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简答题

如图表示用显微注射法导入目的基因获得转基因鼠的过程,据图回答.

(1)培育转基因哺乳动物时,与用早期胚胎细胞相比较,受精卵的优势是______

(2)受精卵可以从供体母鼠体内获得,也可以通过体外受精获取.

①若受精卵细胞从供体母鼠体内获得,其基本过程是:首先对供体母鼠用促性腺激素进行______处理,再通过自然交配或______完成受精,最后从供体母鼠输卵管中获得受精卵.

②若受精卵在体外通过体外受精获得,其基本操作过程包括____________和受精.

(3)过程Ⅲ表示受精卵经过体外培养,形成早期胚胎,再移植到受体母鼠体内.培养过程中,培养液添加一定量的______,以防止杂菌污染;在含有5%CO2的培养箱中进行培养,CO2的主要作用是______

(4)用显微注射技术将目的基因导入受体细胞,需要构建______,目的是______

正确答案

解:(1)转基因动物中的受体细胞是受精卵,因为受精卵的全能性高,能直接发育形成新个体.

(2)①若受精卵细胞从供体母鼠体内获得,其基本过程是:首先对供体母鼠用促性腺激素进行超数排卵处理,再通过自然交配或人工授精完成受精,最后从供体母鼠输卵管中获得受精卵.

②若受精卵在体外通过体外受精获得,其基本操作过程包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能和受精.

(3)动物细胞培养过程需要加入抗生素,以防止杂菌污染;同时提供二氧化碳,以维持培养液的PH.

(4)基因工程的核心步骤是构建基因表达载体,目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,并可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用.

故答案为:

(1)全能性高,能直接发育形成新个体

(2)①超数排卵 人工授精 ②卵母细胞的采集和培养(或卵母细胞的采集) 精子的采集和获能(或精子的获取)

(3)抗生素 维持培养液中的pH

(4)基因表达载体    使目的基因在受体细胞中稳定存在,并可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用

解析

解:(1)转基因动物中的受体细胞是受精卵,因为受精卵的全能性高,能直接发育形成新个体.

(2)①若受精卵细胞从供体母鼠体内获得,其基本过程是:首先对供体母鼠用促性腺激素进行超数排卵处理,再通过自然交配或人工授精完成受精,最后从供体母鼠输卵管中获得受精卵.

②若受精卵在体外通过体外受精获得,其基本操作过程包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能和受精.

(3)动物细胞培养过程需要加入抗生素,以防止杂菌污染;同时提供二氧化碳,以维持培养液的PH.

(4)基因工程的核心步骤是构建基因表达载体,目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,并可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用.

故答案为:

(1)全能性高,能直接发育形成新个体

(2)①超数排卵 人工授精 ②卵母细胞的采集和培养(或卵母细胞的采集) 精子的采集和获能(或精子的获取)

(3)抗生素 维持培养液中的pH

(4)基因表达载体    使目的基因在受体细胞中稳定存在,并可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用

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科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高.下图一是转基因抗冻番茄培育过程的示意图,图二为质粒限制酶酶切图谱.鱼的抗冻蛋白基因不含图中限制酶识别序列,Ampr为抗氨苄青霉素基因,其中①-④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤,Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞.请据图作答:

(1)获取鱼的抗冻蛋白基因途径主要有______.为了在番茄中获得抗冻蛋白必须将抗冻蛋白基因连接在质粒中的______之后.图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的______过程.

(2)在构建基因表达载体时,可用一种或者多种限制酶进行切割.该酶的特点______.在此实例中,应该选用限制酶______切割.

(3)要利用培养基筛选出已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞,应使基因表达载体Ⅰ中含有______作为标记基因.

(4)研究人员通常采用______法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内.通常采用______技术,在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质.

正确答案

解:(1)获取目的基因的途径有从体细胞中分离、化学方法人工合成.基因表达载体包括启动子、标记基因、目的基因和终止子等部分,为了在番茄中获得抗冻蛋白必须将抗冻蛋白基因连接在质粒中的启动子之后.图中③表示脱分化过程,④表示再分化过程.

(2)限制酶能识别特定的DNA序列并在特定位点切割.图中质粒中含有多种限制酶识别序列和切割位点,但用限制酶HindⅢ切割会破坏启动子,用限制酶EcoRⅠ切割会破坏终止子,用限制酶KpnⅠ切割会破坏复制原点,用限制酶XbaⅠ切割会去除终止子,用XhoⅠ和其他酶切割会去除启动子,因此应该选用限制酶NdeⅠ、BamHⅠ切割.

(3)由图可知,标记基因是抗氨苄青霉素基因(Ampr).

(4)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法(或基因枪法等).在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质通常采用抗原-抗体杂交技术.

