热门试卷

解：（1）人的单倍体基因组是指22条常染色体和X、Y性染色体上的基因．如果基因中一对脱氧核苷酸发生改变，由于翻译时遗传密码的简并性，所以遗传性状不一定改变．

（2）由于受精卵中的线粒体来自卵细胞，所以线粒体基因控制的性状在遗传上的主要特点是母系遗传．

（3）人的一对常染色体上存在着编码生长激素的基因，该基因的结构特点是编码区是间隔的、不连续的．由于细胞分化的实质是基因选择性表达，所以生长激素的基因只在人体的垂体能够表达，合成生长激素，促进幼体生长，因此其产物常用以治疗侏儒症．

（4）直接从生物的组织细胞或血液中获取生长激素用作药物，价格十分昂贵，现要通过改造大肠杆菌来生产药物，获取目的基因的途径是反转录法，用这种方法获得的目的基因与生物体组织细胞内的生长激素基因相比，主要差异在于不存在非编码序列．基因工程操作成功的标志是大肠杆菌产生人的生长激素．

故答案为：

（1）22条常染色体和X、Y性染色体       遗传性状改变或不变

（2）母系遗传

（3）编码区是间隔的、不连续的     垂体     侏儒症

（4）反转录法      不存在非编码序列     大肠杆菌产生人的生长激素

解：（1）在目的基因导入受体细胞的过程中，一般采用显微注射法将目的基因导入动物的受体细胞中（受精卵）．

（2）分析图解可知，图中的A过程表示将重组细胞培养成成体羊，该过程中首先要利用早期胚胎培养技术将受精卵培养为早期胚胎．然后再利用胚胎移植技术将早期胚胎移植到受体母羊的子宫中．由于只有雌性个体能够产生乳汁，因此进行A之前必须对胚胎进行DNA分析性别鉴定，以获得能够符合生产要求的个体．

（3）为了鉴定目的基因是否成功表达，必须进行抗原-抗体杂交，目的蛋白相当于抗原．

故答案为：

（1）显微注射技术

（2）早期胚胎培养    胚胎移植   　性别

（3）抗原

解：（1）基因工程中，运载工具包括质粒、噬菌体及动植物病毒等，其中质粒是主要运载工具；①表示基因表达载体的构建过程，首先需要限制酶切割含有目的基因的DNA和运载体DNA，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组质粒．

（2）胰蛋白酶可将组织块分散成单个细胞；动物细胞培养过程中需要一定的气体环境（95%氧气和5%二氧化碳），其中5%CO2的作用是维持培养基（液）的pH．

（3）要得到更多的卵（母）细胞需用促性腺激素对动物进行超数排卵处理；成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，以保证克隆后代的遗传性状主要来自于供体核．

（4）从重组细胞到早期胚胎需要才用早期胚胎培养技术；在胚胎移植时，可通过胚胎分割技术获得更多的胚胎．

故答案为：

（1）质粒      DNA 连接酶

（2）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶 ）     维持培养基（液）的pH

（3）促性腺激素（或促滤泡素，孕马血清）       去核

（4）（早期）胚胎培养       胚胎分割

解：（1）根据题干信息“所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱的密码子来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成”可知，上述基因工程操作是采用人工合成方法获得目的基因的．由于密码子具有简并性，因此获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因中编码氨基酸的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同．PCR技术可在体外大量扩增目的基因；由于PCR技术在较高的温度下进行，因此该技术中使用的关键酶是热稳定性DNA聚合酶（或Taq酶）．

（2）根据题干信息可知，该过程中采用了农杆菌转化法，其原理是农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．基因表达载体包括启动子、目的基因、标记基因和终止子．

（3）检测受体细胞中是否存在目的基因可采用DNA分子杂交技术．该技术中使用的基因探针也可以用来检测目的基因是否转录出mRNA．

故答案为：

（1）人工合成   密码子具有简并性，基因序列不同，蛋白质可以相同   PCR  热稳定性DNA聚合酶（或Taq酶）

（2）农杆菌的Ti质粒    T-DNA    ①③⑤⑥

（3）DNA分子杂交   目的基因是否转录出mRNA

解：（1）分子杂交的原理是碱基互补配对原则；β-珠蛋白基因编码区包括外显子（②④⑥）和内含子（③⑤），其中内含子（③⑤）能转录，但不能翻译，因此细胞中β-珠蛋白基因中不能翻译的序列是①③⑤⑦．

（2）转录需要RNA聚合酶的参与，该酶能识别和结合基因首端的启动子．

（3）决定β-珠蛋白基因的编码区有7000个碱基对，其中有1000个碱基对的序列不编码蛋白质，即该基因中有6000个碱基对的序列能编码蛋白质，以该序列的一条链为模板转录形成的mRNA含有6000个碱基，含有6000÷3=2000个密码子，由于终止密码子不编码氨基酸，因此该序列最多能编码1999个氨基酸．

