- 目的基因导入受体细胞
- 共1561题
Ⅰ.回答下列问题:
(1)对于基因工程来说,其核心是______;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是______.
(2)植物体细胞杂交过程有两个关键,一个是在把植物细胞杂交之前,必须______
;另外一个是______.
(3)在进行单克隆抗体的生产过程中,要把两种细胞进行融合,一种是在体外能够大量增殖的骨髓瘤细胞,另外一种是______;诱导该两种细胞融合常用的因素有PEG、电激、______等.
(4)胚胎干细胞在功能上具有发育的______性,在体外培养的条件下,可以增殖而不发生______.
正确答案
解:(1)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建;显微注射法是将目的基因导入动物细胞最有效的方法.
(2)植物体细胞杂交过程有两个关键,一个是在把植物细胞杂交之前,必须去除细胞外的细胞壁,该过程需要用到纤维素酶和果胶酶;另外一个是诱导原生质体的融合,方法包括物理法(离心、振动、电刺激)和化学法(聚乙二醇).
(3)在进行单克隆抗体的生产过程中,要把两种细胞进行融合,一种是在体外能够大量增殖的骨髓瘤细胞,另外一种是B淋巴细胞;诱导该两种细胞融合常用的因素有物理(离心、振动、电刺激)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒等).
(4)胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性,在体外培养的条件下,可以增殖而不发生分化.
故答案为:
(1)基因表达载体的构建 显微注射技术
(2)去除细胞外的细胞壁 原生质间的融合
(3)B淋巴细胞 灭活的病毒
(4)全能 分化
解析
解:(1)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建;显微注射法是将目的基因导入动物细胞最有效的方法.
(2)植物体细胞杂交过程有两个关键,一个是在把植物细胞杂交之前,必须去除细胞外的细胞壁,该过程需要用到纤维素酶和果胶酶;另外一个是诱导原生质体的融合,方法包括物理法(离心、振动、电刺激)和化学法(聚乙二醇).
(3)在进行单克隆抗体的生产过程中,要把两种细胞进行融合,一种是在体外能够大量增殖的骨髓瘤细胞,另外一种是B淋巴细胞;诱导该两种细胞融合常用的因素有物理(离心、振动、电刺激)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒等).
(4)胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性,在体外培养的条件下,可以增殖而不发生分化.
故答案为:
(1)基因表达载体的构建 显微注射技术
(2)去除细胞外的细胞壁 原生质间的融合
(3)B淋巴细胞 灭活的病毒
(4)全能 分化
如图一是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答.
(1)①过程是______场所在______.②过程是______ 需要得酶是______.
(2)⑤代表______ 技术,④过程需要的酶是______,该酶的特点是______.
(3)⑧过程中用______ (药剂)处理D使之更容易吸收C.
(4)如图二是运载体和胰岛素基因的某个片段,已知限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-.GeneⅠ和GeneⅡ为标记基因,根据图示,判断下列操作正确的是______.
A.质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割 B.质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割
C.目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 D.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
(5)人的基因能和异种生物的基因拼接在一起,是因为______.人胰岛素基因能在大肠杆菌种表达是因为人和大肠杆菌共用______.
(6)检测大肠杆菌是否转录人胰岛素基因用______ 技术.大肠杆菌是否合成胰岛素,检测方法是______.
正确答案
解:(1)根据图示:①过程是转录,合成mRNA,发生在细胞核中;②过程是逆转录,合成DNA,需要逆转录酶催化.
(2)⑤代表PCR技术,④过程需要耐高温的热稳定DNA聚合酶.
(3)⑧过程是将目的基因导入大肠杆菌,所以需要用Ca离子处理D使之成为感受态,从而更容易吸收C.
(4)由图可知,质粒上的两个标记基因中均有限制酶Ⅱ(-↓GATC-)的识别序列和切点,若用该酶切割会将两个标记基因均破坏,因此只能用限制酶Ⅰ切割质粒,但切割含有抗虫基因的外源DNA分子时可以只用限制酶Ⅱ,也可以同时用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ.故选A.
(5)因为DNA分子都是独特的双螺旋结构,且都是由四种脱氧核苷酸,所以不同生物的基因可以拼接在一起.人胰岛素基因能在大肠杆菌种表达是因为人和大肠杆菌共用一套遗传密码.
(6)检测大肠杆菌是否导入用DNA分子杂交技术,检测大肠杆菌是否转录人胰岛素基因用分子杂交技术.大肠杆菌是否合成胰岛素,检测方法是抗原--抗体杂交.
故答案为:
(1)转录 细胞核 逆转录 逆转录酶
(2)PCR 热稳定DNA聚合酶 耐高温
(3)Ca离子
(4)A
(5)DNA分子都是独特的双螺旋结构,都是由四种脱氧核苷酸 一套遗传密码
(6)分子杂交 抗原--抗体杂交
解析
解:(1)根据图示:①过程是转录,合成mRNA,发生在细胞核中;②过程是逆转录,合成DNA,需要逆转录酶催化.
