- 目的基因检测与鉴定
- 共1561题
回答下列有关基因表达和基因工程问题．
（1）图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．下列分析中正确的是______（多选）
A．若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，能产生2个平滑末端
B．若用限制酶MspⅠ酶切含目的基因的DNA片段，则获得的最长的DNA片段长度为788bp
C．若需将目的基因D导入图2中的质粒，应选择限制酶是BamHⅠ
D．为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，培养基上需分别添加抗生素B和抗生素A
（2）假设某基因的右侧序列是AAGCTTGAC∥TTCGAACTG，应选择下表中的______酶（填数字序号）作为内切酶．
（3）请在图3方框内画出上题酶切割后产生的两个末端的碱基序列．______
图4甲是某目的基因（4.0kb，1kb=1000对碱基）与大肠杆菌pUC18质粒（2.7kb）重组的示意图．图中Ap′是抗氨苄青霉素基因，lacZ是显色基因，其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧，其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色．（图乙中深色圆点即为蓝色菌落）
（4）图乙的培养基中含有氨苄青霉素，请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中，何种会含有重组质粒？______．
（5）现用EcoRI酶切质粒，酶切后进行电泳观察．有人说，只有出现长度为3.0kb和3.7kb的片段，才可以判断该质粒已与目的基因重组成功（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位之间的碱基对忽略不计）．你如何评价之？______．
正确答案
解：（1）A、图1DNA片段含有2个限制酶SmaⅠ的切割位点，若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，能产生4个平滑末端，A错误；
B、限制酶MspⅠ的识别序列是C↓CGG，图中DNA片段含有两个这样的识别序列，可被限制酶MspⅠ切割形成三种长度的DNA片段，即536bp、792bp、660bp，则获得的最长的DNA片段长度为792bp，B错误；
C、目的基因两侧是GGATCC序列，该序列是限制酶BamHⅠ的识别序列，因此要将质粒和目的基因D连接形成重组质粒，应选用限制酶BamHⅠ切割，C正确；
D、用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因，但没有破环抗生素B抗性基因，因此含有重组质粒的大肠杆菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，培养基上需分别添加抗生素B和抗生素A，D正确．
故选：CD．
（2）假设某基因的右侧序列是AAGCTTGAC∥TTCGAACTG，其中含有表中3酶的切割位点，因此应选择表中的3酶作为内切酶．
（3）上题酶切割后产生的两个末端的碱基序列为
图4甲是某目的基因（4.0kb，1kb=1000对碱基）与大肠杆菌pUC18质粒（2.7kb）重组的示意图．图中Ap′是抗氨苄青霉素基因，lacZ是显色基因，其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧，其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色．（图乙中深色圆点即为蓝色菌落）
（4）图乙中所出现的白色菌落中含有重组质粒，因为EcoRI将lacZ显色基因破坏了．
（5）目的基因被酶切后形成两个片段：1.0kb和3.0kb；质粒被酶切后长度不变：2.7kb．故质粒只能和目的基因片段之一发生重组，如果成功的话将会出现两种情况：3kb和3.7kb或1.0kb和5.7kb．
故答案为：
（1）CD
（2）3
（3）
（4）白色
（5）不对，因为还可能出现1.0 kb和5.7kb的结果
解析
解：（1）A、图1DNA片段含有2个限制酶SmaⅠ的切割位点，若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，能产生4个平滑末端，A错误；
B、限制酶MspⅠ的识别序列是C↓CGG，图中DNA片段含有两个这样的识别序列，可被限制酶MspⅠ切割形成三种长度的DNA片段，即536bp、792bp、660bp，则获得的最长的DNA片段长度为792bp，B错误；
C、目的基因两侧是GGATCC序列，该序列是限制酶BamHⅠ的识别序列，因此要将质粒和目的基因D连接形成重组质粒，应选用限制酶BamHⅠ切割，C正确；
