热门试卷

解：（1）不能用皮肤细胞，过程1是从细胞中提取mRNA，这需要胰岛细胞中提取出mRNA．人体的皮肤细胞高度分化，皮肤细胞没有选择性表达出胰岛素基因的mRNA，所以不能表达出胰岛素的mRNA．

（2）过程②表示的为逆转录过程，遗传信息传递为mRNA→DNA，因此需要的酶为逆转录酶．过程③由双链DNA形成单链DNA的过程，需要解旋酶和 ATP．

（3）构建基因表达载体的过程中，必须用相同的限制酶切割A（含目的基因的外源DNA分子）和B（运载体）以产生相同的黏性末端，再加入DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成C（重组DNA分子）．

（4）由于生物个体发育过程中，基因是选择性表达的，因此细胞中的mRNA是部分基因转录形成的，则通过逆转录方法合成的目的基因只包含该生物的部分基因，这个受体菌群体就叫做这种生物的cDNA文库．

（5）基因表达载体的组成包括启动子、目的基因、终止子和标记基因．

故答案为：

（1）不能 皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA

（2）逆转录 解旋

（3）DNA连接酶

（4）cDNA

（5）启动子   标记基因

解：（1）过程①为基因表达载体的构建，需要同种限制酶对含有Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切．为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用选择培养基．

（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养的目的是让T-DNA进入棉花细胞，卡那霉素作用是筛选获得T-DNA片段的植物细胞．

（3）过程④中在培养基中增加细胞分裂素浓度可以获得大量的芽；同时芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化．

（4）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是投放棉铃虫，若棉铃虫大量死亡，说明转基因成功．种植转基因抗虫棉能减少农药的使用，以减轻环境污染．

故答案为：

（1）限制    选择

（2）T-DNA   筛选获得T-DNA片段的植物细胞

（3）细胞分裂素浓度 芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化

（4）投放棉铃虫 农药

解：（1）目的基因的获取方法一般有从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因、人工合成法．

（2）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA分子上特点．Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现了表达的过程，在基因工程中称为转化．

（3）将目的基因导入受体细胞的方法很多，图中利用了农杆菌转化法将目的基因导入棉花细胞中．

（4）一个基因表达载体的组成必须有启动子、终止子、目的基因、标记基因．

（5）目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA分子上．这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是DNA分子杂交技术．

故答案为：

（1）从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因、人工合成法

（2）可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA分子上   转化

（3）农杆菌转化法

（4）启动子、终止子、目的基因、标记基因

（5）目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA分子上 DNA分子杂交技术

解：（1）由以上分析可知，图中①为重组质粒（重组DNA分子）；质粒上含有四环素抗性基因，因此成功导入重组质粒的农杆菌能在含有四环素的培养基上生存，若②不能在含四环素的培养基上生长，则说明重组质粒未导入农杆菌．

（2）抗草胺磷基因在大豆植株内高效表达的观察指标是大豆植株对草胺磷有抗性．

（3）B表示脱分化过程，C表示再分化过程，决定植物脱分化和再分化的关键是植物激素的种类及比例，因此B和C阶段所使用的培养基中的生长素与细胞分裂素的比值不同．C→D阶段已经形成芽，芽能产生生长素促进根的生长，因此该阶段可使用不添加植物激素的培养基．

（4）从某种蛋白质的氨基酸序列出发，推断出对应的脱氧核苷酸序列，利用人工合成法获得目的基因，通过基因工程的手段，可以生产自然界中不存在的蛋白质．

A、作为基因工程的运载体，要能够在宿主细胞中复制并稳定保存，A正确；

B、一种运载体可以运载多种目的基因，B错误；

C、基因工程常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等，C正确；

D、质粒不能在宿主细胞外完成复制，D错误．

故选：AC．

（5）A、起始密码子（AUG）可知，基因M以b链为模板合成mRNA，而基因R以a链为模板合成mRNA，A错误；

B、限制酶能识别特定的核苷酸序列，并将特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键切断，B正确；

C．该DNA分子中只含有一个该限制酶的切割位点，因此用此限制酶切割后能形成2个DNA片段，每个DNA片段有2个游离的磷酸基团，因此切割后的DNA片段中共有4个游离的磷酸基团，C正确；

