热门试卷

解：（1）分析图解可知，图中通过反转录法合成目的基因，即表示采取人工合成方法获取原胰岛素目的基因的过程．因此，图中DNA是以胰岛素mRNA为模板，逆转录形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA，从而获得了所需要胰岛素基因．

（2）图中②代表的是限制性核酸内切酶，在它的作用下将质粒切出黏性末端．再以DNA连接酶连接形成重组质粒，重组质粒中除了胰岛素基因以外，还必须含有启动子，终止子和标记基因，这样才能构成一个完整的基因表达载体．

（3）图中④表示重组DNA即目的基因导入受体细胞，一般需将大肠杆菌用氯化钙处理，以增大其细胞壁的通透性，使得细胞成为感受态细胞．

故答案为：

（1）胰岛素mRNA   逆转录  胰岛素基因

（2）限制性核酸内切    黏性    DNA连接    标记基因   基因表达载体

（3）重组DNA（目的基因）导入受体细胞

解：（1）基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取②基因表达载体的构建③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测与鉴定．据图一分析可知，目的基因是人胰岛素基因．能表达出胰岛素的细胞是胰岛B细胞．

（2）由图一分析可知，目的基因是胰岛素基因，但是从图中可知，在胰岛B细胞中获取一种核酸为原料来合成胰岛素基因，是反转录法，此过程需要逆转录酶和DNA聚合酶．基因工程中受体细胞是微生物，可用一定浓度钙离子处理微生物，使其处于感受态．

（3）Tetr表示四环素抗性基因，Tetr上游有基因C，基因C的表达产物会阻断Tetr基因的表达，所以将目的基因插入基因C上破坏其结构，这样就没有阻碍Tetr基因的表达．所以可用BglⅠ、HindⅢ切割．为检测转化结果，将经第④步处理后的大肠杆菌培养液接种含有四环素培养基上，因为Tetr表示四环素抗性基因，可以表达出四环素抗性蛋白抵抗四环素，长出的菌落就是成功插入目的基因的菌落．

（4）基因工程中常选用大肠杆菌作为受体细胞，因为体积小，繁殖能力强，遗传物质相对比较少，容易培养，代谢旺盛、产量高等故答案为：

（1）获取目的基因   构建基因表达载体    将目的基因导入受体细胞   目的基因的检测与鉴定     人的胰岛B细胞

（2）逆转录酶和DNA聚合酶     感受态法（高浓度的钙离子溶液处理）

（3）BglⅠ、HindⅢ四环素

（4）繁殖能力强，容易培养，代谢旺盛、产量高等

解：（1）图1②表示基因表达载体的构建过程．

（2）运用HindⅢ与BamHI酶切目的基因与质粒，并加入DNA连接酶来构建重组质粒的方法会产生4种重组质粒，不利于筛选，为了改善上述问题，可以改用BstI或BamHI酶．

（3）由图可知，本实验选用的运载体是pBR质粒和Ti质粒，它们都是双链环状DNA分子，因此基本单位是脱氧核苷酸．

（4）A、质粒运载体作用之一是防止目的基因被核酸酶降解，A正确；

B、质粒运载体本身可以进入细胞，不一定要与目的基因重组，B错误；

C、目的基因插人质粒后，不能影响质粒运载体的复制和表达，C正确；

D、Ti质粒的T-DNA片段可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此可以协助目的基因导入植物细胞，D正确；

E、作为运载体要有限制酶的切割位点，因此没有限制酶就无法使用质粒运载体，E正确．

故选：ACDE．

故答案为：

（1）将目的基因与运载体重组

（2）该种方法会产生4种重组质粒，不利于筛选    BstI或BamH I 酶

（3）pBR质粒和Ti质粒    脱氧核苷酸

（4）ACDE

解：（1）B过程是培养并选择含有重组质粒的土壤农杆菌，其中“选择”体现了质粒作为运载体必须具备具有标记基因；“培养”体现了质粒作为运载体必须能在宿主细胞中复制并稳定保存．

（2）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用放射性同位素标记的抗虫基因作为探针．

（4）①后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1，说明此杂交方式为测交，将转基因植株与非转基因植株杂交，抗卡那霉素型为显性杂合体（Aa），卡那霉素敏感型为隐性纯合子（aa），杂交后代表现型抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1．

②抗卡那霉素型植株是显性杂合体（Aa），该类型植株自交，即Aa×Aa，后代性状分离比是抗卡那霉素型：卡那霉素敏感型=3：1．

③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占100%．

故答案为：

（1）具有标记基因  能在宿主细胞中复制并稳定保存

（2）放射性元素标记的抗虫基因

（3）①非转基因植株     ②3：1 　　③100