D、用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因，但没有破环抗生素B抗性基因，因此含有重组质粒的大肠杆菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，培养基上需分别添加抗生素B和抗生素A，D正确．
故选：CD．
（2）假设某基因的右侧序列是AAGCTTGAC∥TTCGAACTG，其中含有表中3酶的切割位点，因此应选择表中的3酶作为内切酶．
（3）上题酶切割后产生的两个末端的碱基序列为
图4甲是某目的基因（4.0kb，1kb=1000对碱基）与大肠杆菌pUC18质粒（2.7kb）重组的示意图．图中Ap′是抗氨苄青霉素基因，lacZ是显色基因，其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧，其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色．（图乙中深色圆点即为蓝色菌落）
（4）图乙中所出现的白色菌落中含有重组质粒，因为EcoRI将lacZ显色基因破坏了．
（5）目的基因被酶切后形成两个片段：1.0kb和3.0kb；质粒被酶切后长度不变：2.7kb．故质粒只能和目的基因片段之一发生重组，如果成功的话将会出现两种情况：3kb和3.7kb或1.0kb和5.7kb．
故答案为：
（1）CD
（2）3
（3）
（4）白色
（5）不对，因为还可能出现1.0 kb和5.7kb的结果
（2015秋•江西校级期末）如图表示大肠杆菌细胞中组成核糖体的蛋白质（简称RP）的合成及调控过程． RP基因操纵元是控制核糖体蛋白质合成的DNA分子片段，RBS是核糖体结合位点．请回答下列问题：
（1）RP基因操纵元的基本组成单位是______；①过程发生的场所是______．
（2）过程②合成的RP1的多肽有一段氨基酸序列为“-丝氨酸-组氨酸-谷氨酸-”，转运丝氨酸、组氨酸和谷氨酸的tRNA上的相应碱基序列分别为AGA、GUG、CUU，则决定该氨基酸序列的基因的碱基序列为______．
（3）核糖体主要由______等物质构成，图中核糖体沿着mRNA的移动依次合成的有关物质是______等（用图中所示物质表示），当细胞中缺乏rRNA时，RP1与RBS结合，导致RBS被封闭，引起的后果是______，通过这种调节机制可以避免______．
（4）大肠杆菌细胞中的RNA，其功能有______（多选）．
A．作为遗传物质 B．传递遗传信息 C．转运氨基酸 D．构成核糖体．
正确答案
解：（1）RP基因操纵元是控制核糖体蛋白质合成的DNA分子片段，DNA的基本单位为脱氧核苷酸．图中①为转录过程，原核细胞中转录发生在拟核中．
（2）RP1中有一段氨基酸序列为“-丝氨酸-组氨酸-谷氨酸-”，它们的反密码了分别为AGA、GUG、CUU，则它们的密码子依次为UCG、CAU、CAG，根据碱基互补配对原则，则基因1中决定该氨基酸序列的模板链碱基序列为AGAGTGCTT．
（3）核糖体主要由核糖体蛋白质（RP）和rRNA（或蛋白质和rRNA或RP1、RP2、RP3和rRNA）等物质构成，看图可知：核糖体沿着mRNA的移动依次合成的物质是RP1、RP2、RP3等蛋白质；当细胞中缺乏rRNA时，RP1与RBS结合，导致RBS被封闭，引起的后果是RP1等蛋白质合成终止，进而使核糖体数目减少，通过这种调节机制可以避免细胞内物质和能量的浪费．
（4）大肠杆菌细胞中：mRNA可以传递遗传信息；tRNA可以识别密码子并转运相应的氨基酸；rRNA是组成核糖体的重要成分；作为遗传物质是DNA的功能．
故答案为：
（1）脱氧核苷酸 拟核
（2）-AGAGTGCTT-
-TCTCACGAA-
（3）核糖体蛋白质（RP）和rRNA（或蛋白质和rRNA或RP1、RP2、RP3和rRNA） RP1、RP2、RP3
RP1等蛋白质合成终止，进而使核糖体数目减少 细胞内物质和能量的浪费
（4）BCD
解析
解：（1）RP基因操纵元是控制核糖体蛋白质合成的DNA分子片段，DNA的基本单位为脱氧核苷酸．图中①为转录过程，原核细胞中转录发生在拟核中．
（2）RP1中有一段氨基酸序列为“-丝氨酸-组氨酸-谷氨酸-”，它们的反密码了分别为AGA、GUG、CUU，则它们的密码子依次为UCG、CAU、CAG，根据碱基互补配对原则，则基因1中决定该氨基酸序列的模板链碱基序列为AGAGTGCTT．
（3）核糖体主要由核糖体蛋白质（RP）和rRNA（或蛋白质和rRNA或RP1、RP2、RP3和rRNA）等物质构成，看图可知：核糖体沿着mRNA的移动依次合成的物质是RP1、RP2、RP3等蛋白质；当细胞中缺乏rRNA时，RP1与RBS结合，导致RBS被封闭，引起的后果是RP1等蛋白质合成终止，进而使核糖体数目减少，通过这种调节机制可以避免细胞内物质和能量的浪费．
（4）大肠杆菌细胞中：mRNA可以传递遗传信息；tRNA可以识别密码子并转运相应的氨基酸；rRNA是组成核糖体的重要成分；作为遗传物质是DNA的功能．
故答案为：
（1）脱氧核苷酸 拟核
（2）-AGAGTGCTT-
-TCTCACGAA-
（3）核糖体蛋白质（RP）和rRNA（或蛋白质和rRNA或RP1、RP2、RP3和rRNA） RP1、RP2、RP3