D．基因组测序时应该测定全部DNA序列，因此对该生物基因组测序时，图中非基因片段的序列也要检测，D正确．

故选：BCD．

故答案为：

（1）重组质粒（重组DNA分子）　重组质粒未导入（因图中显切点，不能写标记基因被破坏）

（2）大豆植株对草胺磷有抗性

（3）2个阶段培养基中生长素与细胞分裂素的比值不同  因为芽能产生生长素促进根的生长

（4）人工合成（人工方法化学合成）    AC

（5）BCD

解：（1）基因表达载体的构建过程需要限制酶和DNA连接酶参与．根据碱基互补配对原则可推测目的基因的末端序列是，故选：B．

（2）目的基因应插入启动子之后、终止子之前，图中A是复制原点、B是启动子，C是终止子，D是标记基因，所以最佳位置为3处．

（3）由于不同生物DNA分子结构基本相同，所以不同生物之间基因能够转移成功，同时说明不同生物共用一套密码子．

（4）将目的基因导入植物细胞的方法常用农杆菌转化法．检测目的基因是否导入受体细胞染色体的DNA上可采用DNA分子杂交技术．

（5）基因表达包括转录和翻译两个步骤，产物是蛋白质，故选：C．

故答案为：

（1）限制酶和DNA连接       B

（2）3

（3）不同生物DNA分子的结构基本相同      遗传密码

（4）农杆菌转化法（基因枪法、花粉管通道法）     DNA分子杂交

（5）C

解：（1）过程①表示基因表达载体的构建，该过程需要用到的工具是限制酶、DNA连接酶和运载体．检测目的基因是否插入受体细胞染色体的DNA上用DNA分子杂交技术，②导入动物细胞常用的方法是显微注射法；③过程是将受精卵培育成个体过程，涉及的技术有早期胚胎培养、胚胎移植．

（2）重组质粒包括启动子、终止子、目的基因和标记基因，在目的基因的末端必须含有终止子；③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用胚胎分割和胚胎移植技术，培育出多头相同的转基因犊牛．受体母牛在接受转人生长激素基因牛胚胎之前须经过 同期发情（激素）处理，使其具备一定的生理环境．

故答案为：

（1）限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体  DNA分子杂交    显微注射法     早期胚胎（或细胞）培养、胚胎移植

（2）（乳腺蛋白基因的）终止子     胚胎分割     胚胎移植     同期发情 （激素）

解：（1）由以上分析可知①表示获取目的基因的过程，则A为目的基因，B表示重组DNA（基因表达载体）．

（2）在目的基因的获取过程中需要利用限制酶．在基因表达载体的构建时，必需的两个基本工具是DNA连接酶和运载体．

（3）B→C为转基因绵羊的培育过程，其中④用到的生物技术主要有动物细胞培养和胚胎移植．

（4）若使用棉花的体细胞为受体细胞，将受体细胞培养成植株需要采用植物组织培养技术，该技术的原理是植物细胞具有全能性．

故答案为：

（1）目的基因    重组DNA（基因表达载体）

（2）限制酶    DNA连接酶    运载体

（3）胚胎移植

（4）植物组织培养   用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性

解：（1）细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内，原因是：①组成细菌和植物的DNA分子的空间结构和化学组成相同，②有互补的碱基序列．细菌的基因到棉花细胞内能“表达”，说明不同生物共用一套遗传密码．

（2）为在短时间内大量获得目的基因，可用PCR技术进行扩增，其原理是DNA复制．

（3）目的基因获取之后，需要进行基因工程的核心步骤，即基因表达载体的构建；其组成必须有启动子、终止子、目的基因和标记基因等．

（4）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的可转移特点．“转基因抗虫棉”抗害虫的遗传信息传递过程包括转录和翻译两个过程，可表示为抗虫基因RNA毒蛋白．

（5）上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用了农杆菌转化法，这种导入方法较经济、有效．目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA上，还需要通过检测才能知道，检测采用的方法是DNA分子杂交技术和分子杂交技术．

（6）在抗虫棉培育过程中，受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是全能性高，该过程采用的技术是植物组织培养．

故答案为：

（1）组成细菌和植物的DNA分子的空间结构和化学组成相同     不同生物共用一套遗传密码

（2）PCR技术    DNA复制

（3）基因表达载体的构建     启动子   终止子

（4）可转移       抗虫基因→RNA→毒蛋白

（5）农杆菌转化   DNA分子杂交技术   分子杂交技术

（6）全能性高        植物组织培养

解：（1）图中①表示Ti质粒上的T-DNA，其可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上；②表示Ti质粒上的标记基因，该基因便于筛选含有目的基因的受体细胞．

（2）花药离体培养可得到单倍体植株，这说明未成熟花粉具有全能性；二倍体植株形成的单倍体高度不育，只有通过染色体数目加倍才能结实，否则植株甲只有通过无性繁殖（或植物组织培养）的方式才能产生后代．

