热门试卷

解：（1）PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．PCR的原理是DNA复制，需要的条件包括：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．PCR扩增DNA的过程包括：高温变性、低温复性、中温延伸过程．因此，利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在Taq聚合酶的作用下延伸形成DNA．

（2）采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞后，需要利用植物组织培养技术培养该细胞，在培养再生植株的过程中，需要在培养基中加入植物激素，人为控制细胞的 脱分化和再分化．如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括生物安全、环境安全和食品安全．

（3）蛋白质工程的基本原理是：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质→推测应有的氨基酸序列→找到相应的脱氧核苷酸序列．

（4）生态工程建设的目的是遵循自然界物质循环的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止环境污染，达到经济效益和环境效益的同步发展．

故答案为：

（1）单     引物       Taq聚合

（2）脱分化   再分化     ABC

（3）空间结构     氨基酸      脱氧核苷酸    

（4）物质循环     环境污染    经济效益    环境效益

解：（1）由以上分可知①是逆转录．

（2）构建A基因重组载体时，首先需用限制性核酸内切酶切割含有A基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶连接A基因和运载体形成A基因重组载体．由过程③构建A基因重组载体，其组成除了目的基因外，还必须有启动子、终止子、标记基因以及复制原点等．

（3）过程④要检测A基因是否进入受体细胞，常用的方法是DNA分子杂交法；要检测A基因在受体细胞内是否翻译出蛋白质，需用抗原抗体杂交法．

（4）与血清抗体相比，单克隆抗体突出的优点是特异性强、灵敏度高，并能大量制备．

（5）单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的动物细胞融合和动物细胞培养两大技术．

（6）在将X进行扩大培养之前，至少需要经过两次筛选，一次是用用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；另一次是用专一抗体检测方法筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞．筛选时所用的培养基是特定的选择性培养基．

（7）举例说出基因工程培育转基因植物的过程中，微生物能起到的重要作用有工具酶的主要来源、提供目的基因、提供运载体、基因文库中的受体细胞．

（3）故答案为：

（1）逆转录

（2）DNA连接酶　终止子、标记基因

（3）DNA分子杂交　抗原抗体杂交

（4）特异性强、灵敏度高

（5）动物细胞融合　动物细胞培养

（6）能产生所需抗体的杂交瘤细胞　选择性

（7）工具酶的主要来源、提供目的基因、提供运载体、基因文库中的受体细胞（选填二项，其他合理答案也可）

解：（1）限制酶能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，产生黏性末端或平末端．

（2）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即E．coliDNA连接酶和T4DNA连接酶．

（3）逆转录过程使以mRNA为模板，通过碱基互补配对原则合成DNA的过程，若要在体外获得大量反转录产物，常采用PCR技术．

（4）基因工程中除质粒外，噬菌体和动植物病毒也可作为运载体．

（5）诱导植物细胞融合的方法有物理法和化学法，而诱导动物细胞融合的方法有物理法、化学法和生物法，生物法即用灭活的病毒处理；动物细胞融合突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能．

（6）动物胚胎发育过程中，卵裂期时期细胞数量不断增加但胚胎总体积不变． 桑椹胚时期的细胞全是全能性细胞．胚胎分割时，一般采用发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚．对于克隆人中国政府的态度是禁止生殖性克隆．

故答案为：

（1）黏性末端    平末端

（2）E．coli     T4

（3）mRNA     DNA    PCR

（4）噬菌体    动植物病毒

（5）灭活的病毒    突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能

（6）卵裂期     桑椹胚    桑椹胚或囊胚    生殖性克隆

解：（1）基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因，其中启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；标记基因便于目的基因的鉴定和筛选．

（2）两种不同酶切割之后便于相连，所产生的黏性末端必须相同．因此为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同．

（3）将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，此外还有基因枪法和花粉管通道法等．

（4）检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．

（5）基因工程常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等．

故答案为：

（1）标记基因   RNA聚合酶

（2）切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同

（3）农杆菌转化法   

（4）抗原-抗体杂交    

（5）噬菌体

解：（1）基因工程常用的载体有质粒、动植物病毒、λ噬菌体的衍生物．

（2）质粒往往要带有一个抗生素抗性基因，用于检测目的基因是否导入受体细胞．

（3）基因表达载体导入烟草细胞常用的方法是农杆菌转化法，另外还有基因枪法，花粉管通道法．

（4）转基因工程改良动植物品种，最突出的优点是按照人类的需要，定向改变生物的遗传性状．

（5）植物组织培养技术的原理是植物细胞的全能性，组织培养过程中，在培养基中要添加生长素和细胞分裂素．

故答案为：

（1）动植物病毒　λ噬菌体的衍生物

（2）检测目的基因是否导入受体细胞

（3）农杆菌转化法  基因枪法  花粉管通道法

（4）按照人类的需要，定向改变生物的遗传性状

（5）植物细胞的全能性　生长素细胞分裂素

解：（1）从肝细胞中分离出相应的RNA，经反转录（或逆转录）获得内皮抑素基因，再利用PCR技术进行体外扩增，以获得更多的目的基因．

（2）双酶切后，目的基因两端的黏性末端不同，被切开的运载体两端的黏性末端也不同，这样可以避免目的基因与载体反向连接，还能减少目的基因与目的基因、载体与载体的连接，还减少了目的基因和质粒的自身连接，提高了重组质粒的比例．

