热门试卷

解：（1）免疫球蛋白（抗体）基因只能在浆细胞中表达，因此通常从浆细胞中获取免疫球蛋白的mRNA，经过反转录形成目的基因（免疫球蛋白基因），进而从cDNA文库中获得．

（2）在基因工程中，将目的基因导入受体细胞前首先要构建基因表达载体；培育转基因动物时，常以受精卵作为受体细胞，因为受精卵的全能性最高．

（3）对囊胚进行胚胎分割时，应该将内细胞团进行均等分割，即图2中的B；胚胎移植的最佳时期是桑椹胚或囊胚期．

（4）检测目的基因是否导入受体细胞，应采用DNA分子杂交技术；若己确认目的基因成功导入受体细胞，则应该继续检测是否转录出了相应的mRNA．

故答案为：

（1）浆   cDNA 

（2）构建基因表达载体        受精卵

（3）B        桑椹胚期或囊胚期

（4）DNA分子杂交     转录出了免疫球蛋白的mRNA

解：（1）蛋白酶抑制剂基因表达的蛋白酶抑制剂能阻断或降低蛋白酶的活性，使昆虫不能正常消化食物中的蛋白质，还会引起害虫的厌食反应，而生长素诱导基因表达的产物对害虫无作用．所以要获得抗虫草莓可选择蛋白酶抑制剂基因作为目的基因．

（2）图中I过程表示将目的基因导入草莓细胞，常用的方法是农杆菌转化法．

（3）过程II可采用的方法有：①杂交（或有性生殖）；②先用花药离体培养分别获得二倍体抗虫草莓和四倍体凤梨草莓，再用植物体细胞杂交技术获得同时具凤梨风味和抗虫特性的六倍体草莓．

（4）据题意分析可知，具凤梨风味和抗虫的草莓新品系可以减数分裂产生配子，故其可育．

故答案为：

（1）蛋白酶抑制剂基因

（2）农杆菌转化法（或花粉管通道法）

（3）①杂交（或有性生殖）②先用花药离体培养分别获得二倍体抗虫草莓和四倍体凤梨草莓，再用植物体细胞杂交技术获得同时具凤梨风味和抗虫特性的六倍体草莓

（4）可育

解：（1）检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交（或核酸探针）技术．

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵．图中早期胚胎可用人工方法从羊输卵管内获得，该过程称为冲卵（或冲胚）； 也可从羊体内取出卵子，通

过体外受精（或核移植） 后进行早期胚胎培养获得． 第5天右以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎囊胚期开始的标志．

（3）利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的全能性．图中早期胚胎通过胚胎移植技术移入代孕母羊子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用冷冻（或低温）方法保存．

（4）胚胎干细胞（ES）可由早期胚胎或者原始性腺中分离培养获得的一类细胞．

故答案为：

（1）DNA分子杂交（或核酸探针）

（2）超数排卵   冲卵（或冲胚）  体外受精（或核移植）  囊胚

（3）胚胎分割  冷冻（或低温）

（4）早期胚胎或者原始性腺

解：（1）目的基因主要是指编码蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用的因子．由于目的基因是DNA的片段，所以在目的基因的一条链上，相邻的两个碱基之间依次由脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接．

（2）由于E•coliDNA连接酶只能连接双链DNA的黏性末端，而T4DNA连接酶既可以连接双链DNA的黏性末端，又可以“缝合”双链DNA的齐平末端，所以若用E•coli DNA连接酶进行连接，则可以得到1种重组质粒；若用T4DNA连接酶进行连接，则可以得到2种重组质粒．

（3）要使目的基因在受体细胞中，能正常表达和发挥作用，表达载体必须具备的结构是启动子、终止子，此外还有目的基因和标记基因．

故答案为：

（1）编码蛋白质的基因  脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖

（2）1   2

（3）启动子、终止子

解：（1）基因组文库包括了该种生物所有的基因，而部分基因文库只包含一种生物的部分基因，因此cDNA文库小于基因组文库．

（2）从酵母菌细胞中提取目的基因，需用到限制性核酸内切酶；以mRNA为模板合成cDNA的过程为逆转录．

（3）PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术．采用该技术能在短时间内获得大量目的基因．

（4）将基因表达载体导入双子叶植物细胞常用农杆菌转化法．

故答案为：

（1）小于

（2）限制酶 逆转录

（3）PCR技术

（4）农杆菌转化法

解：（1）在此转基因工程中，实现了将荧光素酶基因导入到大肠杆菌体内，并在大肠杆菌体内产生荧光素酶，因此目的基因是荧光素酶基因．获取目的基因的主要途径包括：人工合成．

（2）作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．故选：ABD．

（3）将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法，即用Ca2+处理大肠杆菌，使大肠杆菌处于能够吸收周围DNA分子的感受态．

