- 基因工程的原理及技术
- 共249题
下图表示培育能产生人生长激素的工程菌的基本过程。
图中pBR322是大肠杆菌的一种质粒，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因；BamHI位点酶切是一种限制酶；A、B是含有特定抗生素的培养基。目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。为了筛选出运载体导入原本没有Ampr 和Tetr的大肠杆菌（受体细胞），首先将大肠杆菌培养在通用培养基上，再将其菌落原位转移到A、B培养基上培养（如图中④），得到如图结果：黑点表示菌落，A中空圈表示B的菌落在A中不能生长的位置。据此分析并回答：
（1）“pBR322”的化学本质是_______，在自然情况下可通过 ________过程进行扩增。
（2）左图中过程①表示的获得目的基因的方法是___，过程②中DNA连接酶的作用是___ 。过程③是 ________ 。
（3）根据用途，左图中A、B所用培养基属于 _______ 。所需大肠杆菌的菌落位于______上（选填“A”或“B”），理由是_______。
（4）基因工程的理论基础是中心法则，根据右图遗传信息表达可用公式(图解)表示为_______。
（5）若氨基酸的平均相对分子质量为128，则右图中以③片段为模板合成的①的相对分子质量为_______。
（6）下列是几种搭配的密码子，据此推断右图中合成的多肽，其前三个搭配的种类(按前后顺序排列)__ __。［甲硫氨酸(AUG)、甘氨酸(GGA)、丝氨酸(UCU)、酪氨酸(UAC)、精氨酸(AGA)、丙氨酸(GCU)］
正确答案
（1） DNA 自我复制
（2）从生物体细胞中分离 将目的基因与运载体结合形成重组DNA 将重组质粒导入受体细胞
（3）选择培养基 B 导入目的基因后四环素抗性基因被破坏，重组质粒中应该只含氨苄青霉素抗性基因，所以能在B存活但不能在A存活的说明含有重组质粒（合理即可）
（4）
（5） 458
（6）甲硫氨酸、丙氨酸、丝氨酸
解析
略
知识点
下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是 ( )
正确答案
解析
略
知识点
进行生物工程设计时，下表各组所选择的常用实验材料与实验目的配
正确答案
解析
略
知识点
科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组，得到的重组质粒导入牛的受精卵，使其发育为转基因牛，再通过细胞工程培育为转基因克隆牛。pBR322质粒含有两个抗生素抗性基因和5个限制酶切点(如图2)。将重组质粒导入大肠杆菌，并成功地在大肠杆菌中得以表达。请据图回答问题。
(1)图1中显示的人的生长激素基因是通过人工合成的，图中①过程需要的酶是________。该过程所依据的碱基互补配对原则是________________(用字母和箭头表示)。
(2)图1中的mRNA是从人体的哪些细胞中获取的？________________________。
(3)重组质粒形成与否需要鉴定和筛选，方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌，通过含抗生素的培养基进行培养，观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断，如图3所示：
①如果受体菌在培养基A上能生长、繁殖形成菌落，而不能在培养基B上生长、繁殖，则使用限制酶a的切点是图2中的________，即目的基因插入了________中。
②如果受体菌在培养基A上不能生长、繁殖形成菌落，而在培养基B上能生长、繁殖，则使用限制酶a的切点是图2中的________，即目的基因插入了________中。
③如果受体菌在培养基A和培养基B上都能生长、繁殖形成菌落，则使用限图2中的制酶a的切点是________。
正确答案
(1)逆转录酶； A→T、U→A、G→C、C→G
(2)垂体细胞
(3)①切点3或切点4或切点5； 抗四环素基因
②切点1 ；抗氨芐青霉素基因
③切点2
解析
略
知识点
纤维素分子因为分子量大，不能直接进入酵母细胞，并且酵母菌无法分解环境中的纤维素。为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，科学家欲将目的基因纤维素酶基因通过重组质粒导入酵母菌细胞。其所用质粒及其酶切位点如图甲，外源DNA上的纤维素酶基因及其酶切位点如图乙，根据要求回答以下问题：
作用于右图a位置的酶有__________（多选）
正确答案
BCD
解析
a是DNA分子中磷酸二酯键所在位置，DNA解旋酶作用于氢键即b处，所以A有误；DNA连接酶将目的基因与质粒链接、DNA聚合酶在DNA复制时发挥作用，都形成磷酸二酯键；限制酶在切割质粒与目的基因时伴随着磷酸二酯键的断开，所以B、C、D正确。
易错点
1、混淆同种限制酶切割目的基因与不同种限制酶切割目的基因的区别。
知识点
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