RP1等蛋白质合成终止，进而使核糖体数目减少 细胞内物质和能量的浪费
（4）BCD
如图为科学家通过基因工程方法培育转基因抗虫棉的大致过程．请据图分析回答：
（1）图中①过程需要的酶有______，图中A的组成，除了目的基因外，还必须有______和复制原点．
（2）农杆菌中的Ti质粒上T-DNA具有______的特点．图中②过程的方法称为______．
（3）目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是______，检测时常采用的方法是______．
（4）图中③过程常采用的生物技术是______，此技术首先需通过细胞的______过程，培养出______，然后经再分化形成小植株，其原理是______．
（5）图中③过程培育到______，将其包上人工种皮，可制成神奇的人工种子．
正确答案
解：（1）图中①表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒；图中A为重组质粒，其组成至少包括目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点．
（2）图中②过程采用了农杆菌转化法，其原理是：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．
（3）目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上，检测时常采用的方法是DNA分子杂交技术．
（4）图中③过程常采用植物组织培养技术，此技术首先需通过细胞的脱分化过程，培养出愈伤组织，然后经再分化形成小植株，其原理是植物细胞的全能性．
（5）人工种子是通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子．因此，图中③过程培育到胚状体（或不定芽、顶芽、腋芽），将其包上人工种皮，可制成神奇的人工种子．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶 启动子、终止子、标记基因
（2）可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上 农杆菌转化法
（3）目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上 DNA分子杂交技术
（4）植物组织培养 脱分化 愈伤组织 植物细胞的全能性
（5）胚状体（或不定芽、顶芽、腋芽）
解析
解：（1）图中①表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒；图中A为重组质粒，其组成至少包括目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点．
（2）图中②过程采用了农杆菌转化法，其原理是：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．
（3）目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上，检测时常采用的方法是DNA分子杂交技术．
（4）图中③过程常采用植物组织培养技术，此技术首先需通过细胞的脱分化过程，培养出愈伤组织，然后经再分化形成小植株，其原理是植物细胞的全能性．
（5）人工种子是通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子．因此，图中③过程培育到胚状体（或不定芽、顶芽、腋芽），将其包上人工种皮，可制成神奇的人工种子．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶 启动子、终止子、标记基因
（2）可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上 农杆菌转化法
（3）目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上 DNA分子杂交技术
（4）植物组织培养 脱分化 愈伤组织 植物细胞的全能性
（5）胚状体（或不定芽、顶芽、腋芽）
分析有关资料，回答有关遗传、基因工程问题．
油菜的株高由等位基因G和g决定，GG为高杆，Gg为中杆，gg为矮杆．B基因是另一种植物的高杆基因，B 基因与 G 基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高与这两个基因的数量正相关．如图1所示是培育转基因油菜的操作流程．请回答下列问题：
（1）步骤①中用到的工具酶是______，培育转基因油菜主要运用了转基因技术和______技术．
（2）图1中质粒是双链闭合环状的DNA分子，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离分析得如表．限制酶M和N的识别序列和切割位点如图2所示．
①该质粒的长度为______kb．在该质粒中，M酶与N酶的切割位点分别有______、______个．