（4）根瘤菌是原核生物，细胞内的固氮菌基因的编码区是连续的，而荧火虫是真核生物，细胞内的荧光素酶基因的编码区是间断的．

（5）与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点有目的明确、培育周期短、可以克服远缘杂交的不亲和性等．

故答案为：

（1）荧光素酶基因     直接提取和人工合成法   

（2）ABD

（3）CaCl2     以增大细胞壁的通透性，使重组基因能够导入到受体细胞内 

（4）固氮菌基因的编码区是连续的，而荧光素酶基因的编码区是间断的 

（5）目的明确、培育周期短、可以克服远缘杂交的不亲和性

解：（1）目的基因转入动物细胞最有效的方法是显微注射法；培育转基因动物时，通常选用受精卵作为受体细胞，因为受精卵的全能性最高．基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分；检测细胞中是否已经导入了目的基因，应采用DNA分子杂交技术．

（2）在哺乳动物的核移植实验中，一般通过电脉冲（或电刺激）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育；胚胎移植时，需要将胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段．

（3）利用细胞质遗传特点，将目的基因导入到叶绿体或线粒体基因组中，就可以避免转基因抗虫棉所携带的目的基因通过花粉传递给近缘物种，造成基因污染．

故答案为：

（1）显微注射法    受精卵    启动子    终止子    DNA分子杂交

（2）电脉冲（或电刺激）     桑椹胚或囊胚

（3）将目的基因导入到叶绿体或线粒体基因组中

解：（1）据图示可知，过程①表示基因表达载体的构建．若限制酶切出了平末端，要选择T4DNA连接酶进行连接．

（2）转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程；故目的基因通过过程②进入农杆菌细胞内，并在农杆菌细胞内维持稳定和表达的过程称为转化．

（3）将目的基因进入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，故将乙肝表面抗原基因导入烟草细胞的方法称为农杆菌转化法．

（4）检测乙肝表面抗原基因是否翻译出乙肝抗原蛋白，方法是抗原-抗体杂交．

故答案为：

（1）构建基因表达载体      T4DNA连接酶

（2）转化

（3）农杆菌转化法

（4）抗原-抗体杂交

解：（1）图5中形成A粘性末端的限制酶的识别序列为GAATTC∥CTTAAG，形成B粘性末端的限制酶的识别序列为CAATTG∥GTTAAC，形成C粘性末端的限制酶的识别序列为GTTAAC∥CAATTG，形成D粘性末端的限制酶的识别序列为CTTAAG∥GAATTC，由此可见，图5中A-D所示的黏性末端是由4种限制性内切酶作用产生的，其中A所示粘性末端为用EcoRⅠ酶（识别序列为GAATTC∥CTTAAG）切后所得．

（2）限制酶的作用位点是磷酸二酯健，即图4中a处；限制酶具有特异性，即特异性的识别并切割DNA．如同时用EcoRⅠ和HindⅢ酶切外源DNA，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是9（若只切开左侧的EcoRⅠ酶的切割位点，则能形成2种不同长度的DNA片段；若只切开HindⅢ酶的切割位点，则能形成2种不同长度的DNA片段；若只切开右侧的EcoRⅠ酶的切割位点，则能形成2种不同长度的DNA片段；若只切开左侧EcoRⅠ酶和HindⅢ酶的切割位点，则能形成3种不同长度的DNA片段，其中有2种长度之前已经出现过；若只切开右侧EcoRⅠ酶和HindⅢ酶的切割位点，则能形成3种不同长度的DNA片段，其中有2种长度之前已经出现过；若只切开左侧EcoRⅠ酶和右侧EcoRⅠ酶的切割位点，则能形成3种不同长度的DNA片段，其中有2种长度之前已经出现过）．

（3）构建重组质粒时，如同时使用EcoRⅠ和HindⅢ酶，则可以形成2种重组质粒（一种含有目的基因，另一种不含目的基因）．

（4）如图2耐盐基因的片段序列可控制合成“-脯氨酸-谷氨酸-谷氨酸-赖氨酸-”的氨基酸序列，则根据其密码子序列CC_GA_GA_AA_可知其转录的模板链是②链．

（5）将导入目的基因的水稻细胞培养成植株还需要利用植物组织培养技术，该技术的核心是脱分化和再分化．

（6）探针是被标记的目的基因的单链，因此为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的耐盐基因（目的基因）作探针进行分子杂交检测，又要用一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性．

故答案为：

（1）4      A

（2）a    特异性的识别并切割DNA     9

（3）2

（4）②

（5）植物组织培养      脱分化（去分化）     再分化

（6）耐盐基因（目的基因）        一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）