热门试卷

解：（1）①～③是动物细胞培养过程，需要先用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞．将目的基因导入动物细胞最有效的方法是纤维注射法；基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建．

（2）在体外受精过程中防止多精入卵的生理反应主要包括透明带反应和卵黄膜封闭作用．

（3）将早期胚胎④处理后形成若干个胚胎⑤需要采用胚胎分割技术．进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚；对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．

故答案为：

（1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）     显微注射技术    基因表达载体的构建

（2）透明带    卵细胞膜

（3）胚胎分割    桑椹胚    内细胞团均等分割

解：Ⅰ限制性核酸内切酶主要是从原核生物中分离纯化出来的，每种限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开．如图1所示是四种不同限制酶切割形成的DNA片段：其中的（2）能和（7）在DNA连接酶的作用下连接成．

Ⅱ（1）干扰素的化学本质是糖蛋白．蛋白质在核糖体中合成后需要运输、加工，并消耗能量，排出细胞．由于核糖体没有膜结构，所以在人体内参与其形成的相关具膜的细胞结构有内质网、高尔基体、细胞膜、线粒体．

（2）人的干扰素基因在酵母菌细胞内的表达过程为干扰素基因→mRNA→蛋白质，包括转录和翻译两个过程．

Ⅲ（1）PCR技术又称聚合酶链式反应，该技术的依据的原理是DNA的半保留复制；图中的变性是指模板DNA双链在高温作用下解旋形成单链．

（2）假设PCR反应中的DNA模板为P，第一轮循环的产物2个子代DNA为N1，第二轮的产物4个子代DNA为N2，由于DNA复制方式是半保留复制，则N2中分别含有模板DNA单链的DNA分别有2个．若继续循环，该DNA片段共经过30次循环后能形成230个这样的片段．

（3）若DNA分子中共含3000个碱基对，碱基数量满足：=，则A+T=3000×2×=2000，即A=T=1000．经5次循环，至少需要向试管中加入腺嘌呤脱氧核苷酸数目为（25-1）×1000=31000个．

故答案为：

Ⅰ原核生物    特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键    （7）DNA连接酶   

Ⅱ（1）糖蛋白   内质网、高尔基体、细胞膜、线粒体

（2）干扰素基因→mRNA→蛋白质（干扰素）

Ⅲ（1）DNA的半保留复制   模板DNA双链解旋形成单链

（2）2          230

（3）31000

解：（1）过程①表示基因表达载体的构建过程，需用DNA连接酶将目的基因和运载体（质粒）连接形成重组质粒．过程②表示将目的基因导入微生物细胞，需要用Ca2+处理，使其成为感受态细胞，使其易吸收周围环境中的DNA分子．

（2）图中讲目的基因导入棉花细胞的步骤包括将目的基因导入受体细胞（采用农杆菌转化法）和③将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养两个步骤．图示将目的基因导入棉花细胞的方法是农杆菌转化法，此外还可以用基因枪法和花粉管通道法．

（3）棉花细胞在含卡那霉素的培养基中无法存活，而质粒含有卡那霉素抗性基因，所以要确保试管苗中含有目的基因，可在④过程的培养基中加入卡那霉素．

（4）图示抗棉铃虫的转基因棉的获得过程涉及的生物技术包括基因工程、植物组织培养技术．

故答案为：

（1）基因表达载体的构建   Ca2+（或CaCl2）

（2）②③花粉管通道

（3）卡那霉素

（4）基因工程、植物组织培养技术

解：（1）构建基因表达载体时，需要用到同一种的限制性内切酶处理含有目的基因的外源DNA分子和运载体，以形成相同的黏性末端，再用DNA连接酶将目的基因和载体连接构成重组质粒．重组质粒上的启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，有了它能驱动基因转录出mRNA．

（2）标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，因此筛选出含重组DNA的土壤农杆菌时通常依据质粒上标记基因的表达．

（3）番茄是双子叶植物，将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法．如果要将目的基因导入动物细胞用显微注射技术．

（4）根据图形可知，mRNA1和mRNA2的结合直接阻碍了多聚半乳糖醛酸酶合成时的翻译过程．

（5）②和③过程分别是植物组织培养中的脱分化和再分化．通常需要在培养基中加入植物生长调节剂，即生长素和细胞分裂素，保证②、③过程的顺利完成．

故答案为：

（1）限制酶、DNA连接酶    构建基因表达载体  RNA聚合

（2）标记基因 

（3）农杆菌转化法     显微注射

（4）翻译

（5）生长素和细胞分裂素