故答案为:

(1)从体细胞中分离和化学方法人工合成    启动子    脱分化、再分化

(2)识别特定的DNA序列并在特定位点切割     NdeⅠ、BamHⅠ

(3)抗氨苄青霉素基因(Ampr) 

(4)农杆菌转化(或基因枪法等)   抗原-抗体杂交

解析

解:(1)获取目的基因的途径有从体细胞中分离、化学方法人工合成.基因表达载体包括启动子、标记基因、目的基因和终止子等部分,为了在番茄中获得抗冻蛋白必须将抗冻蛋白基因连接在质粒中的启动子之后.图中③表示脱分化过程,④表示再分化过程.

(2)限制酶能识别特定的DNA序列并在特定位点切割.图中质粒中含有多种限制酶识别序列和切割位点,但用限制酶HindⅢ切割会破坏启动子,用限制酶EcoRⅠ切割会破坏终止子,用限制酶KpnⅠ切割会破坏复制原点,用限制酶XbaⅠ切割会去除终止子,用XhoⅠ和其他酶切割会去除启动子,因此应该选用限制酶NdeⅠ、BamHⅠ切割.

(3)由图可知,标记基因是抗氨苄青霉素基因(Ampr).

(4)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法(或基因枪法等).在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质通常采用抗原-抗体杂交技术.

故答案为:

(1)从体细胞中分离和化学方法人工合成    启动子    脱分化、再分化

(2)识别特定的DNA序列并在特定位点切割     NdeⅠ、BamHⅠ

(3)抗氨苄青霉素基因(Ampr) 

(4)农杆菌转化(或基因枪法等)   抗原-抗体杂交

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毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关.获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图.

(1)过程①中最常用的运载工具是______

(2)在过程②中,用______处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞.在培养过程中,将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中,CO2的作用是______

(3)在过程③中,用______处理以获取更多的卵(母)细胞.成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行______处理.

(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是______.在胚胎移植前,通过______技术可获得较多胚胎.

正确答案

解:(1)将KIFⅡ基因导入目的基因的细胞内,获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的过程中采用了转基因技术,而转基因技术的原理是基因重组.由于过程①是基因表达载体的构建过程,所以该过程中最常用的运载工具是质粒.

(2)过程②为动物细胞培养过程,该过程中需用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理,使皮肤组织块分散成单个成纤维细胞.动物细胞培养需要一定的气体环境,即95%空气加5%CO2,CO2的作用是维持培养基的pH.

(3)过程③表示活体采卵,该过程中需用促性腺激素处理母羊使其超数排卵,以获取更多的卵(母)细胞,在体外培养到减数第二次分裂中期通过显微操作进行去核处理.

(4)从重组细胞到早期胚胎过程中需采用(早期)胚胎培养技术.在胚胎移植前,通过胚胎分割技术可获得较多胚胎.

故答案为:

(1)质粒 

(2)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 维持培养基的pH 

(3)促性腺激素 去核 

(4)(早期)胚胎培养 胚胎分割

解析

解:(1)将KIFⅡ基因导入目的基因的细胞内,获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的过程中采用了转基因技术,而转基因技术的原理是基因重组.由于过程①是基因表达载体的构建过程,所以该过程中最常用的运载工具是质粒.

(2)过程②为动物细胞培养过程,该过程中需用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理,使皮肤组织块分散成单个成纤维细胞.动物细胞培养需要一定的气体环境,即95%空气加5%CO2,CO2的作用是维持培养基的pH.

(3)过程③表示活体采卵,该过程中需用促性腺激素处理母羊使其超数排卵,以获取更多的卵(母)细胞,在体外培养到减数第二次分裂中期通过显微操作进行去核处理.

(4)从重组细胞到早期胚胎过程中需采用(早期)胚胎培养技术.在胚胎移植前,通过胚胎分割技术可获得较多胚胎.

故答案为:

(1)质粒 

(2)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 维持培养基的pH 

(3)促性腺激素 去核 

(4)(早期)胚胎培养 胚胎分割

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探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段,可用于核酸分子杂交以检测目标核苷酸序列是否存在.右图一是某实验小组制备的两种探针,图二是探针与目的基因杂交的示意图.请回答下列有关问题:

(1)核酸探针与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循______的原则.设计核苷酸序列是核酸探针技术关键步骤之一.图一所示的两种核酸探针(探针2只标注了部分碱基序列)都不合理,请分别说明理由____________

(2)cDNA探针是目前应用最为广泛的一种探针.制备cDNA探针时,首先需提取、分离获得______作为模板,在______的催化下合成cDNA探针.利用制备好的β-珠蛋白基因的cDNA探针与β-珠蛋白基因杂交后,出现了如图二中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构”,原因是______

(3)利用乳腺生物反应器生产α-抗胰蛋白酶,在胚胎移植前,先要从早期胚胎的______

部位取样,再利用SRY探针(Y染色体上的性别决定基因)进行检测,将检测反应呈______ (选填“阳”、“阴”)性的胚胎进行移植.

正确答案

解:(1)核酸探针是单链DNA分子,其与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循碱基互补配对的原则.图一中探针1碱基序列过短,特异性差;探针2自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效.因此这两种探针都不合理.

