热门试卷

取同种生物的不同类型细胞，检测其基因表达，结果如右图。

（1）基因1－8中有一个是控制核糖体蛋白质合成的基因，则该基因最有可能是基因＿＿＿。

（2）图所示细胞中功能最为近似的是细胞＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

a  ，  1与6

b  ，2与5

c   ，2与3

d ， 4与5

（3）判断图中细胞功能近似程度的依据是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（4）现欲研究基因1和基因7连接后形成的新基因的功能，导入质粒前，用限制酶切割的正确位置是＿＿＿＿＿＿＿。

（5）右上图是表达新基因用的质粒的示意图，若要将新基因插入到质粒上的A处，则切割基因时可用的限制酶是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（6）新基因与质粒重组后的DNA分子导入受体细胞的概率很小，因此需进行＿＿＿＿＿＿，才能确定受体细胞已含有目的基因。

（7）在已确定含有目的基因的受体细胞中，若质粒的抗青霉素基因后缺失了两个碱基，将这样的受体细胞接种到含有青霉素的培养基中，该细胞中可能出现的结果是＿＿＿＿＿＿＿＿＿（多选）。

a、抗青霉素基因不能转录

b、基因1和7没有表达

c、基因1和7不能连接

d、质粒上的酶切位置发生改变

图1 表示含有目的基因D 的DNA 片段长度（bp 即碱基对）和部分碱基序列，图2 表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4 种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：

（1）图1 的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 __________连接。

（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1 中DNA 片段，产生的末端是 __________末端，其产物长度为 ____________________________。

（3）若图1 中虚线方框内的碱基对被T-A 碱基对替换，那么基因D 就突变为基因d。从杂合子中分离出图1 及其对应的DNA 片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有________种不同长度的DNA 片段。

（4）若将图2 中质粒和目的基因D 通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是 __________。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌, 一般需要用添加 __________的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D 不能正确表达，其最可能的原因是 ________________________。

回答下列有关基因工程的问题。

（1）基因工程中使用的限制酶，其特点是________。

下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别位点，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。

（2）将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接，连接后获得的质粒类型有________。（可多选）

A. X-1 

B. X-2

C. X-3

D. X-4

（3）若将上图所示X-1、X-2、X-3、X-4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养基上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有______、______。

（4）如果X-1用E1酶切，产生850对碱基和3550对碱基两种片段：那么质粒X-2（Tcr基因的长度为1200对碱基）用E2酶切后的片段长度为________对碱基。

（5）若将外源的Tcr基因两端用E2切开，再与用E2切开的X-1混合连接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示，含X-4的细胞数与含X-1的细胞数之比为1：3，增大DNA连接酶用量能否提高上述比值？ ________。原因是________。

肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导人肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

请回答：

（1）进行过程①时，需用       酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为       。

（2）进行过程e委时，需用       酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

（3）研究发现，如let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取            进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中            (RASmRNA／RAS蛋白质)含最减少引起的。