热门试卷

下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：

胰岛素 A、B 链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。 图 1 是该方法所用的基因表达载体,图2 表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B 分别表示-半乳糖苷酶与胰岛素 A、B链融合的蛋白)。 请回答下列问题:

下图表示转基因烟草的培育过程。请据图回答：

（1）图示过程将外源基因导人受体细胞的方法是________，若将外源基因导人动物细胞，目前采用最多、最有效的是________技术。

（2）为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因，携带外源基因的质粒上应有________，还应有________，以利于外源基因的表达。

（3）该过程中用到的植物细胞工程技术是________，这项技术应在________条件下进行，依据的生物学原理是________。

（4）外源基因的检测首先要采用DNA分子杂交技术检测________，其次采用分子杂交技术检测________，最后通过抗原—抗体杂交检测________。

拟南芥是遗传学研究的模式植物，某突变体可用于验证相关的基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色（TT），某突变体的种皮为黄色（tt）,下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因(Tn)功能的流程示意图。

（1）与拟南芥t基因的mRNA相比，若油菜Tn基因的mRNA中UGA变为ＡＧＡ，其末端序列成为“－ＡＧＣＧＣＧＡＣＣＡＧＡＣＵＣＵＡＡ”，则Tn比ｔ多编码___________个氨基酸（起始密码子位置相同，ＵＧＡ、ＵＡＡ为终止密码子）。

（2）图示“酶切后的基因和质粒”，其中所指酶的特点是 ________，图中①应为_______ 。

若②不能在含抗生素Ｋａｎ的培养基上生长，则原因是_______________

若③的种皮颜色为____ ，则说明油菜Tn基因与拟南芥T基因的功能相同。

（3）假设该油菜Tn基因连接到拟南芥染色体并替换其中一个t基因，则③中进行减数分裂的细胞在联会时的基因型为    _______ ；同时，③的叶片卷曲（叶片正常对叶片卷曲为显性，且与种皮性状独立遗传），用它与种皮深褐色、叶片正常的双杂合体拟南芥杂交，其后代中所占比列最小的个体表现为    _______ 、  ____    。取③的茎尖培养成16棵植珠，其性状通常  _______ （填“不变”或“改变”）。

回答关于生命结构基础的相关问题：

（1）图一中甲、乙、丙分别表示生态系统中的生产者、消费者和分解者，其中X与甲中图示生物类群的能量来源不同，X代表的生物为_________________；丙中图示生物与乙图相比，其细胞结构最主要的特点是____________。

（2）大气中的CO2在甲中图示的_________处（在a~d中选择）合成有机物，在此生理过程中，伴随的能量变化是   __________   。能合成ATP的场所是 __________（在a~d中选择）。

抗生素主要是通过干扰细菌等病原微生物的代谢过程，而影响其结构和生理功能，从而达到抑杀病原微生物的目的。（如图二）

图二

（3）从来源看，抗生素可以来源于微生物，也可以来源于动植物，如：青霉素来源于________(微生物)，它的作用是________________.

（4）欲大量大幅度提高青霉素有效含量，通常采用___________方法，得到高产菌株。若想运用基因工程、发酵工程大量获得悬铃木细胞分泌的抗生素X，请简述其操作方法：__________________

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。

下图为采用基因工程技术生产海参溶菌酶（SL）的流程。请据图回答：

（1）过程I中首先在__________作用下合成海参溶菌酶cDNA，再以cDNA为模板扩增合成SL目的基因，扩增过程中要用到具有热稳定性的_________________。

（2）过程II中要用相同的__________切割目的基因与________，再用_____________将二者连接起来，再导入大肠杆菌中，形成大肠杆菌工程菌。

（3）若要检验SL目的基因是否成功表达，可以用______________技术，若没有出现相应的杂交带。则需要用__________________做探针来检验是否转录出mRNA。

（4）已知海参溶菌酶中含145个氨基酸，则控制其合成的基因中至少含有_______个脱氧核苷酸。

（5）溶菌酶广泛存在于动物的组织、体液及分泌物中，可以破坏细菌的细胞壁，促进细菌细胞的裂解，在动物的_____________中发挥重要作用。

下图表示应用现代生物技术制备H7N9病毒单克隆抗体的流程，请回答下列问题：

（1）①过程表示_________，②过程用到的工具酶是_________。

（2）构建基因表达载体时，目的基因的首端必须含有_________，③过程常用的方法是_________，目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是_________。

（3）从分子水平上鉴定目的基因是否转录可采用_________技术，对于转基因成功

的细胞Ⅱ还要进行克隆化培养和_________检测，经多次筛选获得足够数量的该类细胞。

（4）细胞I是_________，细胞Ⅱ的特点是_________。

(s)若要预防H7N9禽流感，可用图中的_________作为疫苗。

回答下列有关基因工程问题。

图9表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图10表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。

（1）若用限制酶SmaI完全切割图9中DNA片段，其产物长度分别为__________ 。

若图9中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从隐形纯合子中分离出图9及其对应的DNA片段，用限制酶Sma I完全切割，产物中共有 ___ 种不同长度的DNA片段。

（2）为了提高试验成功率，需要通过 ______技术扩增目的基因，以获得目的基因的大量拷贝。该方法也是检测_________ 多样性的最简单方法。

（3）若将图10中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是 ________   。

（4）为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌，首先将大肠杆菌在含_______  的培养基上培养，得到如图11的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含的培养基上培养，得到如图12的结果（空圈表示与图11对照无菌落的位置）。请在图11中圈出一个含目的基因的重组质粒的大肠杆菌的菌落。

（5）在选出的大肠杆菌内基因D能成功表达的原因是 ______ 。其表达产物是一条多肽链，如考虑终止密码，则其至少含有的氧原子数为________ 。