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简答题

我们日常吃的大米中铁含量极低,科研人员通过基因工程等技术,培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻,改良了稻米的营养品质.下图为培育转基因水稻过程示意图,请分析回答.

(1)铁结合蛋白基因来自菜豆,且基因的脱氧核苷酸序列已知,可以用______法获得此目的基因或______扩增目的基因.

(2)构建重组Ti质粒时,通常要用______ 分别切割______.将重组Ti质粒转入农杆菌时,可以______处理农杆菌,使重组Ti质粒易于导入.

(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻细胞经过______获得的愈伤组织共同培养时,通过培养基2的筛选培养,可以获得______;因为培养基3与培养基2的区别是______的浓度比例,所以在培养基3中经过______可获得完整植株.检测培育转基因水稻的目的是否达到,需要检测转基因水稻______

正确答案

解:(l)获取目的基因的方法有三种:①从基因文库中获取;②利用PCR技术扩增;③人工合成(化学合成).如果基因的脱氧核苷酸序列已知,可以用化学合成法获得此目的基因,再用PCR技术进行扩增.

(2)构建重组质粒的过程中,通常要用同一种限制酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段,使它们产生相同的黏性末端,然后再用DNA连接酶连接成重组质粒.将重组Ti质粒转入农杆菌时,可以用CaCl2溶液处理农杆菌使之成为感受态细胞,易于重组Ti质粒导入.

(3)水稻细胞经过脱分化后可形成愈伤组织;质粒上的标记基因为潮霉素抗性基因,因此通过培养基2的筛选培养,可以获得含有重组质粒的愈伤组织.培养基2中进行的是再分化过程,而培养基3中已经形成试管苗,因此培养基3与培养基2的区别是生长素和细胞分裂素的浓度比例不同.检测培育转基因水稻的目的是否达到,需要检测转基因水稻成熟种子中铁含量.

故答案为:

(1)化学合成(或人工合成或从基因文库中获取目的基因)           PCR

(2)(同种)限制性核酸内切酶(或限制酶)    含目的基因(或铁结合蛋白基因)的DNA片段和质粒    CaCl2(或Ca2+

(3)脱分化     含有重组质粒(有潮霉素抗性)的愈伤组织    生长素和细胞分裂素       再分化    (成熟)种子中铁含量

解析

解:(l)获取目的基因的方法有三种:①从基因文库中获取;②利用PCR技术扩增;③人工合成(化学合成).如果基因的脱氧核苷酸序列已知,可以用化学合成法获得此目的基因,再用PCR技术进行扩增.

(2)构建重组质粒的过程中,通常要用同一种限制酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段,使它们产生相同的黏性末端,然后再用DNA连接酶连接成重组质粒.将重组Ti质粒转入农杆菌时,可以用CaCl2溶液处理农杆菌使之成为感受态细胞,易于重组Ti质粒导入.

(3)水稻细胞经过脱分化后可形成愈伤组织;质粒上的标记基因为潮霉素抗性基因,因此通过培养基2的筛选培养,可以获得含有重组质粒的愈伤组织.培养基2中进行的是再分化过程,而培养基3中已经形成试管苗,因此培养基3与培养基2的区别是生长素和细胞分裂素的浓度比例不同.检测培育转基因水稻的目的是否达到,需要检测转基因水稻成熟种子中铁含量.

故答案为:

(1)化学合成(或人工合成或从基因文库中获取目的基因)           PCR

(2)(同种)限制性核酸内切酶(或限制酶)    含目的基因(或铁结合蛋白基因)的DNA片段和质粒    CaCl2(或Ca2+

(3)脱分化     含有重组质粒(有潮霉素抗性)的愈伤组织    生长素和细胞分裂素       再分化    (成熟)种子中铁含量

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人外周血单核细胞能合成白介素2(IL-2).该蛋白可增强机体免疫功能,但在体内易被降解.研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,并在酵母菌中表达,获得具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2-HSA融合蛋白.其技术流程如图.请回答:

(1)培养人外周血单核细胞的适宜温度为______℃;图中②表示______过程.

(2)表达载体1中的位点______,应为限制酶BglⅡ的识别位点,才能成功构建表达载体2.

(3)表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL-2蛋白对应的碱基序列不能含有______(起始、终止)密码子,才能成功表达出IL-2-HSA融合蛋白.

(4)应用______杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL-2-HSA融合蛋白.

