，在基因工程中称为转化．

（3）由图可知，题中将目的基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法．

（4）目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA上是目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键．

故答案为：

（1）可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体DNA上

（2）转化

（3）农杆菌转化法

（4）目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA上

解：（1）目的基因的获取途径有：从基因文库中获取；利用PCR技术扩增；人工合成（反转录法和化学合成法）．从图中可以明显地看出，过程①是通过反转录法获取目的基因的，其过程可表示为目的基因mRNA单链DNA双链DNA．

（2）过程③表示借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径将目的基因导入受体细胞．受体细胞是微生物时，一般用Cacl2（Ca2+）处理，以增大细胞壁的通透性，使细胞成为感受态细胞，易于含有目的基因的重组质粒进入受体细胞．

（4）由图可知，质粒上含有四环素抗性基因和氨苄青霉素的抗性基因．构建基因表达载体时，破环了质粒上的四环素抗性基因，但没有破环氨苄青霉素的抗性基因，所以导入普通质粒或重组质粒的大肠杆菌都能抗氨苄青霉素，都能在含有氨苄青霉素的培养基上生长．

（5）由第四小题分析可知，把已经导入了普通质粒或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，导入普通质粒的大肠杆菌能生长，导入重组质粒的大肠杆菌不能生长，因为目的基因正插在四环素抗性基因中，破坏了其结构和功能．

故答案为：

（1）逆转录（逆转录法或从cDNA文库中获取）      目的基因mRNA单链DNA双链DNA

（2）侵染  Ca2+      吸收周围环境中的DNA分子     感受态    感受态细胞

（3）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入了质粒A或重组质粒，反之则没有导入．   因为普通质粒A和重组质粒上都有抗氨苄青霉素基因

（4）有的能生长，有的不能生长   导入普通质粒A的细菌能生长，因为普通质粒A上有四环素抗性基因；导入重组质粒的细菌不能生长，因为目的基因正插在四环素抗性基因中，破坏了其结构和功能．

解：（1）人的单倍体基因组是指22条常染色体和X、Y性染色体上的基因．如果基因中一对脱氧核苷酸发生改变，由于翻译时遗传密码的简并性，所以遗传性状不一定改变．

（2）由于受精卵中的线粒体来自卵细胞，所以线粒体基因控制的性状在遗传上的主要特点是母系遗传．

（3）人的一对常染色体上存在着编码生长激素的基因，该基因的结构特点是编码区是间隔的、不连续的．由于细胞分化的实质是基因选择性表达，所以生长激素的基因只在人体的垂体能够表达，合成生长激素，促进幼体生长，因此其产物常用以治疗侏儒症．

（4）直接从生物的组织细胞或血液中获取生长激素用作药物，价格十分昂贵，现要通过改造大肠杆菌来生产药物，获取目的基因的途径是反转录法，用这种方法获得的目的基因与生物体组织细胞内的生长激素基因相比，主要差异在于不存在非编码序列．基因工程操作成功的标志是大肠杆菌产生人的生长激素．

故答案为：

（1）22条常染色体和X、Y性染色体       遗传性状改变或不变

（2）母系遗传

（3）编码区是间隔的、不连续的     垂体     侏儒症

（4）反转录法      不存在非编码序列     大肠杆菌产生人的生长激素

解：（1）在目的基因导入受体细胞的过程中，一般采用显微注射法将目的基因导入动物的受体细胞中（受精卵）．

（2）分析图解可知，图中的A过程表示将重组细胞培养成成体羊，该过程中首先要利用早期胚胎培养技术将受精卵培养为早期胚胎．然后再利用胚胎移植技术将早期胚胎移植到受体母羊的子宫中．由于只有雌性个体能够产生乳汁，因此进行A之前必须对胚胎进行DNA分析性别鉴定，以获得能够符合生产要求的个体．

（3）为了鉴定目的基因是否成功表达，必须进行抗原-抗体杂交，目的蛋白相当于抗原．

故答案为：

（1）显微注射技术

（2）早期胚胎培养    胚胎移植   　性别

（3）抗原

解：（1）基因工程中，运载工具包括质粒、噬菌体及动植物病毒等，其中质粒是主要运载工具；①表示基因表达载体的构建过程，首先需要限制酶切割含有目的基因的DNA和运载体DNA，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组质粒．

（2）胰蛋白酶可将组织块分散成单个细胞；动物细胞培养过程中需要一定的气体环境（95%氧气和5%二氧化碳），其中5%CO2的作用是维持培养基（液）的pH．

（3）要得到更多的卵（母）细胞需用促性腺激素对动物进行超数排卵处理；成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，以保证克隆后代的遗传性状主要来自于供体核．

