热门试卷

解：（1）图中②为细胞融合过程，在这一过程中，常用灭活的病毒（或聚乙二醇）作诱导剂．所形成的杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质，能表现出既能无限增殖又能产生特异性抗体的特性．

（2）图中的步骤③到步骤④应该需要进行抗体阳性检测，目的是筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞．

（3）猴天花抗体最终可从细胞培养液和小鼠腹水中提取．

（4）通过上述方式生产的抗体，化学性质单一，特异性强，在生物学上被称之为单克隆抗体．

故答案为：

（1）细胞融合   灭活的病毒（或聚乙二醇）  既能无限增殖又能产生特异性抗体                   

（2）筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞

（3）细胞培养液  小鼠腹水 

（4）单克隆抗体

解：（1）将目的基因导入棉花最常用的方法是农杆菌转化法．要将D细胞培育成转基因抗虫植株E，需采用植物组织培养技术，这一过程依据的原理是植物细胞的全能性．

（2）动物细胞的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒和电刺激等．

（3）试管婴儿在试管胚胎发育到8～16个细胞时即可进行胚胎移植．

故答案为：

（1）农杆菌转化法     植物组织培养    全能性

（2）聚乙二醇      灭活的病毒

（3）胚胎移植

解：（1）向健康人体注射重复注射特定抗原（如乙肝疫苗，增加抗原数量，引起显著免疫反应，抗体是由效应B细胞分泌，参与体液免疫．

（2）效应B细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，即能分泌特异性抗体，又能无限繁殖，进而产生单克隆抗体．

（3）③至⑥流程属于转基因技术，原理是基因工程．过程⑤基因表达载体的构建需要限制性内切酶和DNA连接酶．V1基因体外扩增的技术为（聚合酶链式反应），简称PCR技术，原理是DNA复制．

（4）从题目的已知条件看，该质粒共有碱基14kb，在质粒上有MboI酶的两个切点，有EcoRV酶的一个切点，再根据二者共切后的片段分成情况，即可绘制出在质粒上两种酶的切点．

（5）根据上题切割位点，去除EcoRV酶的一个切点，则Mbol限制酶独立切割普通质粒，则可以产生的长度为8KB与6KB的DNA片段．

（6）培养基A中菌落不变，说明培养基中四环素，使得含有重组质粒和非重组质粒的受体细胞存活，则可能含有目的基因的受体细菌6个；培养基B中菌落4个，则培养基B中含有青霉素，使得重组质粒的受体细胞不能存活，含有目的基因的是2个细菌．

故答案为：（1）、增加抗原数量，引起显著免疫反应    浆细胞（效应B淋巴细胞）        体液

（2）、单克隆抗体                杂交瘤细胞

（3）、转基因技术      DNA连接酶     PCR技术    

（4）、8KB与6KB  

（5）

（6）、四环素   青霉素（青霉素和四环素）   2和6

解：（1）过程②是利用物理或化学方法（如聚乙二醇试剂）诱导原生质体融合，在此之前使需用纤维素酶和果胶酶处理细胞以除去细胞壁．在植物细胞中，高尔基体与细胞壁的形成有关．

（2）将离体的杂种细胞培育成杂种植株需要采用植物组织培养技术，该技术的原理是植物细胞具有全能性；图中④是脱分化过程，⑤是再分化过程，该过程中细胞通过有丝分裂方式增殖．

（3）“番茄--马铃薯”细胞是由番茄体细胞和马铃薯体细胞经过融合而成的，因此具有番茄和马铃薯的全部遗传物质．若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄--马铃薯”细胞内含m+n条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄--马铃薯”植株为四倍体，此杂种植株的花粉是生殖细胞，由生殖细胞直接发育而来的生物体，不管含有一个或多个染色体组，都是单倍体．

（4）如果形成c细胞的a、b细胞都是番茄细胞，则c具有番茄细胞两倍的染色体．那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是可以用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，可以使细胞中染色体数目增倍．