正确答案

解:(1)动物细胞培养所需要的条件是:95%空气和5%CO2气体环境、适宜温度(37℃)和PH、无毒无菌的环境及合适的营养成分,其培养基中通常需加入血清、血浆等一些天然成分;图中②mRNA→cDNA,表示逆转录过程.

(2)根据目的基因IL-2cDNA的两端的酶切位点分别是EcoRⅠ和BglⅡ,所以表达载体1也必须有这两个酶切位点,表达载体1上已有EcoRⅠ,推测位点a应含有BglⅡ.

(3)融合基因转录出的mRNA中与IL-2蛋白对应的碱基序列中不能含有终止密码,才能成功表达出IL-2-HsA融合蛋白.否则HSA蛋白将无法合成.

(4)应用抗原-抗体杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL-2-HSA融合蛋白.

故答案为:

(1)37   逆转录 

(2)a

(3)终止

(4)抗原-抗体

解析

解:(1)动物细胞培养所需要的条件是:95%空气和5%CO2气体环境、适宜温度(37℃)和PH、无毒无菌的环境及合适的营养成分,其培养基中通常需加入血清、血浆等一些天然成分;图中②mRNA→cDNA,表示逆转录过程.

(2)根据目的基因IL-2cDNA的两端的酶切位点分别是EcoRⅠ和BglⅡ,所以表达载体1也必须有这两个酶切位点,表达载体1上已有EcoRⅠ,推测位点a应含有BglⅡ.

(3)融合基因转录出的mRNA中与IL-2蛋白对应的碱基序列中不能含有终止密码,才能成功表达出IL-2-HsA融合蛋白.否则HSA蛋白将无法合成.

(4)应用抗原-抗体杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL-2-HSA融合蛋白.

故答案为:

(1)37   逆转录 

(2)a

(3)终止

(4)抗原-抗体

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植物生物反应器是指通过基因工程途径,以常见的农作物作为“化学工厂”,通过大规模种植生产具有重要功能的蛋白,如人或动物的疫苗、抗体、工农业用酶等各种高价值的生物制品的方法.列举几例如下表,请据此回答问题:

(1)从基因工程的角度分析,将目的基因导入植物受体细胞的最常用的方法是______,运载体是______,目的基因能在植物体内稳定遗传的关键是______.在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时,分子水平上的检测方法名称是______

(2)从细胞工程的角度分析,建立“化学工厂”的理论基础是______.从生态学角度考虑操作过程需要______

(3)分析说明烟草生物反应器II生产的药物作用机理是______

(4)从细胞膜的结构和功能上分析,生长激素不能使烟草细胞生长的原因是______;吃G蛋白基因已有效表达的番茄果实______(能、不能)预防狂犬病.

正确答案

解:(1)目的基因导入受体细胞常用农杆菌转化法;运载体用农杆菌的Ti质粒;目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上,利用农杆菌的转化作用,将目的基因插入到植物细胞染色体的DNA上.在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时,分子水平上的检测方法为DNA分子杂交技术.

(2)根据题意可知,“化工厂”就是指转基因植株,转基因植株的产生需要借助于植物组织培养技术,因此其建立的依据是植物细胞的全能性;操作过程中要进行无菌操作,预防杂菌感染.

(3)HIV主要攻击T细胞,利用T细胞的核糖体及原料合成自身的蛋白质.根据表中所给信息,推测反应器Ⅱ产生的药物能抑制T细胞的核糖体合成HIV的蛋白质.

(4)生长激素作用于靶细胞,靶细胞必需有相应受体,生长激素不能使植物细胞生长,说明植物细胞没有其对应的受体;G蛋白已表达的番茄果实中虽然含有G蛋白,但是在食用过程中该蛋白质被消化酶消化分解,失去效应,不能作为抗原引起机体的免疫反应,因此不能预防狂犬病.

故答案为:

(1)农杆菌转化法    Ti质粒    整合到受体细胞染色体的DNA上   DNA分子杂交技术  

(2)细胞的全能性    无菌操作(或预防微生物感染或预防杂菌污染)  

(3)该药物能抑制HIV感染者T细胞(或被HIV感染的人体细胞)的核糖体合成HIV蛋白质  

(4)烟草细胞(膜)上无生长激素的受体    不能

解析

解:(1)目的基因导入受体细胞常用农杆菌转化法;运载体用农杆菌的Ti质粒;目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上,利用农杆菌的转化作用,将目的基因插入到植物细胞染色体的DNA上.在检测受体细胞中是否已经导入目的基因时,分子水平上的检测方法为DNA分子杂交技术.