（4）从重组细胞到早期胚胎需要才用早期胚胎培养技术；在胚胎移植时，可通过胚胎分割技术获得更多的胚胎．

故答案为：

（1）质粒      DNA 连接酶

（2）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶 ）     维持培养基（液）的pH

（3）促性腺激素（或促滤泡素，孕马血清）       去核

（4）（早期）胚胎培养       胚胎分割

解：（1）根据题干信息“所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱的密码子来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成”可知，上述基因工程操作是采用人工合成方法获得目的基因的．由于密码子具有简并性，因此获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因中编码氨基酸的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同．PCR技术可在体外大量扩增目的基因；由于PCR技术在较高的温度下进行，因此该技术中使用的关键酶是热稳定性DNA聚合酶（或Taq酶）．

（2）根据题干信息可知，该过程中采用了农杆菌转化法，其原理是农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．基因表达载体包括启动子、目的基因、标记基因和终止子．

（3）检测受体细胞中是否存在目的基因可采用DNA分子杂交技术．该技术中使用的基因探针也可以用来检测目的基因是否转录出mRNA．

故答案为：

（1）人工合成   密码子具有简并性，基因序列不同，蛋白质可以相同   PCR  热稳定性DNA聚合酶（或Taq酶）

（2）农杆菌的Ti质粒    T-DNA    ①③⑤⑥

（3）DNA分子杂交   目的基因是否转录出mRNA

解：（1）根据碱基互补配对原则，图2中N元素标记的DNA在变性后的退火过程中只能形成1种DNA．

（2）碱基之间的配对遵循碱基互补配对原则，即C-G，A-T，且C和G之间有3个氢键，A和T之间有2个氢键，因此C和G的含量越高，DNA分子热稳定性也越高．Not I酶切位点中均为C-G碱基对，因此插入的Not I酶切位点越多，质粒中的C和G的含量就越高，其热稳定性也越高．

（3）根据表中五种酶的识别序列及切割位点可知，限制酶Bau3AI还可以切割限制酶BstⅠ和限制酶BamHⅠ的识别序列，因此要将人乳蛋白基因插入载体，在只允许用一种限制酶酶切载体和人乳铁蛋白基因的情况下，应选择限制酶Bau3AI．

（4）用限制酶Bau3AI切割后会破坏四环素抗性基因，但不会破坏氨苄青霉素抗性基因，因此倒入重组质粒的受体细胞可能在含有氨苄青霉素的培养基上生存下来．

（5）转入DNA不仅能合成相应的蛋白质，而且能够复制并传给下一代，因此转移到另一种细胞时，转入DNA比转入RNA要有优势．

（6）在胚胎移植过程中，要用促性腺激素对供受体进行同期发情处理，是供体和受体有相同的生理环境，以保证移植的胚胎能够继续正常发育．

（7）为检测牛基因组中是否含有人乳铁蛋白基因可采用DNA分子杂交技术，而检测目的基因是否表达可采用抗原-抗体杂交的方法．

故答案为：

（1）1   

（2）高

（3）Bau3A I    

（4）氨苄青霉素

（5）转入DNA不仅能合成相应的蛋白质，而且能够复制并传给下一代

（6）使供体和受体有相同的生理环境

（7）抗原-抗体杂交

解：（3）通过1→4得到4，4是目的基因，它是从鼠体直接获得的，该法属于直接从供体细胞的DNA分离基因．基因工程步骤还有因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞，和目的基因的检测与鉴定．

（4）图中3代表限制性内切酶，它将质粒和目的基因切成可互补配对的黏性末端．

故答案为：

（3）从供体细胞的DNA中直接分离基因   因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞

（4）限制性内切酶   质粒   目的基因   互补配对

解：（1）构建基因表达载体时，需先用限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子．含有相同黏性末端的DNA分子片段才能在DNA连接酶的作用下连接起来，若载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该载体连接的抗病基因分子末端是．

（2）连接DNA分子所使用的酶是DNA连接酶，切割完成并连接后得到的DNA分子称为重组DNA．

（3）由于抗病基因成功导入受体细胞的频率低，所以在转化后通常需要进行筛选操作．若该抗病基因存在，则其表达的产物是蛋白质．

（4）该科技成果在环保上的重要作用是减少农药用量，减轻环境污染．

故答案为：

（1）限制酶   A

（2）DNA连接酶 重组DNA

（3）低   筛选    C

（4）减少农药用量，减轻环境污染