（4）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间．

（5）PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、对干扰素基因特异的DNA引物对、TaqDNA聚合酶、4种脱氧核糖核苷酸和模板DNA．

（6）利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以扩大细胞贴壁生长的附着面积，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换．

故答案为：

（1）碱基互补配对原则    ①③⑤⑦

（2）RNA聚合酶

（3）2000    1999

（4）启动子   终止子

（5）4种脱氧核糖核苷酸    模板DNA

（6）扩大细胞贴壁生长的附着面积

解：（3）通过1→4得到4，4是目的基因，它是从鼠体直接获得的，该法属于直接从供体细胞的DNA分离基因．基因工程步骤还有因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞，和目的基因的检测与鉴定．

（4）图中3代表限制性内切酶，它将质粒和目的基因切成可互补配对的黏性末端．

故答案为：

（3）从供体细胞的DNA中直接分离基因   因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞

（4）限制性内切酶   质粒   目的基因   互补配对

解：（1）构建基因表达载体时，需先用限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子．含有相同黏性末端的DNA分子片段才能在DNA连接酶的作用下连接起来，若载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该载体连接的抗病基因分子末端是．

（2）连接DNA分子所使用的酶是DNA连接酶，切割完成并连接后得到的DNA分子称为重组DNA．

（3）由于抗病基因成功导入受体细胞的频率低，所以在转化后通常需要进行筛选操作．若该抗病基因存在，则其表达的产物是蛋白质．

（4）该科技成果在环保上的重要作用是减少农药用量，减轻环境污染．

故答案为：

（1）限制酶   A

（2）DNA连接酶 重组DNA

（3）低   筛选    C

（4）减少农药用量，减轻环境污染

解：（1）图中Ⅰ表示采用逆转录法合成cDNA，而逆转录的模板是RNA，因此①是RNA．

（2）PCR是在较高温度环境中进行操作的，因此过程Ⅱ中应用的酶是热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；利用PCR技术获取目的基因的前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成一对引物，因此PCR操作过程中，首要在大豆花叶病毒的基因文库查找的CP蛋白基因（控制CP蛋白合成的RNA片段）核苷酶序列．

（3）基因工程的操作步骤为：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达．其中，基因表达载体的构建（Ⅲ）是基因工程的核心步骤；检测目的基因是否成功表达可采用抗体-抗原杂交技术，因此为检测样液中是否含有有效成分，在Ⅵ中可使用CP蛋白的抗体进行检测．

故答案为：

（1）RNA

（2）热稳定DNA聚合酶（Taq酶）     CP蛋白基因（控制CP蛋白合成的RNA片段）

（3）ⅢCP蛋白的抗体

解：（1）图中①表示基因表达载体的构建过程，需用到的酶有限制性核酸内切酶（或限制酶）和DNA连接酶．

（2）A．继续培养过程可以用血清或淋巴液作为培养基，A正确；

B．继续培养过程应该将培养温度控制在37℃左右，B正确；

C．培养基PH值范围7.35～7.45，C错误；

D．培养过程应用了细胞增殖的原理，D错误．

本题选错误的，故选：CD．

（3）判断目的基因是否在受体细胞中转录，可用分子杂交技术来检测，从细胞中提取mRNA和用放射性同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交．根据题中信息“肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌”知，导入let-7基因后，肺癌细胞的增殖受到抑制；据图2可知，let-7基因影响RAS基因表达的机理是：let-7基因转录产物miRNA与RAS基因转录产物RAS mRNA结合，使RAS基因翻译受到抑制，引起细胞中的RAS蛋白含量减少，进而导致癌细胞增殖受到抑制．

（4）在目的基因的起始端有启动子，末端有终止子，因此转录形成的mRNA初始位置为TSS（转录起始位点），在末端位置有TTS（转录终止位点）；同时mRNA将作为蛋白质合成的直接模板，因此其中含有起始密码子和终止密码子控制翻译过程的进行，两个密码子分别位于TSS内侧和TTS内侧．故选：D．

（5）图3为DNA测序仪显示的某真核生物DNA片段一条链的碱基排列顺序图片．图3的碱基排列顺序已经解读，其顺序是：GGTTATGCGT，所以图中碱基序列应从下向上读，且由左至右的顺序依次是ACGT，所以图4中碱基序列为：GATGCGTTCG．

故答案为：

（1）限制性核酸内切酶（或限制酶）和DNA连接酶

（2）CD

（3）RNA（说明：不能具体写图2中的某种RNA----若能直接提取就没有检测的必要了）       RAS蛋白

（4）D

（5）GATGCGTTCG