(2)根据题意可知,“化工厂”就是指转基因植株,转基因植株的产生需要借助于植物组织培养技术,因此其建立的依据是植物细胞的全能性;操作过程中要进行无菌操作,预防杂菌感染.

(3)HIV主要攻击T细胞,利用T细胞的核糖体及原料合成自身的蛋白质.根据表中所给信息,推测反应器Ⅱ产生的药物能抑制T细胞的核糖体合成HIV的蛋白质.

(4)生长激素作用于靶细胞,靶细胞必需有相应受体,生长激素不能使植物细胞生长,说明植物细胞没有其对应的受体;G蛋白已表达的番茄果实中虽然含有G蛋白,但是在食用过程中该蛋白质被消化酶消化分解,失去效应,不能作为抗原引起机体的免疫反应,因此不能预防狂犬病.

故答案为:

(1)农杆菌转化法    Ti质粒    整合到受体细胞染色体的DNA上   DNA分子杂交技术  

(2)细胞的全能性    无菌操作(或预防微生物感染或预防杂菌污染)  

(3)该药物能抑制HIV感染者T细胞(或被HIV感染的人体细胞)的核糖体合成HIV蛋白质  

(4)烟草细胞(膜)上无生长激素的受体    不能

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苏云金芽孢杆菌能产生具有杀虫能力的毒素蛋白.如图是培育转毒素蛋白基因植物及转基因植物中两种生物大分子合成的部分过程示意图.请据图回答问题:

(1)将图中①处的DNA用HindⅢBamHⅠ完全酶切后,反应管中有______种DNA片段.过程②需要用到______酶.

(2)假设图中质粒原来BamH I的识别序列变为Bcl I的识别序列,现用BdclI和HindⅢ切割质粒,再经过程②能否获得所需重组质粒?______,理由是______

(3)若上述假设成立,并成功形成重组质粒,则重组质粒可被限制酶______切割.

(4)把重组质粒导入水稻受体细胞常用的方法是______

(5)图中α链是______.不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点______(填“都相同”“都不同”或“不完全相同”).

正确答案

解:(1)限制酶HindⅢ有2个切割位点,处理DNA分子时可获得3种DNA片段、BamHl有1个切割位点,再次处理DNA,共获得4种DNA片段.过程②是基因表达载体的构建,需要用DNA连接酶连接目的基因和质粒.

(2)如果质粒原来BamHl的识别序列变为BclI的识别序列,BclI和BamHl识别的DNA序列是相同的,切割后露出相同的粘性末端,所以用BclI和HindⅢ切割质粒,再经过程②能获得所需重组质粒.

(3)BclI和BamHl识别的DNA序列是相同的,能切割后露出相同的粘性末端,重组质粒可被限制酶HindIII切割.

(4)把重组质粒导入水稻受体细胞常用的方法是农杆菌转化法.

(5)图中α链是以DNA的一条链为模板合成的mRNA.不同组织细胞中基因会进行选择性表达,因此不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点不完全相同.

故答案为:

(1)4    DNA连接

(2)能   切割后露出的黏性末端相同

(3)HindⅢ

(4)农杆菌转化法

(5)mRNA   不完全相同

解析

解:(1)限制酶HindⅢ有2个切割位点,处理DNA分子时可获得3种DNA片段、BamHl有1个切割位点,再次处理DNA,共获得4种DNA片段.过程②是基因表达载体的构建,需要用DNA连接酶连接目的基因和质粒.

(2)如果质粒原来BamHl的识别序列变为BclI的识别序列,BclI和BamHl识别的DNA序列是相同的,切割后露出相同的粘性末端,所以用BclI和HindⅢ切割质粒,再经过程②能获得所需重组质粒.

(3)BclI和BamHl识别的DNA序列是相同的,能切割后露出相同的粘性末端,重组质粒可被限制酶HindIII切割.

(4)把重组质粒导入水稻受体细胞常用的方法是农杆菌转化法.

(5)图中α链是以DNA的一条链为模板合成的mRNA.不同组织细胞中基因会进行选择性表达,因此不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点不完全相同.

