- DNA的粗提取与鉴定
- 共151题
（1）DNA粗提取的实验中使用冷却的95%酒精的目的是______，该实验中向盛有鸡血细胞液的烧杯中加入蒸馏水的目的是______，向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中加入蒸馏水，溶液中会出现黏稠物，当黏稠物不再增加时，这时溶液中NaCl的物质的量的浓度相当于______．
（2）在提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液．加入洗涤剂作用分别是______．
（3）在DNA粗提取与鉴定的实验中，选择适当浓度的NaCl溶液就能充分溶解DNA而使杂质沉淀或析出DNA过滤去除溶液中的可溶性杂质．请在图中做出DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线．
（4）PCR反应需要在一定的______溶液中进行，每次循环可以分为______、______、和______三步．DNA的合成方向总是从子链的______延伸．
（5）血红蛋白的提取方法可以采用______，该方法主要是利用血红蛋白的哪一特性将它与其他物质分开的？______．
正确答案
解：（1）DNA粗提取的实验中使用冷却的95%酒精的目的是使DNA析出，该实验中向盛有鸡血细胞液的烧杯中加入蒸馏水的目的是使细胞破裂，向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中加入蒸馏水，溶液中会出现黏稠物，当黏稠物不再增加时，这时溶液中NaCl的物质的量的浓度相当于0.14 mol/L．
（2）在提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂，作用是溶解细胞膜，有利于DNA的释放；加入食盐的作用是有利于DNA的溶解．
（4）PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行，每次循环可以分为变性复性延伸三步．DNA的合成方向总是从子链的3′延伸．
（5）血红蛋白的提取方法可以采用凝胶色谱法，该方法主要是利用血红蛋白的蛋白质分子相对分子质量大小不同将它与其他物质分开的．
故答案为：
（1）使DNA析出 使细胞破裂 0.14 mol/L
（2）溶解细胞膜，有利于DNA的释放 有利于DNA的溶解
（3）DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl浓度的变化而改变，如图所示
（4）缓冲溶液 变性复性延伸 3′
（5）凝胶色谱法 蛋白质分子相对分子质量大小不同
解析
解：（1）DNA粗提取的实验中使用冷却的95%酒精的目的是使DNA析出，该实验中向盛有鸡血细胞液的烧杯中加入蒸馏水的目的是使细胞破裂，向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中加入蒸馏水，溶液中会出现黏稠物，当黏稠物不再增加时，这时溶液中NaCl的物质的量的浓度相当于0.14 mol/L．
（2）在提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂，作用是溶解细胞膜，有利于DNA的释放；加入食盐的作用是有利于DNA的溶解．
（4）PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行，每次循环可以分为变性复性延伸三步．DNA的合成方向总是从子链的3′延伸．
（5）血红蛋白的提取方法可以采用凝胶色谱法，该方法主要是利用血红蛋白的蛋白质分子相对分子质量大小不同将它与其他物质分开的．
故答案为：
（1）使DNA析出 使细胞破裂 0.14 mol/L
（2）溶解细胞膜，有利于DNA的释放 有利于DNA的溶解
（3）DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl浓度的变化而改变，如图所示
（4）缓冲溶液 变性复性延伸 3′
（5）凝胶色谱法 蛋白质分子相对分子质量大小不同
DNA在NaCl溶液中的溶解度有二重性，随着NaCl溶液浓度的变化而变化．
（1）请在下列浓度的NaCl溶液中，选出能使DNA析出最彻底的一种和溶解度最高的一种______
A．0.14mol/L B．2mol/L C．0.15mol/L D．0.3mol/L
（2）欲使溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中的DNA析出，需降低NaCl溶液的浓度，最有效的方法是______
A．加蒸馏水 B．加矿泉水 C．加清水 D．加生理盐水
（3）DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液，利用这一原理可以______，可以推测溶于酒精的物质中可能有______．
（4）利用DNA遇______呈蓝色的特性，将该物质作为鉴定______的试剂．其实验过程要点是向放有______的试管中加入4mL的______．混合均匀后，将试管置于______5min，待试管______，观察试管中溶液颜色的变化．这个实验也说明DNA耐______温，前次温度有利于______，后次温度则有利于DNA______．
正确答案
解：（1）DNA在不同浓度的NaCl溶液中DNA溶解度不同，DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度最大，而在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小．
