热门试卷

解：（1）动物细胞培养所需要的条件是：95%空气和5%CO2气体环境、适宜温度（37℃）和PH、无毒无菌的环境及合适的营养成分，其培养基中通常需加入血清、血浆等一些天然成分；图中②mRNA→cDNA，表示逆转录过程．

（2）构建基因表达载体时先用限制酶切割让质粒和目的基因的磷酸二酯键获得相同的黏性末端，然后在DNA连接酶的作用下重新组合：基因表达载体必须具备启动子、目的基因、终止子和标记基因等结构．

（3）根据目的基因IL-2cDNA的两端的酶切位点分别是EcoRⅠ和BglⅡ，所以表达载体1也必须有这两个酶切位点，表达载体1上已有EcoRⅠ，推测位点a应含有BglⅡ．

（4）胚胎移植时发情期母牛子宫对外来胚胎基本上不发生避免排异反应反应；通过胚胎分割技术获得两个相同的胚胎，需要将内细胞团均等分割．

故答案为：（1）37   95%空气和5%CO2    逆转录

（2）限制酶   终止子和标记基因

（3）a

（4）避免排异反应（或避免免疫排斥）内细胞团均等分割

解：（1）来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此通过试管动物技术培养发育为早期胚胎后，再经胚胎分割和胚胎移植能产生多个基因型相同的后代．

（2）胚胎移植时，需要用促性腺激素对受体进行同期发情处理，使受体处于与供体相同的生理状况，从而提供胚胎移植的成功率；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能．

（3）胚胎移植的优势在于供体的职责变为只提供优良的胚胎，繁重而漫长的妊娠和育仔的任务由受体承担．（4）在制备乳腺生物反应器的过程中，用限制酶和DNA连接酶将生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物的受精卵中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物．以上过程采用了基因工程技术，其核心步骤是基因表达载体的构建．

故答案：（1）胚胎分割和胚胎移植

（2）同期发情处理    免疫排斥

（3）只提供优良的胚胎

（4）限制酶和DNA连接酶   乳腺蛋白   显微注射  基因表达载体的构建

解：（1）图中①分别是供体细胞的细胞核，②所示内细胞团，因为这些细胞还未分化，具有全能性，可以定向诱导分化成各类细胞、组织、器官．

（2）动物细胞体外培养所需营养与体内基本相同，由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，因此，在因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清、血浆等一些天然成分．

（3）在体细胞培养过程中，要将培养瓶置于CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH．要保证培养液处于无菌、无毒的环境，应采取的措施是：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，此外，还应定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害．

（4）卵母细胞在MⅡ中期第一极体和细胞核靠的很近，当去核的时候（去核的卵细胞）可以把第一极体一块去掉，这样细胞就不会再分裂．

（5）通常用内细胞团做受体，原因是内细胞团具有发育的全能性，可以向不同类型的组织细胞分化．

（6）移植的胚胎有可能在母体的子宫内发育成正常的胎儿，说明供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，禁止生殖性克隆人是我国政府对克隆人的态度．

故答案为：（1）细胞核　　内细胞团

（2）血清（或血浆）

（3）维持培养液的pH     一定量的抗生素    定期更换培养液

（4）MⅡ中

（5）发育的全能性

（6）生理和组织   禁止生殖性克隆人（类似答案酌情给分）

解：（1）以编码病毒抗原蛋白的RNA为模板合成目的基因DNA的过程称为逆转录，此过程需要逆转录酶．将目的基因导人微生物细胞时，需用Ca2+离子处理受体细胞，使受体细胞变成感受态细胞．抗原蛋白具有抗原性无感染性，因此将抗原蛋白注射入人体后，可引起机体产生体液免疫．

（2）第三代疫苗即“DNA疫苗”，该“DNA疫苗”要产生抗原蛋白需要经过转录和翻译的过程，并且易储存．而第二代疫苗就是抗原蛋白，由于蛋白质更容易发生结构改变（变性）而失去功能，不易储存．

（3）DNA疫苗研制的动物试验中，要遵循单一变量原则．实验的自变量为是否注射含DNA疫苗的生理盐水，其它无关变量如生理条件（体重、年龄等）要保持相似、注射试剂的量相同，实验的因变量为抗体的含量．多次测定抗体含量后需计算每组的平均值．图中曲线看出，注射适量含DNA疫苗的生理盐水的小鼠体内抗体含量高，因此实验结果表明DNA疫苗能引起小鼠产生体液免疫应答．

故答案为：

（1）逆转录     Ca2+离子（CaCl2）   （体液）免疫应答    

（2）表达（转录和翻译）    更容易发生结构改变（变性）而失去功能 

（3）生理条件（体重、年龄等）相似    适量含DNA疫苗的生理盐水     抗体含量    平均值    DNA疫苗能引起小鼠产生体液免疫应答

解：（1）生物的富集作用又叫生物浓缩，是指生物体通过对环境中某些元素或难以分解的化合物的积累，并通过食物链在生物间传递，并且浓度逐步增高．

（2）在应用植物修复技术治理签发污染的土壤时，需选择符合要求的植物，这遵循了生态工程的协调与平衡原理．细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，有机酸存在于液泡中的细胞液中，细胞内的生物膜把细胞分隔成一个个小的，这样就使得细胞内能够同时进行多种化学反应，而不会相互干扰，保证了细胞的生命活动高效、有序地进行．对此类植物要及时收割，否则，植物体内的重金城可能通过落叶等途径重返土壤中．