(2)cDNA是以mRNA为模板逆转录形成的,该过程需要逆转录酶的催化.逆转录法合成的cDNA不含内含子,而β-珠蛋白基因中含有不表达序列(或内含子),因此探针利用制备好的β-珠蛋白基因的cDNA探针与β-珠蛋白基因杂交后,出现了如图二中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构.

(3)利用乳腺生物反应器生产α-抗胰蛋白酶时,应选择雌性胚胎进行移植.所以在胚胎移植前,先要从早期胚胎的滋养层部位取样,再利用SRY探针进行检测,将检测反应呈阴性(雌性)的胚胎进行移植.

故答案:(1)碱基互补配对     探针1碱基序列过短,特异性差        

探针2自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效   

(2)mRNA  逆转录酶    β-珠蛋白基因中含有不表达序列(或内含子)   

(3)滋养层    阴

解析

解:(1)核酸探针是单链DNA分子,其与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循碱基互补配对的原则.图一中探针1碱基序列过短,特异性差;探针2自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效.因此这两种探针都不合理.

(2)cDNA是以mRNA为模板逆转录形成的,该过程需要逆转录酶的催化.逆转录法合成的cDNA不含内含子,而β-珠蛋白基因中含有不表达序列(或内含子),因此探针利用制备好的β-珠蛋白基因的cDNA探针与β-珠蛋白基因杂交后,出现了如图二中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构.

(3)利用乳腺生物反应器生产α-抗胰蛋白酶时,应选择雌性胚胎进行移植.所以在胚胎移植前,先要从早期胚胎的滋养层部位取样,再利用SRY探针进行检测,将检测反应呈阴性(雌性)的胚胎进行移植.

故答案:(1)碱基互补配对     探针1碱基序列过短,特异性差        

探针2自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效   

(2)mRNA  逆转录酶    β-珠蛋白基因中含有不表达序列(或内含子)   

(3)滋养层    阴

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毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关.获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图.

(1)过程①中最常用的运载工具是______,所需要的酶是限制酶和______

(2)在过程②中,用______处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞.在培养过程中,将成纤维细胞置于5% CO2的气体环境中,CO2的作用是______

(3)在过程③中,用______处理以获取更多的卵(母)细胞.成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行______处理.过程④常用的方法是______

(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是______.在胚胎移植前,通过______技术可获得较多胚胎.

(5)请用最恰当科学的名字给培育成功的小羊命名______

正确答案

解:(1)基因工程中,运载工具包括质粒、噬菌体及动植物病毒等,其中质粒是主要运载工具;①表示基因表达载体的构建过程,首先需要限制酶切割含有目的基因的DNA和运载体DNA,再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组质粒.

(2)胰蛋白酶可将组织块分散成单个细胞;动物细胞培养过程中需要一定的气体环境(95%氧气和5%二氧化碳),其中5%CO2的作用是维持培养基(液)的pH.

(3)要得到更多的卵(母)细胞需用促性腺激素对动物进行超数排卵处理;成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行去核处理,以保证克隆后代的遗传性状主要来自于供体核.过程④是将外源基因导入受体细胞,常用的方法是显微注射.

(4)从重组细胞到早期胚胎需要才用早期胚胎培养技术;在胚胎移植时,可通过胚胎分割技术获得更多的胚胎.

(5)由于最终获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊,所以培育成功的小羊为转基因克隆绒山羊.

故答案为:

(1)质粒 DNA连接酶

(2)胰蛋白酶或胶原蛋白酶   维持培养基的pH

(3)促性腺激素 去核    显微注射

(4)早期胚胎培养 胚胎分割

(5)转基因克隆绒山羊

解析

解:(1)基因工程中,运载工具包括质粒、噬菌体及动植物病毒等,其中质粒是主要运载工具;①表示基因表达载体的构建过程,首先需要限制酶切割含有目的基因的DNA和运载体DNA,再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组质粒.

(2)胰蛋白酶可将组织块分散成单个细胞;动物细胞培养过程中需要一定的气体环境(95%氧气和5%二氧化碳),其中5%CO2的作用是维持培养基(液)的pH.

(3)要得到更多的卵(母)细胞需用促性腺激素对动物进行超数排卵处理;成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行去核处理,以保证克隆后代的遗传性状主要来自于供体核.过程④是将外源基因导入受体细胞,常用的方法是显微注射.

(4)从重组细胞到早期胚胎需要才用早期胚胎培养技术;在胚胎移植时,可通过胚胎分割技术获得更多的胚胎.

(5)由于最终获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊,所以培育成功的小羊为转基因克隆绒山羊.

故答案为:

(1)质粒 DNA连接酶

(2)胰蛋白酶或胶原蛋白酶   维持培养基的pH

(3)促性腺激素 去核    显微注射

(4)早期胚胎培养 胚胎分割

(5)转基因克隆绒山羊

下一知识点 : 目的基因检测与鉴定
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