（5）若a、b依次为小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则c为杂交瘤细胞，能产生单克隆抗体．

故答案为：

（1）原生质体融合   高尔基体

（2）细胞的全能性   脱分化    有丝分裂

（3）m+n   单倍体

（4）用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗

（5）制备单克隆抗体

解：（1）单克隆抗体制备技术是动物细胞融合技术的应用之一，其基础是动物细胞培养．

（2）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）．在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的种类和浓度，关注培养基的渗透压和营养充沛，以保证生命活动的正常进行．

（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）．

（4）杂交瘤细胞具备骨髓瘤细胞在体外能大量增殖的特点，又具备B淋巴细胞能分泌特异性抗体的特点．

（5）淋巴细胞是骨髓中的造血干细胞分化、发育而来．

（6）由图示及限制酶E识别序列为CCGG可知，正常人的会被切成3个片段，因为正常人的该基因上有限制酶E和限制酶B的切割位点，患者的限制酶E的酶切位点消失，只有限制酶B的酶切位点，所以该基因被切除两段，长度为则被切割成长度为：290+170=460和220．如果某人的P53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，可知该人体内的一对基因中一个是正常的，一个是突变的（异常基因），因此该人的基因型是P+Pn．

故答案为：

（1）动物细胞培养

（2）筛选杂交瘤细胞   种类和数量（浓度）

（3）使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）

（4）在体外大量增殖和分泌特异性抗体

（5）骨髓     造血干

（6）3      460、220      P+Pn

解：（1）在制备单克隆抗体的过程中，需要从被特定抗原感染的机体中获得相应的浆细胞．诱导细胞融合的诱导剂有聚乙二醇或灭活的病毒．

（2）若只考虑两两细胞融合，则融合的细胞有三种：B细胞之间融合、骨髓瘤细胞之间融合及B细胞和骨髓瘤细胞之间的融合，所需还需要用选择培养基进行筛选，该培养基中只有B细胞和骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞存活，即能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞．

（3）禽流感病毒的遗传物质是RNA；制备禽流感疫苗时，可以将灭活的禽流感注射到动物体内，从血清中提取抗体即可．

（4）由于禽流感病毒的遗传物质是RNA，结构不稳定容易发生变异，且记忆细胞在体内存活的时间有限，因此人类不能彻底摆脱禽流感．

故答案为：

（1）感染病毒的动物或人   效应B    聚乙二醇（PEG）  灭活的病毒

（2）3 选择  既能无限增殖又能产生特异性抗体   杂交瘤细胞

（3）病毒的RNA  病毒的衣壳上   将禽流感病毒灭活或减毒后注入鸟类或哺乳动物体内，从这些动物血清中提取（或利用基因工程技术生产禽流感病毒的衣壳蛋白）

（4）禽流感病毒易发生变异或对禽流感病毒有免疫作用的抗体、（记忆细胞）在体内存留的时间有限

解：（1）①单克隆抗体制备过程包括获取免疫能力的效应B细胞和骨髓瘤细胞、诱导细胞融合和筛选出杂交瘤细胞、克隆化培养和抗体检测并筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞、体外或体内培养杂交瘤细胞、获取大量单克隆抗体．因此按单克隆制备过程的顺序用箭头把代表各图解的字母连接，如图可示．

②杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体．

③B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，属于动物细胞融合技术．杂交瘤细胞的培养属于动物细胞培养技术．

（2）①b连接到a上形成c的过程是基因表达载体的构建过程，此过程需要限制酶切割目的基因b和质粒a，再用DNA连接酶连接它们形成重组质粒．

②植物组织培养技术的过程：离体的抗病基因的茶花植物组织，器官或细胞（外植体） 愈伤组织  胚状体→植株（新植体）．

故答案为：

（1）①                            

②在体外大量繁殖      产生特异性抗体

③动物细胞融合      动物细胞培养

（2）①限制性核酸内切酶和DNA连接酶

②获得抗病基因的茶花细胞→脱分化→愈伤组织→再分化得到转基因金茶花