热门试卷

（一）分析有关微生物的资料，回答问题。（10分）

高温淀粉酶被大规模用于工业生产。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。

35.有关基因工程问题．

草甘膦是一种广谱除草剂，其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成，最终导致植物死亡．但是，它的使用有时也会影响到农作物的正常生长．目前，已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因，若将该基因转入农作物植物细胞内，从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦．

    一、

（1）如图A﹣F表示6株植物，其中，植物A和D对草甘膦敏感，B和E对草甘膦天然具有抗性，C和F则经过了转基因处理，但是否成功还未知．若A﹣C浇清水，D﹣F浇的水中含有草甘膦，上述植物中，肯定能健康成长的是_________．   

（2）限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是_____________________________________．

    如图所示的酶M和酶N是两种限制酶，图中DNA片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其它碱基的种类未作注明．

（3）酶M特异性剪切的DNA片段是，则酶N特异性剪切的DNA片段是__________。

（4）多个片段乙和多个片段丁混合在一起，用DNA连接酶拼接得到环状DNA，其中只由两个DNA片段连接成的环状DNA分子有_________种．

（5）如图A和B分别表示两段DNA序列．表格分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点．

（6）据图2：假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图中A所示，则应选择表格中酶________进行酶切；若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图中A和B所示，则应选择表中酶____________进行酶切．

（7）假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图中B所示，请在下列方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列．

    二、如图甲是目的基因EPSPS（4.0kb，1kb=1000对碱基）与pUC18质粒（2.7kb）重组的示意图．图中Ap′是抗氨苄青霉素基因，lacZ是显色基因，其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧，其控制合成某种酶能将无色染料X﹣gal变成蓝色，最终能在含无色染料X﹣gal的培养基上将含该基因的菌落染成蓝色．（图乙中深色圆点即为蓝色菌落）

（1）将处理后的目的基因EPSPS与pUC18质粒、DNA连接酶混合后，再与某菌种混合，若要从混合物中筛选出含EPSPS基因的菌株，在图乙的培养基中必须加入__________．请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中，何种颜色菌落会含有重组质粒_________．

（2）现用EcoRI酶切质粒，酶切后进行电泳观察，若出现长度为___________kb和__________kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功．（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计）．

（3）假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中，但植物F仍没有表现出抗性，分析可能的原因是________________________________________．

农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤，可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌。已知该除草剂(含氮有机物)在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明。

A　　　　　　　B　　　　　C　　　　　　D