热门试卷

解：（1）由以上分析可知，在此工程过程中涉及的现代生物技术主要有基因工程、核移植、动物细胞培养、胚胎移植等技术．

（2）目的基因常采用PCR技术进行扩增．显微注射法是将目的基因导入受体细胞最有效的方法．

（3）①～③是动物细胞培养过程，需要先用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞．用胰蛋白酶处理组织，可获得单个细胞．由于卵细胞大、易操作、分化程度低，体细胞的细胞核在卵细胞质中才能表现出全能性，故一般利用未受精的卵细胞去核后做受体，而不用普通的体细胞．

（4）⑦的细胞核来自于荷斯坦奶牛，细胞核是遗传的控制中心，故⑦的遗传性状和荷斯坦奶牛最相似．该技术利用需要荷斯坦牛产生乳汁，因此必需为母牛．

故答案为：

（1）转基因技术、核移植技术、动物细胞培养，胚胎移植

（2）PCR技术　显微注射法

（3）胰蛋白酶　卵细胞中有促使细胞核表达全能性的物质

（4）因为个体⑦的遗传物质主要来自荷斯坦奶牛　XX

解：（1）胰蛋白酶的作用是消化组织细胞间的物质，使组织分散成单个细胞．

（2）根据题意和图示分析可知：由于GDNF基因两边都有XhoⅠ限制酶识别序列，所以构建含GCDNF基因的表达载体时，需选择图1中的XhoⅠ限制酶进行酶切．

（3）选择HpaⅠ酶和BamⅡ酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片透进行电泳分析，结果如图2所示，由于GDNF基因中有BamⅡ酶识别序列，所以图中第②泳道显示所鉴定的载体是正向连接的．

（4）为了检测GDNF基因是否成功表达，可利用抗原-抗体杂交技术，用相应的抗体与提取的蛋白质杂交，当培养的神经干细胞达到一定密度时，需进行传代培养以得到更多数量的细胞，用于细胞干细胞移植治疗实验．

故答案为：

（1）使细胞分散开

（2）XhoⅠ

（3）②

（4）抗体    传代

解：（1）图1表示基因表达载体的构建过程，其中A（质粒）和B重组产生的C叫重组质粒；该过程需要先用限制性核酸内切酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．除了细菌以外，酵母菌等也能够作为接纳C的受体细胞．

（2）质粒A模板链中碱基为AGT，则mRNA中对应的密码子为UCA，tRNA上中的反密码子为AGU．在翻译的过程中，一个核糖体一般可以容纳两个tRNA携带氨基酸进入核糖体与mRNA进行互补配对，使得两个氨基酸之间脱水缩合形成肽键，最多不会超过3个．

（3）A、A中含有标记基因，且限制酶切割后不会破坏标记基因，A正确；

B、B中不含标记基因，不便于之后的筛选过程，B错误；

C、C中含有标记基因，但用限制酶切割后会破坏标记基因，C错误；

D、D中含有标记基因，但用限制酶切割后会破坏标记基因，D错误．

故选：BCD．

（4）基因转录产物为mRNA，因此转录起始位点（TSS）和终止位点（TTS）应在mRNA两端；作为起始密码子（STC）应在转录起始位点之后，终止密码子（SPC）应在转录终止位点之前，这样才能保证翻译的正常开始和终止．

故选：B．

故答案为：

（1）重组质粒   DNA连接酶     酵母菌等

（2）AGU    2（或3）

（3）BCD

（4）B

解：（1）从基因文库中获得的目的基因可用PCR技术进行扩增．将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状的产生所依据的原理是基因重组．如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，培育出的烟草植株不具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能复制和转录，所以需要构建基因表达载体．

（2）只要SalⅠ酶切割含有目的基因的DNA与质粒，形成相同的黏性末端，容易发生自身连接和反向接入；HindⅢ会破坏目的基因；则在构建重组质粒时，应选用SalⅠ、HindⅢ两种酶对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性．

（3）在重组质粒中，除抗盐基因外，还必须有启动子、终止子和标记基因等，其中启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的位点并驱动基因转录出mRNA，标记基因的作用是鉴定受体细胞中是否含有目的基因并筛选出含目的基因的受体细胞．

（4）用含重组质粒的土壤农杆菌感染烟草细胞后，可采用DNA分子杂交技术检测烟草细胞的染色体DNA上是否插入了抗盐基因，采用抗原-抗体杂交技术检测抗盐基因是否在转基因烟草细胞中表达．

（5）为了进一步确定抗盐烟草是否培育成功，需要对转基因抗盐草幼苗用一定浓度的盐水浇灌方法从个体生物学水平上鉴定烟草植株的耐盐性．

故答案为：

（1）PCR    基因重组    复制和转录

（2）SalⅠ和HindⅢ

（3）终止子   RNA聚合酶识别和结合的位点并驱动基因转录出mRNA   鉴定受体细胞中是否含有目的基因并筛选出含目的基因的受体细胞

（4）DNA分子杂交   抗原-抗体杂交

（5）一定浓度的盐水浇灌

解：（1）为了使动物组织分散开为单个细胞通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理．

（2）基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因和标记基因．启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端．

