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简答题

2008年诺贝尔化学奖授予了下村脩、马丁?沙尔菲、钱永健三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家,他们代表了绿色荧光蛋白研究上的三个里程碑。请结合所学知识分析回答:

材料一:下村修1962年在普林斯顿大学做研究的时候从一种水母身上分离出绿色荧光蛋白(GFP)。当时知道在蓝光或紫外光的激发下,它会发出绿色荧光。材料二科学家1992年克隆出了GFP基因,随后马丁?沙尔菲成功地让GFP基因在大肠杆菌和线虫中表达成功。之后,会发光的鼠、猪、猫、兔、蝌蚪、鱼也相继问世。下图是转基因绿色荧光鼠的培育过程:

材料三钱永健通过改造GFP基因,相继制造出了蓝色(BFP)和黃色(YFP)的荧光蛋白。

(1)为了提高实验成功率,需要通过PCR技术获得目的基因的大量拷贝。与体内DNA复制相比,PCR反应体系需加入___________种引物和____________。

(2)将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因,再将该融合基因转入真核生物细胞内,表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是______________。

A.追踪目的基因在细胞内的复制过程

B.追踪目的基因插入到染色体上的位置

C.追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布

D.追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构

(3)材料二中,过程①构建的基因表达载体的组成必需含有启动子、终止子、复制原点、___________、___________。过程④选择代孕母鼠的条件是____________________。

(4)如果将外源基因导入小鼠受精卵,则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠,有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因___________________________。

(5)材料三中,钱永健制造出蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白,这种现代生物工程技术称为__________。

正确答案

(1)2;耐热的DNA聚合酶

(2)C

(3)GFP基因;标记基因;有健康的体质和正常繁殖能力的个体

(4)外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达

(5)蛋白质工程

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简答题

2009年10月,我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程,据图回答:

(1)④过程应用的主要生物技术是_____________。

(2)杀虫基因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构,设计并人工合成的,这属于____________工程技术范畴。

(3)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(图示部分基因及部分限制酶作用位点),据图分析:

①.人工改造时,要使抗虫基因表达,还应插入_____________。

②.人工改造时用限制酶Ⅱ处理,其目的是:第一,去除质粒上的________(基因),保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于________。第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等。

③若用限制酶Ⅱ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,观察到的细胞生长的现象是_____________。

(4)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为,则该酶识别的核苷酸序列是____________。

正确答案

(1)植物组织培养   

(2)蛋白质   

(3)①.启动子   

②.tetr、tms和tmr        目的基因(或外源DNA)准确插入   

③.在含卡那霉素的培养基中能够生长,而在含四环素的培养基中不能生长   

(4)GACGTC

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简答题

下图为基因的定点诱变过程的部分过程图解,请据图回答下列问题:

(1)图中的质粒的本质是______。

(2)将定点诱变过的质粒引入细胞进行复制后,可得到____种结果,图示的三对碱基的组成分别是____、____。

(3)图示的这种对遗传物质的改造和人工诱变的区别是____。

(4)通过图示技术实现对蛋白质的改造属于____。

正确答案

(1)小型环状DNA

(2)两        

(3)人工诱变是遗传物质的不定向改变,而基因的定点诱变技术是对遗传物质的定向改变

(4)小改

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填空题

(选做题)香蕉原产热带地区,是我国南方重要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响,对香蕉生长发育影响很大。由香蕉柬顶病毒(BBTV,单链环状DNA病毒)引起的香蕉束顶病,对香蕉生产的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体,由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式,缺少遗传变异性,因此利用基因工程等现代科技手段提高其种质水平,具有重要意义。

请根据上述材料,回答下列问题:

(1)简述香蕉大规模快速繁殖技术的过程。

(2)脱毒香蕉苗的获得,可采用_______的方法,此方法的依据是_______和_______。

(3)建立可靠的BBTV检测方法可以监控脱毒香蕉苗的质量,请问可用哪些方法检测病毒的存在?(列举两种方法)

(4)在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值,该基因可以从这些鱼的DNA中扩增得到。试述在提取和纯化DNA时影响提纯效果的因素及其依据。(列举两点)

(5)如何利用arp基因,通过转基因技术获得抗寒能力提高的香蕉植株?在运用转基因香蕉的过程中,在生态安全方面可能会出现什么问题?(列举两点)

(6)从细胞工程的角度出发,简述一种培育抗寒香蕉品种的方法及其依据。另外,抑制果胶裂解酶的活性可以延长香蕉果实储藏期,请描述采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程。

正确答案

(1)选取香蕉外植体,通过诱导脱分化产生愈伤组织,然后通过调整植物激素比例,再分化形成芽和根,获得大量试管苗(或通过诱导大量形成胚状体,制成人工种子,适宜条件下萌发长成幼苗)。

(2)茎尖(分生组织)组织培养   茎尖不带病毒(或病毒在植物内分布不均匀)   植物细胞全能性

(3)①.BBTV病毒基因的检测(DNA分子杂交技术);②.BBTV病毒蛋白的检测(获得抗血清,利用抗原-抗体的杂交反应,判断病毒是否存在)。

(4)①.选择NaCl溶液的合适浓度,利用DNA和其他杂质在不同NaCl溶液中溶解度不同的特性,达到分离目的;②.加入一定量酒精,使部分蛋白质杂质溶解下酒精,与DNA分离;③.加入蛋白酶,除去蛋白质杂质的干扰;④.控制DNA提取的温度,使大多数蛋白质杂交变性。

(5)将afp基因插入土壤农杆菌的质粒,构建表达载体,通过农杆菌的转化导入香蕉受体细胞,成功转化的香蕉细胞通过组织培养形成植株。

生态安全问题包括:①.外源基因扩散到其他物种(外源基因漂移);②.转基因植株扩散影响生态系统的结构和功能;③.转基因植株扩散对生物多样性的影响;④转基因植物残体或分泌物对环境的影响

(6)体细胞杂交育种,其依据是将不同品种的香蕉体细胞利用细胞融合技术融合成杂种细胞后培育出抗寒香蕉品种(或体细胞诱变育种,其依据是利用诱变剂等方法使香蕉离体培养细胞发生基崮突变,然后筛选培育出抗寒品种)。

蛋白质工程方法的步骤为:①.果胶裂解酶蛋白的功能分析;②.果胶裂解酶蛋白的结构预测和设计;③.果胶裂解酶基因的改造。

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题型:简答题
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简答题

科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接,实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造,生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体,用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答:

(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取________,在诱导剂的作用下与骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤细胞,此细胞的特点是________、__________。与植物原生质体的融合相比,动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用________诱导融合。

(2)细胞融合是随机的过程,所以需要用__________培养基筛选,目的是选择出杂交瘤细胞。对筛选出的细胞还需进行__________培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足够数量,能产生特定抗体的杂交瘤细胞。

(3)若在体外大规模培养该细胞,首先应保证被培养的细胞处于无菌无毒的环境中,为了防止细菌的污染,所用培养液应该添加一定量的______,此外还要________,防止细胞代谢产物对细胞有影响。在培养液中提供5%CO2目的是___________。

(4)这种抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点是__________,可大量制备。临床试验上借助单克隆抗体的_________作用,将药物带到癌细胞所在位置。

(5)科学家通过基因拼接,将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因,然后导入到鼠淋巴细胞中,改造抗体属于________工程的范畴。

正确答案

(1)B淋巴细胞;在体外大量增殖;分泌特异性抗体;灭活病毒

(2)选择培养基;克隆化培养

(3)维持培养液的pH值;抗生素;定期更换培养液

(4)特异性强、灵敏度高;导向作用

(5)蛋白质

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