(2)⑤代表PCR技术,④过程需要耐高温的热稳定DNA聚合酶.
(3)⑧过程是将目的基因导入大肠杆菌,所以需要用Ca离子处理D使之成为感受态,从而更容易吸收C.
(4)由图可知,质粒上的两个标记基因中均有限制酶Ⅱ(-↓GATC-)的识别序列和切点,若用该酶切割会将两个标记基因均破坏,因此只能用限制酶Ⅰ切割质粒,但切割含有抗虫基因的外源DNA分子时可以只用限制酶Ⅱ,也可以同时用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ.故选A.
(5)因为DNA分子都是独特的双螺旋结构,且都是由四种脱氧核苷酸,所以不同生物的基因可以拼接在一起.人胰岛素基因能在大肠杆菌种表达是因为人和大肠杆菌共用一套遗传密码.
(6)检测大肠杆菌是否导入用DNA分子杂交技术,检测大肠杆菌是否转录人胰岛素基因用分子杂交技术.大肠杆菌是否合成胰岛素,检测方法是抗原--抗体杂交.
故答案为:
(1)转录 细胞核 逆转录 逆转录酶
(2)PCR 热稳定DNA聚合酶 耐高温
(3)Ca离子
(4)A
(5)DNA分子都是独特的双螺旋结构,都是由四种脱氧核苷酸 一套遗传密码
(6)分子杂交 抗原--抗体杂交
回答下列关于基因工程和胚胎工程方面的问题.
(1)科学家在1992年克隆出了GFP基因,随后马丁•沙尔菲成功地让GFP基因在大肠杆菌和线虫中表达成功.之后,会发光的鼠、猪、兔、蝌蚪、鱼也相继问世.图2是转基因绿色荧光鼠的培育过程:
①图2中的目的基因是______,基因表达载体构建除了需要目的基因外,还需要______、______和______.过程②常用的方法是______.
②基因表达载体是否导入受体细胞可以通过检测______进行确认.目的基因是否表达可以通过进行______确认.
③图中④过程用到______技术.
(2)图1是科学家培育试管转基因牛的过程示意图,据图回答下列问题.
①过程①通常用______处理,可达到超数排卵的目的.
②图中1是______,2是______.
③过程③进行时,受体应处于适合的生理状况,此时可利用激素对受体进行______处理.③过程若要同时产生多个相同的转基因牛通常用到的技术是______.
④为确保得到所需性别的转基因牛,往往对移植前的胚胎进行性别鉴定,写出两种鉴别早期胚胎性别的方法______、______.
正确答案
解:(1)①图2中的目的基因是GFP基因,构建的基因表达载体包括启动子、目的基因、标记基因和终止子.过程②是将目的基因导入受体细胞的过程,当受体细胞是动物细胞时,通常采用显微注射法.
②基因表达载体是否导入受体细胞可以通过检测是否有标记基因的表达产物进行确认.目的基因是否表达可以通过是否发出绿色荧光进行确认.
③早期胚胎需要利用胚胎移植技术进入代孕母鼠体内进行进一步发育.
(2)①过程①表示用激素(常用促性腺激素)对供体母牛做超数排卵处理,达到超数排卵的目的.
②图中1为透明带,2是滋养层,3是内细胞团,具有发育的全能性.
③过程③表示胚胎移植过程,胚胎移植能否成功,与供体和受体的生理状况有关,所以进行胚胎移植时,应对受体进行同期发情,使之处于适合的生理状况.③过程若要同时产生多个相同的转基因牛通常用到的技术是胚胎分割移植技术.
④为确保得到所需性别的转基因牛,往往对移植前的胚胎进行性别鉴定,常用的鉴别早期胚胎性别的方法有DNA分子杂交技术和分析胚胎细胞的染色体组型等.
故答案为:
(1)①GEP基因 标记基因 启动子 终止子 显微注射法
②是否有标记基因的表达产物 是否发出绿色荧光
③胚胎移植
(2)①促性腺激素
②透明带 滋养层
③同期发情 胚胎分割技术
④DNA分子杂交技术和分析胚胎细胞的染色体组型
解析
解:(1)①图2中的目的基因是GFP基因,构建的基因表达载体包括启动子、目的基因、标记基因和终止子.过程②是将目的基因导入受体细胞的过程,当受体细胞是动物细胞时,通常采用显微注射法.
②基因表达载体是否导入受体细胞可以通过检测是否有标记基因的表达产物进行确认.目的基因是否表达可以通过是否发出绿色荧光进行确认.
③早期胚胎需要利用胚胎移植技术进入代孕母鼠体内进行进一步发育.
(2)①过程①表示用激素(常用促性腺激素)对供体母牛做超数排卵处理,达到超数排卵的目的.