（3）大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因，LacZ基因便可表达出β半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和Xgal时，Xgal便会被β半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落．反之，则形成白色菌落．选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入的物质有IPTG、X-gal和氨苄青霉素．因为重组质粒的LacZ基因中插入了目的基因，使LacZ基因不能表达出β-半乳糖苷酶，所以成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成白色菌落．基因工程中选择大肠杆菌作为受体细胞的原因是大肠杆菌是单细胞生物，繁殖速度快，遗传物质相对较少．

（4）由表中数据可知，粗提表达产物浓度越高，活的内皮细胞数目越少，说明重组内皮抑素（或粗提表达产物）能够抑制毛细血管内皮细胞的增殖．

故答案为：

（1）反转录   PCR 

（2）反向   目的基因和运载体自身

（3）IPTG、X-gal和氨苄青霉素   白    重组质粒上的LacZ基因已被破坏而不能表达     大肠杆菌是单细胞生物，繁殖速度快，遗传物质相对较少

（4）对活细胞进行计数   内皮抑素能有效地抑制血管增生

解：（1）基因组文库包括了该种生物所有的基因，而部分基因文库只包含一种生物的部分基因，因此cDNA文库小于基因组文库．

（2）从酵母菌细胞中提取目的基因，需用到限制性核酸内切酶；以mRNA为模板合成cDNA的过程为逆转录．

（3）PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，采用该技术能在短时间内获得大量目的基因；PCR技术的原理是DNA复制．

（4）将基因表达载体导入双子叶植物细胞常用农杆菌转化法；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．目的基因整合到植物细胞的染色体上是其能在此植物体内稳定遗传的关键；检测目的基因是否整合到植物细胞的染色体上可采用DNA分子杂交技术．

（5）蛋白质工程首先要设计预期的蛋白质空间结构，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列．

故答案为：

（1）小于    

（2）限制酶    逆转录

（3）PCR    DNA复制

（4）可转移   能整合到受体细胞的染色体DNA上     DNA分子杂交

（5）蛋白质空间结构

解：（1）PCR方法扩增目的基因的过程中，需要进行高温解链过程，因此使用的DNA聚合酶具有耐高温的特性．

（2）耐高温的DNA分子中通常含有G与C碱基比例大，因为它们之间形成三个氢键，因此稳定性强．引物B中含C与G的碱基对较多，可采用较高的退火温度．

（3）多种限制酶切割，形成不同的切割位点，所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列就没有专一性要求．

（4）植物基因工程中常用农杆菌做受体细胞．

（5）据图分析，用到了EcoR I酶和Alu I酶切割抗原DNA片段产生了X、Y两个片段，而用EcoR I酶和SmaI酶切割质粒产生了 M、N两个片段，且M、N片段间存在Pst I酶切点．因此再用EcoRⅠ和PstⅠ酶切割这两片段形成的重组质粒，由于保留了Pstl的切割位点，所以可以得到两种DNA分子．而用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切重组质粒中，如图I-②过程只能产生一种DNA片断．

（6）质粒能与目的基因能够拼接其原因是它们具有共同的物质基础和结构基础，以及具有相同的黏性末端．人的干扰素基因在酵母菌体内合成了人的干扰素，说明了不同生物共用一套密码子．

故答案为：

（1）耐高温  

（2）引物对B  

（3）否  

（4）农杆菌  

（5）①2  ②1

（6）它们具有共同的物质基础和结构基础，以及具有相同的黏性末端    不同生物共用一套密码子

解：（1）过程①的DNA酶可水解DNA分子，其作用部位是磷酸二酯键；过程②的蛋白酶作用的部位是　肽键

（2）①、②两过程利用了酶的专一性，即一种酶只能催化一种或类化学反应．

（3）构建重组质粒时，需要限制酶和DNA连接酶，因此需将过程③的测序结果与限制性核酸内切酶的识别序列进行对比，以确定选用何种限制酶．

（4）RNA聚合酶能识别基因的启动子，并与之结合，从而催化基因的转录 过程．

（5）A．分离得到核糖体，用蛋白酶酶解后提取rRNA，采用了酶的专一性原理，A正确；

B．无水乙醇能溶解色素，因此提取叶绿体基粒膜上的光合色素时，要用无水乙醇处理菠菜叶片，这与生物分子间的特异性无关，B错误；

C．分子杂交手段的原理是DNA分子杂交技术，采用了DNA分子的特异性原理，C正确；

D．mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合，终止后者翻译，这是采用了核酸的特异性原理，D正确．

故选：ACD．

故答案为：

（1）磷酸二酯　肽　     

（2）专一性     　

（3）限制性核酸内切

（4）启动子　转录        

（5）ACD