热门试卷

（2015秋•安徽月考）某实验小组以洋葱组织为实验材料，进行DNA粗提取和鉴定的实验，实验主要过程如图，回答下列问题：

（1）步骤一中需加入一定量的洗涤剂和______对洋葱组织进行处理，加入前者是为了瓦解细胞膜结构，加入后者的目的是______．将搅拌和研磨后的物质进行过滤，即可得到含有DNA的滤液．

（2）步骤二是DNA纯化过程中的关键步骤，可以采用以下几种不同的方法：①滤液中NaCl浓度在0.14mol/L时可分离出DNA，若要再次提纯，需要将其溶解在mol/L的NaCl溶液中；

②通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉，其目的是______；

③将得到的DNA粗提取物放在60～75℃水浴中保温10～15min，蛋白质被破坏，但仍能得到纯度较高的DNA，说明了DNA______．

（3）步骤三中向滤液中加入DNA体积分数为95%的酒精的目的是______，依据的原理是______．得到纯净的DNA后，可利用DNA与______在沸水浴条件下发生显色反应，来对其进行鉴定．

某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动．具体步骤如下：

材料处理：称取新鲜的菜花、辣椒和蒜黄各2份，每份10g．剪碎后分成两组，一组置于20℃，另一组置于-20℃条件下保存24h．

DNA粗提取：

第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL 研磨液，充分研磨．用纱布过滤，取滤液备用．

第二步：将滤液放在60〜75℃的恒温水浴箱中保温10〜15min，然后将溶液过滤．

第三步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上．

第四步：取6支试管，分别加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮状物．

DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液颜色的深浅，结果如表：

注：“+“越多表示蓝色越深．

分析上述实验过程，回答下列问题：

（1）该探究性实验课题的名称是______．

（2）第二步操作目的是______．

（3）第三步中“缓缓地“搅拌，这是为了减少______．

（4）根据实验结果，得出结论并分析．

①结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多．结论2：______．

②针对结论1，请提出合理的解释：______．

（5）氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小．为了进一歩提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第四步的基础上继续操作的步骤是：______．然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出．

某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取和鉴定实验后，尝试开展RNA的粗提取和鉴定实验．通过查阅资料，制订了以下的实验方案：

【实验课题】酵母RNA的提取和鉴定

【实验目的】1．从酵母中提取RNA；2．鉴定RNA．

【实验原理】微生物是工业上大量生产RNA的原料，其中以酵母尤为理想，因为酵母核酸中主要是RNA，DNA很少，菌体易收集，RNA易分离．RNA不溶于乙醇和无水乙醚．RNA热稳定性较蛋白质强．利用稀碱法（稀碱能使细胞壁溶解）或高盐法（高浓度的盐改变细胞膜的通透性）来释放RNA．RNA水解液（加硫酸、加热）+苔黑酚-FeCl3试剂加热直到沸腾1分钟，会呈现墨绿色．

【实验材料】干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等；0.2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚-FeCl3试剂等．

【实验步骤】

①称6克干酵母

②加0.2%氢氧化钠45mL，沸水加热20分钟，搅拌，后加乙酸7滴

③离心10分钟后取上清液

④边搅拌边缓慢加95%乙醇并静置10分钟

⑤离心后先用95%乙醇洗两次，再用无水乙醚洗两次

⑥获得RNA粗制品

⑦RNA鉴定

请根据实验方案，思考并回答下列问题：

（1）酵母菌细胞中的RNA主要分布在______中．酵母菌也是便于用来研究细胞呼吸不同方式的好材料，理由是______．

（2）实验步骤⑤中，离心后取______（填“上清液”或“沉淀物”）用乙醇、无水乙醚进行洗涤．

（3）RNA提取过程要注意温度的控制，在20～70℃的温度范围内停留的时间不能太长，其原因是______；

（4）稀碱法提取RNA须在沸水浴中进行的目的，一是______，二是______，以便获得更多更纯净的RNA．

（5）若用花椰菜来提取DNA，可用______瓦解细胞膜，然后充分研磨，实验中研磨速度要______．

“DNA的粗提取与鉴定”实验中，A、B、C、D、E五个小组除下表中所列处理方法不同外，其他操作步骤均相同，而且正确，但实验结果却不同．

（1）实验材料选择错误的组别是______，其原因是______．

（2）B组实验不成功的最主要原因是______．

（3）沸水浴后试管颜色变蓝的组别是______；蓝色较淡的是______，其原因是______．