热门试卷

解：（1）①过程表示目的基因的获取，如果目的基因分子量大而又不知其序列，则一般采用反转录法．

（2）重组质粒上包含有启动子、终止子、复制原点序列、目的基因和标记基因．

（3）甲兔一般选用个体发育过程中幼龄或胚胎时期的健康兔，原因是该时期兔的细胞分裂能力强，分化程度低．

（4）10代以内的细胞一般能保持保持正常的二倍体核型，保证供体细胞正常的遗传基础，所以在核移植过程中，供体细胞一般选用培养到10代以内的转基因体细胞．

（5）在⑤过程培养重组细胞时，必须模拟细胞在体内生存的良好环境和物质代谢过程，为其提供必须的营养物质、适宜的酸碱度、渗透压、温度、二氧化碳以及严格无菌、无毒条件．

（6）图示各种现代生物科技中，胚胎移植技术能有效发挥优良母畜繁殖潜能．

（7）图示各项技术中，使克隆兔能发荧光的最关键技术是转基因技术（基因工程技术）．图示涉及到的细胞工程技术有动物细胞培养、动物体细胞核移植等．

故答案为：

（1）人工合成法（反转录法）

（2）目的基因和标记基因

（3）幼龄或胚胎     分裂能力强，分化程度低

（4）10

（5）无菌、无毒

（6）胚胎移植

（7）转基因技术（基因工程技术）   核移植技术、动物细胞培养

解：（1）要培育高产奶率的转基因牛，转入外源性基因时，需要在组织特异性启动子的引导下才能启动转录和表达，如果没有相应的基因启动子，外源性基因在组织或细胞内是不会自动表达的，转入腺细胞，如果在外源性基因（如生长激素基因）的前面没有合适的乳腺特异表达启动子，那么生长激素基因就不会在乳腺细胞内转录和表达．

（2）动物血清可以提供生长因子，血清中的有些物质也可以提供碳源和氮源；恒温箱中加入CO2可以调节细胞培养液的PH．

故答案为：

（1）生长激素基因      启动子    

（2）动物血清      调节细胞培养液的pH

解：（1）荧光素酶基因可以人工合成、从基因文库中获取、利用PCR技术扩增．利用PCR技术扩增荧光素酶基因是利用DNA复制的原理．

（2）限制酶具有特异性，是切割DNA的工具酶，主要从微生物中分离纯化出来．要获得目的基因必须在目的基因的两侧相应的酶切位点进行切割，图1中可以看出，BamHⅠ的酶切位点在目的基因的中间，故不可取；SmaⅠ的酶切位点只有一个，故不可取；根据表格可以看出，MboⅠ的识别序列中含有MspⅠ的识别序列，因此要获得目的基因可用限制酶MspⅠ切割．

故答案为：

（1）基因文库    DNA复制

（2）微生物    Msp1

解：（1）图中②是以mRNA为模板合成DNA的逆转录过程，需要逆转录酶的参与．

（2）①是获取胰岛素mRNA的过程，由于基因是选择性表达的，人的肝细胞中不转录出胰岛素mRNA，因此不能利用人的肝细胞来完成①过程．

（3）⑧是将目的基因导入受体细胞的过程，当受体细胞是微生物细胞时，常采用感受态细胞法，即用CaCl2处理微生物细胞使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞，从而将目的基因导入受体细胞．D为受体细胞，一般选用大肠杆菌或枯草杆菌，原因是它们繁殖速度快，目的基因表达迅速．

（4）检测目的基因是否表达产生相应的蛋白质可采用抗原-抗体杂交法．

（5）基因表达载体含有启动子、目的基因、终止子、复制原点和标记基因．

（6）现研究发现糖尿病发生的根本原因是基因突变，因此根治糖尿病的最佳方法是基因治疗．

故答案为：

（1）逆转录

（2）不能皮肤细胞中的胰岛素基因不表达，不能形成胰岛素mRNA

（3）CaCl2 （Ca2+）     繁殖速度快，目的基因表达迅速

（4）抗原-抗体杂交

（5）标记基因

（6）基因治疗

解：（1）胚胎干细胞可来自早期胚胎（囊胚期的内细胞团）或胎儿的原始性腺细胞．

（2）上述过程中主要应用的动物细胞工程技术有动物细胞培养、细胞核移植．

（3）细胞分化的根本原因是基因的执行情况不同（或基因选择性表达）．

（4）骨髓移植治疗的实质是将造血干细胞移植到患者体内．

（5）动物细胞培养时，培养基中通常需要加入动物血清等天然成分，培养过程中所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是维持培养液的pH．

（6）基因工程中，将目的基因导入动物最有效的方法是显微注射法；构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以传给下一代，同时，使目的基因能够发挥作用．