（2）因为DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小，所以应该在2mol/L的NaCl溶液加入蒸馏水，逐渐降低NaCl溶液的浓度至0.14mol/LNaCl，则可以析出DNA．
（3）DNA不溶于酒精溶液，而细胞中的某些盐类、蛋白质、糖类或其他大分子物质能溶于酒精溶液，利用这一原理，可以将DNA与蛋白质等杂质进一步分离．
（4）DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂．鉴定时向溶有DNA的试管中加入二苯胺试剂，沸水中加热后冷却即可以观察到蓝色．加热的目的是加快染色的反应速度，也说明DNA具有耐高温的特性，而冷却有利于DNA的析出．
故答案为：
（1）A、B
（2）A
（3）除去杂质 某些盐类、蛋白质、糖类或其他大分子物质
（4）二苯胺试剂 DNA DNA 二苯胺试剂 沸水中加热 冷却后 高 加快染色的反应速度 析出
解析
解：（1）DNA在不同浓度的NaCl溶液中DNA溶解度不同，DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度最大，而在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小．
（2）因为DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小，所以应该在2mol/L的NaCl溶液加入蒸馏水，逐渐降低NaCl溶液的浓度至0.14mol/LNaCl，则可以析出DNA．
（3）DNA不溶于酒精溶液，而细胞中的某些盐类、蛋白质、糖类或其他大分子物质能溶于酒精溶液，利用这一原理，可以将DNA与蛋白质等杂质进一步分离．
（4）DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂．鉴定时向溶有DNA的试管中加入二苯胺试剂，沸水中加热后冷却即可以观察到蓝色．加热的目的是加快染色的反应速度，也说明DNA具有耐高温的特性，而冷却有利于DNA的析出．
故答案为：
（1）A、B
（2）A
（3）除去杂质 某些盐类、蛋白质、糖类或其他大分子物质
（4）二苯胺试剂 DNA DNA 二苯胺试剂 沸水中加热 冷却后 高 加快染色的反应速度 析出
为了从动物组织中提取纯净的DNA，首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞．消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶（如蛋白酶K）水解、表面活性剂处理、变性剂处理等．某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化裂解猪肌肉样本，并提取猪的DNA．实验步骤如下：
①取500mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中，加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超纯水混合，在一定温度条件下水浴消化24h；
②加入苯酚、氯仿、异丙醇（25：24：1）混合液使蛋白质变性，抽提蛋白质；
③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37℃水浴1h；
④加醋酸钠和无水乙醇，高速离心15min；
⑤用70%乙醇洗涤沉淀两次，风干，得到高纯度的DNA．
请回答有关问题：
（1）加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是______．
（2）步骤③的目的是______，步骤④中使用无水乙醇的目的是______．
（3）将提取到的DNA用2mol/L的NaCl溶液溶解后，与______试剂共热，冷却后可观察到溶液呈蓝色．
（4）实验中发现，实验前将新鲜的猪肌肉组织置于液氮冷藏，与室温下放置相同时间的等量猪肌肉组织相比，提取到的DNA含量较多，最可能的原因是______．
（5）如果要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比，请简要说明实验设计思路______．
正确答案
解：（1）洗衣粉中的蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜，因此加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞．
（2）步骤③的目的是水解RNA，去除杂质；步骤④中使用无水乙醇的目的是析出DNA，提取含杂质较少的DNA．
（3）在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色．
（4）酶的活性受温度影响，低温会抑制DNA酶的活性，减少DNA降解，因此实验前将新鲜的猪肌肉组织置于液氮冷藏，与室温下放置相同时间的等量猪肌肉组织相比，提取到的DNA含量较多．
（5）要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比，可将加酶洗衣粉换成蛋白酶K，重复上述实验步骤，得到DNA后，测定DNA的量和纯度，并与加酶洗衣粉组比较．
故答案为：
（1）洗衣粉中的蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜
（2）水解RNA，去除杂质 析出DNA，提取含杂质较少的DNA
（3）二苯胺
（4）低温抑制了DNA酶的活动，减少DNA降解
（5）将加酶洗衣粉换成蛋白酶K，重复上述实验步骤，得到DNA后，测定DNA的量和纯度，并与加酶洗衣粉组比较
解析