故答案为:

(1)4    DNA连接

(2)能   切割后露出的黏性末端相同

(3)HindⅢ

(4)农杆菌转化法

(5)mRNA   不完全相同

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科学家培育荧光鼠的设计思路可用下面的图解表示.依据设计程序,回答下列问题:

(1)科学家在过程A中对天然质粒做的修饰改造是______

(2)基因工程的操作步骤中其中核心的步骤是______(填字母).

(3)进行G过程时,若要得到具有遗传同质的多个荧光小鼠胚胎,一般可采用______技术.为保证实验成功,还必须对代孕成鼠进行特定激素处理,即______处理.

(4)实验的最后阶段,还需判断转基因荧光鼠的荧光基因是否成功表达,在个体水平上应检测______

正确答案

解:(1)作为基因工程的载体质粒至少应具有启动子、复制原点、标记基因(四环素抗性基因)和终止子,由图可知,天然质粒还缺少终止子,因此过程A中对天然质粒做的修饰改造是添加终止子.

(2)基因工程的操作步骤中其中核心的步骤是基因表达载体的构建.

(3)进行G过程时,若要得到具有遗传同质的多个荧光小鼠胚胎,一般可采用胚胎分割技术.为保证实验成功,还必须对代孕成鼠进行特定激素处理,即同期发情处理,使供体雌鼠和受体雌鼠具有相同的生理状态.

(4)实验的最后阶段,还需判断转基因荧光鼠的荧光基因是否成功表达,在个体水平上应检测小鼠身体是否有荧光.

故答案为:

(1)添加终止子

(2)基因表达载体的构建

(3)胚胎分割           同期发情

(4)小鼠身体是否有荧光

解析

解:(1)作为基因工程的载体质粒至少应具有启动子、复制原点、标记基因(四环素抗性基因)和终止子,由图可知,天然质粒还缺少终止子,因此过程A中对天然质粒做的修饰改造是添加终止子.

(2)基因工程的操作步骤中其中核心的步骤是基因表达载体的构建.

(3)进行G过程时,若要得到具有遗传同质的多个荧光小鼠胚胎,一般可采用胚胎分割技术.为保证实验成功,还必须对代孕成鼠进行特定激素处理,即同期发情处理,使供体雌鼠和受体雌鼠具有相同的生理状态.

(4)实验的最后阶段,还需判断转基因荧光鼠的荧光基因是否成功表达,在个体水平上应检测小鼠身体是否有荧光.

故答案为:

(1)添加终止子

(2)基因表达载体的构建

(3)胚胎分割           同期发情

(4)小鼠身体是否有荧光

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紫杉醇是从红豆杉属植物中提取的最有效的抗癌制剂之一,目前生产紫杉醇的主要原料是天然生长的红豆杉树皮,而大量剥取树皮会造成树木的死亡和资源的破坏.科研人员为寻找更多紫杉醇原料的来源,尝试利用基因工程技术和植物组织培养技术,快速培育具有抗病特性的红豆衫树苗,经栽培形成人工红豆衫林,从而扩大提取紫杉醇的原料来源,实验过程如图表所示,请据图回答相关问题:

(1)图中将目的基因结合到质粒A形成重组质粒时需要的酶有______,将经过导入处理的红豆衫顶芽离体细胞接种于MS培养基中,培养基中需添加的抗生素为______,其目的是______,这种培养基为______培养基.

(2)己导入目的基因的红豆衫顶芽离体细胞能在MS培养基中发育为幼苗,利用了细胞的______性,形成愈伤组织后,经再分化可形成各种组织细胞的原因是______

(3)配制的MS培养基在接种前需采用______进行灭菌处理,该培养基中还需添加______两种植物激素,添加激素时还需控制好两种激素的______

(4)将红豆杉顶芽切段分离成单个的顶芽离体细胞时,常用方法是酶解法,所需酶为______

正确答案

解:(1)形成重组质粒时需要限制酶和DNA连接酶.由于导入目的基因时将氨苄青霉素抗性基因破坏,没有破坏四环素抗性基因,因此培养基中需添加四环素,以便于筛选出导入了目的基因的顶芽细胞,这种培养基为选择性培养基.

(2)利用植物组织培养技术将导入目的基因的红豆衫顶芽离体细胞培养发育为幼苗,其原理为植物细胞的全能性.形成愈伤组织后,由于遗传信息的执行情况不同,经再分化可形成各种组织细胞.