故答案为：

（1）内细胞团　原始性腺细胞

（2）动物细胞培养　细胞核移植

（3）基因的执行情况不同（或基因选择性表达）

（4）造血干细胞

（5）动物血清　O2和CO2

（6）显微注射法　使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以传给下一代，同时，使目的基因能够发挥作用

解：（1）分析图解可知，图中将ADA基因整合到逆转录病毒的核酸中，因此该过程中用到的运载体是逆转录病毒．

（2）作为运载体必须具备的条件：①能在宿主细胞中稳定存在并复制；②要具有一个或多个限制酶的切割位点；③要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．故选ABC．

（3）检测ADA基因在血细胞中是否转录的方法是分子杂交技术．

（4）原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到40～50代．因此血细胞培养过程中要选择10代以内的细胞，以保持正常的二倍体核型，保证供体细胞正常的遗传基础．

（5）图中的治疗方法是体外基因治疗法．

故答案为：

（1）逆转录病毒

（2）ABC

（3）分子杂交技术

（4）10    正常的二倍体核型，保证供体细胞正常的遗传基础

（5）体外

解：（1）培育“乳腺反应器”动物的一个重要环节是获得控制特定药物合成的目的基因．获得人α-抗胰蛋白酶基因的常用方法是从人的细胞获得控制α-抗胰蛋白酶合成的mRNA，然后在逆转录酶的催化作用下合成α-抗胰蛋白酶基因，经过PCR技术获得大量α-抗胰蛋白酶基因．

（2）科学家将外源基因导入绵羊的受精卵中，常用的方法是显微注射由于外源基因可能随机插入到受精卵的DNA中，外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达，因而有时会导致早期胚胎死亡．

（3）从早期胚胎或原始性腺分离出来的一类体积小、核大具有发育的全能性的细胞是胚胎干细胞（ES或EK细胞）．

（4）若要获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到桑椹期或囊胚期阶段的早期胚胎进行胚胎分割处理，经过“最后一道工序”胚胎移植，植入到受体母绵羊体内．

（5）我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究，可以减少农药、杀虫剂的使用，这将对环境保护起到重要作用．生态工程所遵循的基本原理有物质循环再生、整体性、物种多样性、协调与平衡与系统学和工程学原理等原理．

故答案为：

（1）逆转录             PCR

（2）显微注射          外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达

（3）胚胎干细胞（ES或EK细胞）

（4）胚胎分割         胚胎移植

（5）环境保护         物种多样性        协调与平衡

解：（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR法从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因．在上述引物设计时，分别在引物中加入如图甲所示酶的识别序列，这样可以用ClaⅠ限制酶和DNA连接酶处理两个基因后，得到A、D端相连的融合基因．

（2）将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的T-DNA中，构建表达载体即重组质粒并导入农杆菌中．将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液．

（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞，进一步筛选后获得转基因油菜细胞．该细胞通过植物组织培养技术，可培育成转基因油菜植株．

（4）提取上述转基因油菜的mRNA，在逆转录酶的作用下获得cDNA，再依据融合基因的DNA片段设计引物进行扩增，对扩增结果进行检测，可判断融合基因是否完成转录．

故答案为：

（1）PCR    ClaⅠ（限制酶）和DNA连接   A、D

（2）表达载体（或“重组质粒”）    四环素      液体

（3）利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞

（4）逆转录    融合基因     转录

解：（1）将目的基因（淀粉酶基因）切割下来所用的工具是限制酶，将淀粉酶基因和运载体连接起来需要DNA连接酶，之后将重组DNA分子导入受体细胞，以完成工程菌的构建．

（2）检测目的基因是否导入受体细胞，可采用DNA分子杂交技术；要鉴定目的基因是否翻译成蛋白质，可采用抗原抗体杂交技术；因为该工程菌产生的淀粉酶可分泌至培养基，水解淀粉后的区域，遇碘不再变蓝色，产生透明圈．所以也可以通过检测淀粉酶活性来检测目的基因是否翻译成蛋白质，即将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液检验，并检验工程菌菌落周围是否出现透明圈．

（3）运载体通常用动植物病毒和质粒，质粒通常为小型环状的DNA分子．

（4）重组DNA分子受体细胞的机率比较小，对是否导入和表达还需要进行检测．

（5）大肠杆菌是原核生物，只有核糖体，只能将氨基酸合成为多肽；而酵母菌是真核生物，含有多种细胞器，可合成一定空间结构的蛋白质，两者中生产的蛋白质的氨基酸序列是相同的．；说明所有的生物共用一套密码子．

故答案为：

（1）限制酶（限制性内切酶） DNA连接酶 导入受体细胞

（2）DNA分子杂交技术   抗原-抗体杂交或淀粉酶活性   会

（3）质粒  小型环状（双链环状、环状）  

（4）低  筛选 

（5）相同  所有的生物共用一套密码子