解：（1）洗衣粉中的蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜，因此加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞．
（2）步骤③的目的是水解RNA，去除杂质；步骤④中使用无水乙醇的目的是析出DNA，提取含杂质较少的DNA．
（3）在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色．
（4）酶的活性受温度影响，低温会抑制DNA酶的活性，减少DNA降解，因此实验前将新鲜的猪肌肉组织置于液氮冷藏，与室温下放置相同时间的等量猪肌肉组织相比，提取到的DNA含量较多．
（5）要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比，可将加酶洗衣粉换成蛋白酶K，重复上述实验步骤，得到DNA后，测定DNA的量和纯度，并与加酶洗衣粉组比较．
故答案为：
（1）洗衣粉中的蛋白酶和表面活性剂等可以破坏细胞膜
（2）水解RNA，去除杂质 析出DNA，提取含杂质较少的DNA
（3）二苯胺
（4）低温抑制了DNA酶的活动，减少DNA降解
（5）将加酶洗衣粉换成蛋白酶K，重复上述实验步骤，得到DNA后，测定DNA的量和纯度，并与加酶洗衣粉组比较
某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下：
材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24h。
DNA粗提取：
第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。
第二步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。
第三步：取6支试管，分别加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮状物。
DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表：
分析上述实验过程，回答下列问题：
(1)该探究性实验课题名称是_______________。
(2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少__________。
(3)根据实验结果，得出结论并分析。
①．结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多。结论2_________。
②．针对结论1，请提出合理的解释：_________________。
(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：___________________。然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。
正确答案
(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响
(2)DNA断裂
(3)①．等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多 ②．低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢
(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液
萝卜贮藏根组织细胞中是否存在蛋白质和DNA?某生物小组对此进行研究，他们从网上查阅资料得知：①蛋白质在10%NaCl溶液中可沉淀析出；②在蛋白质溶液中加入双缩脲试剂，溶液呈特有的颜色；③DNA溶于10%NaCl溶液，但在95%酒精中呈白色絮状沉淀析出。
实验材料：白萝卜。
实验用具：粉碎机、烧杯、漏斗、试管、滤纸、玻璃棒、镊子、载玻片、天平、纱布等。
药品及试剂：蒸馏水、NaCl、95%酒精、甲基绿染液、双缩脲试剂、蛋白质标准样品。
请你根据所提供的条件参与实验设计并完成实验。
(1)材料处理：____________________________________________。
(2)提取：________________________________________________。
(3)鉴定及结果：__________________________________________。
(4)讨论：
①蛋白质在萝卜贮藏根组织中所起的作用是____________________；
②DNA主要来自萝卜贮藏根组织细胞的_____________________。
正确答案
(1)称取50g萝卜洗净切块，加水30mL，用粉碎机粉碎，将匀浆用纱布过滤
(2)①．向经纱布过滤得到的滤液中加入10%NaCl溶液，直至沉淀析出，经滤纸过滤，将滤纸上的沉淀物放入试管中，加1mL蒸馏水，振荡，用于蛋白质鉴定；②．向除去蛋白质的滤液中，加入95%酒精，用玻璃棒轻轻搅拌，直到白色沉淀不再析出时，经滤纸过滤，用镊子将滤纸上的絮状物沉淀置于载玻片上，用于DNA鉴定
(3)①．在用于蛋白质鉴定的实验试管中，加入双缩脲试剂，产生颜色反应，同时将蛋白质标准样品和1mL蒸馏水放入另一试管，加入双缩脲试剂产生颜色反应，观察到两试管中颜色基本一致，说明实验试管中有蛋白质存在；②．在用于DNA鉴定的载玻片上，滴加甲基绿染液，待测物呈蓝绿色，说明该白色絮状物为DNA；③．通过对萝卜贮藏根匀浆液的检测，说明其细胞中有蛋白质和DNA存在
(4)①．细胞膜等生物膜的结构成分，是酶等功能蛋白质的组成成分，也是糊粉粒等贮存蛋白质的成分
②．细胞核
扫码查看完整答案与解析