②图中1为透明带,2是滋养层,3是内细胞团,具有发育的全能性.
③过程③表示胚胎移植过程,胚胎移植能否成功,与供体和受体的生理状况有关,所以进行胚胎移植时,应对受体进行同期发情,使之处于适合的生理状况.③过程若要同时产生多个相同的转基因牛通常用到的技术是胚胎分割移植技术.
④为确保得到所需性别的转基因牛,往往对移植前的胚胎进行性别鉴定,常用的鉴别早期胚胎性别的方法有DNA分子杂交技术和分析胚胎细胞的染色体组型等.
故答案为:
(1)①GEP基因 标记基因 启动子 终止子 显微注射法
②是否有标记基因的表达产物 是否发出绿色荧光
③胚胎移植
(2)①促性腺激素
②透明带 滋养层
③同期发情 胚胎分割技术
④DNA分子杂交技术和分析胚胎细胞的染色体组型
现代生物技术和应用.
干扰素是治疗癌症的重要物质,人血液中只能提取微量的干扰素,因而价格昂贵.利用生物工程可获得价格低廉、药性一样的干扰素.
(1)直接从人的淋巴细胞提取能指导干扰素合成的______,并使之与质粒的DNA结合.
(2)如图一是形成重组质粒的操作过程.其中工具A、C名称分别是______、______.
(3)图二表示切割基因分子的过程,图中可知,该酶能识别的碱基序列和切点是______
A.CTTAAG,切点在C和T之间 B.CTTAAG,切点在G和A之间
C.GAATTC,切点在G和A之间 D.GAATTC,切点在C和T之间.
正确答案
解:(1)在该基因工程中,指导干扰素合成的基因为目的基因.
(2)图一中,A为限制酶,能切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体;C为DNA连接酶,能将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子.
(3)根据图二可知,该酶的识别序列为GAATTC,切点在G和A之间.
故答案为:
(1)目的基因
(2)限制酶,DNA连接酶
(3)C
解析
解:(1)在该基因工程中,指导干扰素合成的基因为目的基因.
(2)图一中,A为限制酶,能切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体;C为DNA连接酶,能将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子.
(3)根据图二可知,该酶的识别序列为GAATTC,切点在G和A之间.
故答案为:
(1)目的基因
(2)限制酶,DNA连接酶
(3)C
干扰素是治疗癌症的重要药物,它必须从血液中提取,每升人血只能提取0.05μg,所以价格昂贵.现在美国加利福尼亚的某生物制品公司用如图所示的方式生产干扰素.试分析其原理、过程和优点:
(1)首先要从人的淋巴细胞中提取干扰素基因作为______.
(2)其次从细菌中提取质粒作为______,其具备的特点是______、______(写出两点).
(3)使干扰素基因与细菌质粒相结合时,要先用______处理质粒,目的是产生相同的______,再用______酶处理,使两者形成重组质粒.
(4)将重组质粒移植到酵母菌体内,再通过______,以获取能够分泌人类干扰素的酵母菌.
正确答案
解:(1)从人的淋巴细胞中获取出干扰素基因,此基因在基因工程中称为目的基因.
(2)质粒作为运载体,作为运载体必需具备一下条件:有一个或多个限制酶切割位点,在细胞中能够自我复制,有特殊的标记基因等.
(3)构建基因表达载体时,需要同一种限制性核酸内切酶处理质粒和目的基因,使它们产生相同的黏性末端,再用DNA连接酶处理,使两者形成重组质粒.
(4)基因工程成功的概率较小,因此将重组质粒移植到酵母菌体内,再通过检测(筛选),以获取能够分泌人类干扰素的酵母菌.
故答案为:
(1)目的基因
(2)运载体 有一个或多个限制酶切割位点,在细胞中能够自我复制,有特殊的标记基因等
(3)同一种限制性核酸内切酶 黏性末端 DNA连接酶
(4)检测(筛选)
解析
解:(1)从人的淋巴细胞中获取出干扰素基因,此基因在基因工程中称为目的基因.
(2)质粒作为运载体,作为运载体必需具备一下条件:有一个或多个限制酶切割位点,在细胞中能够自我复制,有特殊的标记基因等.
(3)构建基因表达载体时,需要同一种限制性核酸内切酶处理质粒和目的基因,使它们产生相同的黏性末端,再用DNA连接酶处理,使两者形成重组质粒.
(4)基因工程成功的概率较小,因此将重组质粒移植到酵母菌体内,再通过检测(筛选),以获取能够分泌人类干扰素的酵母菌.
故答案为:
(1)目的基因
(2)运载体 有一个或多个限制酶切割位点,在细胞中能够自我复制,有特殊的标记基因等
(3)同一种限制性核酸内切酶 黏性末端 DNA连接酶
(4)检测(筛选)
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