（3）由于大部分物种的基因分子结构都双螺旋结构所以不同物种的基因能拼接在一起；检测目的基因成功导入植物细胞可采用的生物技术是DNA分子杂交技术，DNA-RNA分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术．单独地含有目的基因的植物细胞培养成植株需要应用植物组织培养技术，该技术的理论依据是细胞的全能性．

故答案为：

（1）食物链  

（2）协调与平衡原理    纤维素（或果胶）     生物膜    落叶

（3）双螺旋   DNA分子杂交技术     植物组织培养

解：（1）基因表达载体包含目的基因、启动子、终止子和标记基因等．②表示将目的基因导入动物细胞，常采用显微注射法技术．

（2）早期胚胎培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用胚胎分割技术，培育出多头相同的转基因牛犊．胚胎移植之前，受体母牛须经过促性腺激素处理达到同期发情，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境．

（3）与叶肉细胞相比较，愈伤组织的全能性更高，可作为抗虫棉培育过程中受体细胞；⑤表示植物组织培养技术，要确定抗虫基因导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，在个体水平上的鉴定方法是抗虫接种实验，即用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性．

故答案为：（1）标记基因  显微注射法

（2）胚胎分割  促性腺   同期发情

（3）全能性更高   植物组织培养技术   抗虫接种实验

解：（1）获得抗虫基因的常用方法是从基因文库中获取．PCR技术可以大量扩增目的基因．获取人胰岛素基因还可通过反转录（或DNA合成仪）法进行人工合成．

（2）Ca2+处理大肠杆菌，增大细胞壁的通透性，使大肠杆菌变成感受态细胞．大肠杆菌是原核生物，只有一种细胞器--核糖体，没有内质网及高尔基体，对蛋白质不能进一步加工．

（3）利用基因工程生产单克隆抗体时，一般采用显微注射技术将无限增殖基因导入浆细胞（或已免疫的B淋巴细胞）中，然后进行克隆化培养和专一抗体检测筛选出分泌所需抗体的特定细胞进行扩大培养，进而提取单克隆抗体．

（4）单克隆抗体还可以通过培养由浆细胞和骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞进行大量制备．将动物细胞融合常用的诱导剂是灭活的病毒和PEG．

故答案为：

（1）从基因文库中获取      PCR技术    反转录（或DNA合成仪）

（2）Ca2+   原核细胞没有内质网及高尔基体，对蛋白质不能进一步加工

（3）显微注射   浆细胞（或已免疫的B淋巴细胞）  克隆化培养   专一抗体检测

（4）浆细胞和骨髓瘤细胞

（ 1 ） 黄曲霉毒素B1（AFB1）是化学物质，AFB1属于化学类致癌因子．

（ 2 ） AFB1能结合在DNA的G上．使该位点受损伤变为G，在间期DNA复制中，G‘会与A配对．现有受损伤部位的序列，经一次复制后，变为序列，再经一次复制后变序列，因此，该序列经两次复制后突变为．

（3）①过程Ⅰ提取总RNA，应选择甲菌液的细胞，理由是甲菌液细胞中含AFB1解毒酶，意味着完成了基因的表达，转录出了mRNA，而乙菌液细胞中不含AFB1解毒酶，未发生转录，所以应选择甲菌液的细胞提取总RNA．

②过程Ⅱ中以RNA为原料合成cDNA，原料是脱氧核苷酸，需DNA聚合酶．

③AFB1解毒酶的化学本质是蛋白质，则表达场所是酵母菌核糖体．

故答案为：

（ 1 ）化学

（ 2 ）

（3）①甲   因为甲菌液细胞含解毒酶，意味着完成了基因的表达，所以应选择甲菌液的细胞提取总RNA

②RNA  DNA聚合酶．

③核糖体

：（1）玉米和水稻是不同的物种，存在生殖隔离，随意不能杂交．

（2）基因工程中使用到的酶为限制性核酸内切酶、DNA连接酶，根据碱基互补配对原则补充DNA片段，在根据限制酶的特点画出粘性末端．

（3）标记基因存在的作用便于筛选含目的基因的受体细胞．

（4）凡是影响转录或翻译的因素都可能会影响PEPC基因的表达．影响其表达的原因有：水稻中缺乏合成PEPC的氨基酸、PEPC基因受到水稻基因组中相邻基因的影响、整合到水稻基因组中的PEPC基因被水稻的某种酶破坏了．所有生物都共用一套密码子，排除A；参与蛋白质合成的氨基酸大约有20种，缺乏合成PEPC的氨基酸可能性有但比较小，排除B；PEPC基因在水稻细胞中以前没有，所以水稻细胞中存在破坏它的酶可能有，但可能性也不大，排除D；可能性最大的就是受到水稻基因组中相邻基因的影响，故选C．

（5）PEPC基因在水稻细胞中成功表达的标志是在水稻细胞中合成磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶．

（6）由细胞得到完整植株，要利用细胞的全能性，所以应该用组织培养的方法．

（7）转基因生物引起的安全性问题包括生物安全、环境安全和食品安全．

故答案为：

（1）玉米和水稻存在生殖隔离

（2）

（3）标记基因

（4）C

（5）在水稻细胞中合成PEPC

（6）组织培养

（7）ABC