（3）PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、TaqDNA聚合酶和一对DNA引物；在PCR反应过程中，有一个环节是从较高的温度冷却到相对较低的55℃左右，其作用让引物结合到互补DNA链上，形成局部双链．

故答案为：

（1）胰蛋白（或胶原蛋白）　

（2）启动子　终止子

（3）脱氧核糖核苷酸  引物　Taq 酶（热稳定DNA聚合酶）

解：农杆菌可分为根瘤农杆菌和发根农杆菌，在植物基因工程中以根瘤农杆菌的Ti质粒结导的遗传转化最多．根瘤农杆菌广泛存在于双子叶植物中．据不完全统计，约有93属643种双子叶植物对根瘤农杆菌敏感．裸子植物对该菌也敏感，当这些植物被该菌侵染后会诱发肿瘤．

根瘤农杆菌具有趋化性，即植物的受伤组织会产生一些糖类和酚类物质吸引根瘤农杆菌向受伤组织集中．研究证明，主要酚类诱导物为乙酰丁香酮和羧基乙酰丁香酮，这些物质主要在双子叶植物细胞壁中合成，通常不存在于单子叶植物中，这也是单子叶植物不易被根瘤农杆菌侵染的原因．

利用农杆菌侵染单子叶植物进行遗传转化时，需要加上述酚类物质的．如果想将一个抗病毒基因转入小麦，也可以用农杆菌转化法，但要注意两点：①要选择合适的农杆菌菌株，因为不是所有的农杆菌菌株都可以侵染单子叶植物；②要加趋化和诱导的物质，一般为乙酰丁香酮等，目的是使农杆菌向植物组织的受伤部位靠拢（趋化性）和激活农杆菌的Vir区（诱导性）的基因，使T-DNA转移并插入到染色体DNA上．

故答案为：

乙酰丁香酮和羧基乙酰丁香酮等酚类诱导物主要在双子叶植物细胞壁中合成，通常不存在于单子叶植物中

如果想将一个抗病毒基因转入小麦，需要加上乙酰丁香酮等酚类诱导物

解：（1）用促性腺激素对良种奶牛进行处理，可促使其超数排卵；①是切割运载体的过程，需采用限制酶；②是采用反转录法合成目的基因的过程，该过程需要逆转录酶的参与；③为目的基因的扩增过程，需要采用PCR技术；④表示基因表达载体的构建过程；显微注射法是将目的基因导入受体细胞最有效的方法．

（2）基因表达是指基因控制蛋白质的合成．如果转基因牛D的牛奶中含有血清白蛋白，则说明血清蛋白基因在个体水平已表达成功；其他细胞中不含血清蛋白是基因选择性表达的结果．

（3）由以上分析可知，图中A是指早期胚胎培养，B是指胚胎移植．

（4）沼气工程利用的是生态工程的原理物质循环再生．

故答案为：

（1）促性腺激素   限制   逆转录   PCR  基因表达载体的构建  显微注射法

（2）血清白蛋白  基因选择性表达 

（3）早期胚胎培养（受精卵培养）   胚胎移植

（5）物质循环再生

解：（1）根据题意可知，提取乙肝病毒（HBV）基因重组后，与β-半乳糖苷酶基因结合，启动子在组合基因的首端，控制基因转录的开始，终止子在组合基因的末端，即插入B点，从而终止基因的转录．

（2）真核细胞中，分泌蛋白的合成与分泌过程：核糖体合成蛋白质→内质网进行粗加工→高尔基体进行再加工→细胞膜，而原核细胞中只有核糖体一种细胞器，即大肠杆菌中没有内质网和高尔基体，不能对该蛋白质进一步修饰、纯化．

（3）在动物细胞培养的过程中，培养基的pH应该控制在7.2-7.4．从分子水平上使用抗原-抗体杂交对特异性免疫应答结果进行检测．

故答案为：

（1）B 转录

（2）内质网、高尔基体

（3）7.2-7.4    抗原-抗体杂交

解：（1）质粒中两个标记基因中均有限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-↓GATC-，若用该酶切，抗性基因均被破坏，因此用限制酶Ⅱ切割质粒；目的基因可以用限制酶Ⅰ或两种酶一起切割，由于两种切割形成的末端序列相同，因此可以连接．①基因表达载体的构建过程在体外进行．

（2）用限制酶Ⅱ切割质粒，破坏了质粒中的氨苄青霉素抗性基因，因此标记基因是四环素抗性基因，所以应有含四环素的选择培养基上．

（3）重组质粒导入大肠杆菌的目的是大量复制目的基因．

（4）⑤所示的由一个植物细胞发育为一个完整的植株的技术叫植物组织培养，体现了细胞的全能性，而根本原因细胞中含有发育成完整个体的全部遗传物质．

故答案为：

（1）ⅡⅠ体外

（2）四环素        选择

（3）大量复制目的基因

（4）植物组织培养   含有本物种全部基因