（3）与传统杂交育种相比，图示育种方法可以克服生物远缘杂交不亲和的障碍．

故答案为：

（1）T-DNA标记基因

（2）单倍体　　染色体数目加倍（秋水仙素处理）

（3）可以克服生物远缘杂交不亲和的障碍

解：（1）①过程是目的基因的获取，目的基因体外大量扩增DNA片段常用PCR技术，需要耐高温的Taq酶．

（2）②过程是构建基因表达载体，必须用同种限制酶分别切割质粒和绿色荧光蛋白基因，然后用DNA连接酶将二者拼接起来．

（3）重组质粒上包含有启动子、终止子、复制原点序列、目的基因和标记基因．

（4）10代以内的细胞一般能保持保持正常的二倍体核型，保证供体细胞正常的遗传基础，所以在核移植过程中，供体细胞一般选用培养到10代以内的转基因体细胞．

（5）动物细胞培养时，加入适宜的二氧化碳气体的目的是维持培养液的PH．

（6）对绿色荧光蛋白进行改造的方法属于蛋白质工程的范畴，直接操作的对象是DNA分子．

（7）图示的各项技术中，能够有效发挥优良母畜繁殖潜能的技术是胚胎移植．由于细胞核来自于甲兔，所以通过此技术获得的克隆兔性状与图中的甲兔最相似．

（8）图示涉及到的细胞工程技术有动物细胞培养、动物体细胞核移植等．

故答案为：

（1）PCR   Taq酶   耐高温

（2）同种限制酶      DNA连接酶

（3）目的基因   标记基因

（4）10

（5）培养液的PH

（6）蛋白质     DNA

（7）胚胎移植  甲

（8）动物细胞培养、动物体细胞核移植

解：（1）以该信使RNA为模板人工合成反义基因，合成该分子的第一条链时，使用的模板是细胞质中的信使RNA，原料是四种脱氧核苷酸，所用的酶是逆转录酶．

（2）基因在转录过程中，真核生物的基因中只有编码区的外显子编码蛋白质，因此mRNA是由外显子转录而来的．因此由信使RNA为模板人工合成反义基因中不含非编码区和内含子．通过聚合酶链式反应技术即PCR技术可实现DNA分子的体外快速扩增，所以要以完整双链反义基因克隆成百上千的反义基因，常利用PCR技术来扩增．

（5）基因工程的运输工具是运载体，基因工程中常利用质粒将目的基因导入番茄叶肉细胞原生质体．由题中“反义基因经转录产生的反义RNA与细胞原有mRNA（靶mRNA）互补形成双链RNA”可知，该基因指导合成的最终产物是反义RNA．

故答案为：

（1）脱氧核苷酸     逆转录酶

（2）不具有非编码区和内含子   PCR

（3）质粒（或病毒）   （反义）RNA

解：（1）从良种母牛采集的卵母细胞，为了使其获得受精能力，需要进行体外培养．从良种公牛采集的精子需经获能后才能进行受精作用．

（2）③表示体外受精过程，该过程中，当一个精子进入卵细胞后会激发卵子发生反应，阻止多精入卵，阻止多精入卵的两道屏障为透明带反应和卵黄膜封闭作用．

（3）将目的基因导入受精卵最常用的方法是显微注射法．获得转基因母牛后，如果牛奶中含有人凝血因子即说明目的基因已经表达．

（4）过程⑥涉及的技术是胚胎移植．

（5）对良种母牛注射促性腺激素可促使其超数排卵，并进行同期发情处理，冲卵中的“卵”是指早期胚胎．

故答案为：

（1）使卵母细胞获得受精能力        获能    

（2）防止多精入卵

（3）显微注射法      牛奶中含有人凝血因子

（4）胚胎移植

（5）注射促性腺激素  早期胚胎

解：（1）酵母菌新陈代谢的同化类型属于异养型；在培养条件适宜的情况下，它的繁殖方式是出芽生殖．

（2）图中C为目的基因和运载体（质粒）连接形成的重组DNA（重组质粒）；构建基因表达载体时，首先需用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次需用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．检测LTP1基因在啤酒酵母菌中的表达的方法是检测转基因啤酒酵母能否产生LTP1蛋白．

（3）寿命延长的调节方式属于酶活性的调节，其特点是快速、精细；如果一变异酵母菌只有在培养基中加入物质C和物质X时才能寿命延长，则说明该变异酵母菌缺少E酶．

故答案为：

（1）异养     出芽生殖

（2）重组DNA（重组质粒）      DNA限制性内切酶和DNA连接酶       检验转基因啤酒酵母能否产生LTPl蛋白

（3）酶活性  E

解：（1）图中①表示基因表达载体的构建过程；②表示动物细胞培养过程，该过程中需要胰蛋白酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于细胞培养．

 （2）利用PCR技术体外扩增let一7基因时，所需的模板DNA是指 let-7基因．目的基因扩增了5代，共得到32个DNA分子，除了含有模板DNA链的1个DNA分子外，其余的DNA分子都含有引物I，因此具有引物I的DNA所占的比例为=．

（3）检测目的基因（let一7基因）是否转录，可采用分子杂交技术，即可从细胞中提取RNA进行分子杂交；肺癌细胞增殖受到抑制的原因是：let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合，使RAS基因翻译受到抑制，引起细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞增殖受到抑制．

（4）现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制酶切开后得到仍是长度为1000bp的DNA分子，说明此DNA分子的形态为环状．

故答案为：

（1）基因表达载体的构建    胰蛋白

（2）let-7基因    

（3）RNA    RASmRNA    RAS蛋白质    翻译

（4）环状