②M酶与N酶切出的能相互粘连的末端在酶的作用下相互连接，请将连接的结果表示出来：______．连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割：______．
如图3所示为B基因的结构示意图以及限制酶M和N的切割位点．
③现用图3中基因作为目的基因，若采用直接从供体细胞中分离，可选用酶______来切割．
④已知Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G和C的总数共有400个，则由该区转录的mRNA中A和U总数是______．
（3）若将一个B基因转移到矮杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，且B基因与g基因位于非同源染色体上，这样的转基因油菜植株表现型为______．
（4）若将一个B基因转移到中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，培育了甲～丁四种转基因油菜（如图4所示）．
①与甲的株高相同的是______．四种转基因油菜分别自交，在不考虑交叉互换的前提下，子代有3种表现型的是______．
②另有一种转基因油菜自交子代也有3种表现型，请在如图5中的染色体上标出B基因的位置．
正确答案
解：（1）步骤①表示已经用限制酶切割后的目的基因和质粒，因此再用DNA连接酶连接形成重组DNA．培育转基因油菜首先利用转基因技术将目的基因导致受体细胞，然后利用植物组织培养技术将受体细胞培育成植株．
（2）①表格中+表示该片段的存在以及含量，用酶M切割产生了一个1.0kb的、一个5.0kb的、一个10.0kb的片段，因此则该DNA的长度为16Kb．由于质粒为环状DNA，用酶M得到3个片段，则有3个切点，用酶N得到2个片段，则有2个切点．
②M酶和N酶切割能得到相同的黏性末端，可以用DNA连接酶催化连接，连接结果见答案；当连接后，没有了两种酶的识别序列，因此两种酶不能再切割．
③从供体细胞中获得目的基因最常用的方法是一定的限制酶切割．如果选用酶M切割，将会将能指导蛋白质合成的片段破坏掉，故应选用酶N来切割．
④由于Ⅱ区阴影部分不能指导蛋白质的合成，故Ⅱ区能指导蛋白质合成的碱基数=总数（2000个）-阴影部分（800个）=1200个；该部分碱基中C和G占400个，A和T点800个，则每条链中A+T有400个，根据碱基互补配对原则，由其转录得到的RNA中有A和U为400个．
（3）若将一个B基因导入矮秆油菜，其基因型为Bbgg，故根据题意其表现型为中秆．
（4）①根据图解，甲植株同时含有G、B两个基因且两个基因都能表达，甲表现为高秆，故与甲的株高相同的有乙和丁；而丙虽说也导入了B基因，但由于B基因的导入位置在G基因的中间，其导入破坏了G基因，故丙植株只能表现出一个B基因即为中秆．四种转基因油菜分别自交（无目的基因表示为b），甲基因型为GgBb，其自交后代为1GGBB：（2GGBb+2GgBB）：（4GgBb+1GGbb+1ggBB）：（2Ggbb+2ggBb）：1ggbb=1：4：6：4：1，故甲自交后代有五种表现型；乙基因型为GgBb，但由于两对基因位于一对同源染色体上，故其自交后代为（GGbb+ggBB）：2GgBb，其自交后代只有一种表现型；丙的基因型为ggBb，其自交后代为ggBB：2ggBb：ggbb，后代共有3种表现型；丁的基因型为GgBb，其自交后代和甲一样．
②另一种转基因油菜自交后代也有三种表现型，由B基因和G基因位于同一条染色体上，二者遵循分离定律，图解见答案．
故答案为：
（1）DNA连接酶 植物组织培养
（2）①16kb； 3、2；
②
③N
④400
（3）中杆
（4）①乙和丁 丙 ②
解析
解：（1）步骤①表示已经用限制酶切割后的目的基因和质粒，因此再用DNA连接酶连接形成重组DNA．培育转基因油菜首先利用转基因技术将目的基因导致受体细胞，然后利用植物组织培养技术将受体细胞培育成植株．
（2）①表格中+表示该片段的存在以及含量，用酶M切割产生了一个1.0kb的、一个5.0kb的、一个10.0kb的片段，因此则该DNA的长度为16Kb．由于质粒为环状DNA，用酶M得到3个片段，则有3个切点，用酶N得到2个片段，则有2个切点．
②M酶和N酶切割能得到相同的黏性末端，可以用DNA连接酶催化连接，连接结果见答案；当连接后，没有了两种酶的识别序列，因此两种酶不能再切割．
③从供体细胞中获得目的基因最常用的方法是一定的限制酶切割．如果选用酶M切割，将会将能指导蛋白质合成的片段破坏掉，故应选用酶N来切割．
④由于Ⅱ区阴影部分不能指导蛋白质的合成，故Ⅱ区能指导蛋白质合成的碱基数=总数（2000个）-阴影部分（800个）=1200个；该部分碱基中C和G占400个，A和T点800个，则每条链中A+T有400个，根据碱基互补配对原则，由其转录得到的RNA中有A和U为400个．
（3）若将一个B基因导入矮秆油菜，其基因型为Bbgg，故根据题意其表现型为中秆．
（4）①根据图解，甲植株同时含有G、B两个基因且两个基因都能表达，甲表现为高秆，故与甲的株高相同的有乙和丁；而丙虽说也导入了B基因，但由于B基因的导入位置在G基因的中间，其导入破坏了G基因，故丙植株只能表现出一个B基因即为中秆．四种转基因油菜分别自交（无目的基因表示为b），甲基因型为GgBb，其自交后代为1GGBB：（2GGBb+2GgBB）：（4GgBb+1GGbb+1ggBB）：（2Ggbb+2ggBb）：1ggbb=1：4：6：4：1，故甲自交后代有五种表现型；乙基因型为GgBb，但由于两对基因位于一对同源染色体上，故其自交后代为（GGbb+ggBB）：2GgBb，其自交后代只有一种表现型；丙的基因型为ggBb，其自交后代为ggBB：2ggBb：ggbb，后代共有3种表现型；丁的基因型为GgBb，其自交后代和甲一样．
②另一种转基因油菜自交后代也有三种表现型，由B基因和G基因位于同一条染色体上，二者遵循分离定律，图解见答案．
故答案为：
（1）DNA连接酶 植物组织培养
（2）①16kb； 3、2；
②
③N
④400
（3）中杆
（4）①乙和丁 丙 ②
下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：
本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素．所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过某方法合成若干DNA片段，拼接而成，重组DNA分子可通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素．
（1）本专利是采用______方法获得目的基因．获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因是______．要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用______技术．该技术中使用的关键酶是______；原料是四种脱氧核苷酸．
（2）根据上述摘要，转基因操作时所用的载体是______，载体上的______可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．
（3）如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用______技术，再经______ 方法培养成个体．
正确答案
解：（1）根据题干信息“所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱的密码子来设计所含的密码子，通过某方法合成若干DNA片段，拼接而成”可知，本专利是采用人工合成方法获得目的基因．由于密码子具有简并性，即使基因序列不同，但其控制合成的蛋白质可以相同，因此获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同．PCR技术可以在体外大量扩增目的基因片段，PCR技术是在较高温度环境中进行的，因此该技术中使用的关键酶是热稳定性DNA聚合酶（或Taq酶）．
（2）根据题干信息“通过农杆菌介导的方法”可知，转基因操作时所用的载体是农杆菌的Ti质粒，载体上的T-DNA可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．
（3）要检测在受体细胞中是否存在目的基因，可采用DNA分子杂交技术；将转基因受体细胞培育成转基因植株，可采用植物组织培养技术．
故答案为：
（1）人工合成 密码子具有简并性，基因序列不同，蛋白质可以相同 PCR 热稳定性DNA聚合酶（或Taq酶）
（2）农杆菌的Ti质粒 T-DNA
（3）DNA分子杂交 组织培养
解析
解：（1）根据题干信息“所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱的密码子来设计所含的密码子，通过某方法合成若干DNA片段，拼接而成”可知，本专利是采用人工合成方法获得目的基因．由于密码子具有简并性，即使基因序列不同，但其控制合成的蛋白质可以相同，因此获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同．PCR技术可以在体外大量扩增目的基因片段，PCR技术是在较高温度环境中进行的，因此该技术中使用的关键酶是热稳定性DNA聚合酶（或Taq酶）．
（2）根据题干信息“通过农杆菌介导的方法”可知，转基因操作时所用的载体是农杆菌的Ti质粒，载体上的T-DNA可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．
（3）要检测在受体细胞中是否存在目的基因，可采用DNA分子杂交技术；将转基因受体细胞培育成转基因植株，可采用植物组织培养技术．
故答案为：
（1）人工合成 密码子具有简并性，基因序列不同，蛋白质可以相同 PCR 热稳定性DNA聚合酶（或Taq酶）
（2）农杆菌的Ti质粒 T-DNA
（3）DNA分子杂交 组织培养
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