(3)配制的MS培养基在接种前需采用高压蒸汽灭菌进行灭菌处理,避免杂菌在上面迅速生长消耗营养,且有些杂菌会危害培养物的生长.生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要,该培养基中还需添加这两种植物激素,添加激素时还需控制好两种激素的浓度和使用顺序及用量比例.

(4)将红豆杉顶芽切段分离成单个的顶芽离体细胞时,常用方法是酶解法,所需酶为果胶酶.

故答案为:

(1)限制酶和DNA连接酶    四环素     筛选导入了目的基因的顶芽细胞      选择

(2)全能    遗传信息的执行情况不同

(3)高压蒸汽灭菌    生长素和细胞分裂素   浓度和使用顺序及用量比例

(4)果胶酶

解析

解:(1)形成重组质粒时需要限制酶和DNA连接酶.由于导入目的基因时将氨苄青霉素抗性基因破坏,没有破坏四环素抗性基因,因此培养基中需添加四环素,以便于筛选出导入了目的基因的顶芽细胞,这种培养基为选择性培养基.

(2)利用植物组织培养技术将导入目的基因的红豆衫顶芽离体细胞培养发育为幼苗,其原理为植物细胞的全能性.形成愈伤组织后,由于遗传信息的执行情况不同,经再分化可形成各种组织细胞.

(3)配制的MS培养基在接种前需采用高压蒸汽灭菌进行灭菌处理,避免杂菌在上面迅速生长消耗营养,且有些杂菌会危害培养物的生长.生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要,该培养基中还需添加这两种植物激素,添加激素时还需控制好两种激素的浓度和使用顺序及用量比例.

(4)将红豆杉顶芽切段分离成单个的顶芽离体细胞时,常用方法是酶解法,所需酶为果胶酶.

故答案为:

(1)限制酶和DNA连接酶    四环素     筛选导入了目的基因的顶芽细胞      选择

(2)全能    遗传信息的执行情况不同

(3)高压蒸汽灭菌    生长素和细胞分裂素   浓度和使用顺序及用量比例

(4)果胶酶

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人们发现小型猪的器官可用来替代人体器官进行移植,但小型猪器官表面抗原仍可引起免疫排斥反应.如图为科学家将小型猪器官表面抗原基因(Anti)“反向处理”(Anti基因的模板链和reAnti基因的模板链碱基序列互补),并人工合成reAnti基因,转入猪成纤维细胞,做成转基因克隆猪的培育过程示意图.请回答下列问题:

(1)若使reAnti基因和Anti基因在转基因克隆猪的同一细胞内转录,应在人工合成的reAnti基因的首段连接______

(2)图中转基因克隆猪不含有猪抗原的实质是reAnti基因抑制了Anti基因的______(填“转录”或“翻译”).

(3)图中①、②过程涉及到的现代生物技术中,核心步骤是______

(4)从猪中取出胎儿成纤维细胞,用______处理,然后进行分散培养.培养时,将培养瓶置于含95%空气加______的混合气体培养箱中进行培养.

(5)过程⑤的细胞分裂方式为______

(6)图中④、⑤、⑥过程涉及到的现代生物技术依次为__________________

正确答案

解:(1)若使reAnti基因和Anti基因在转基因克隆猪的同一细胞内转录,应在人工合成的reAnti基因的首段连接(Anti基因的)启动子.

(2)Anti基因的模板链和reAnti基因的模板链碱基序列互补,则Anti基因转录形成的mRNA会与reAnti基因转录形成的mRNA互补配对并结合,进而Anti基因的翻译过程.

(3)图中①、②过程涉及到的是基因工程技术,该技术的核心步骤是基因表达载体的构建.

(4)动物细胞培养时,需要先用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理,然后进行分散培养.培养时,将培养瓶置于含95%空气加5%CO2的混合气体培养箱中进行培养.

(5)过程⑤为早期胚胎培养过程,该过程中细胞分裂的方式为有丝分裂.

(6)由以上分析可知,图中④、⑤、⑥过程涉及到的现代生物技术依次为动物体细胞核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术.

故答案为:

(1)(Anti基因的)启动子

(2)翻译

(3)基因表达载体的构建

(4)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)     5% CO2

(5)有丝分裂

(6)动物体细胞核移植技术    早期胚胎培养技术(或动物细胞培养技术)    胚胎移植技术

解析

解:(1)若使reAnti基因和Anti基因在转基因克隆猪的同一细胞内转录,应在人工合成的reAnti基因的首段连接(Anti基因的)启动子.

(2)Anti基因的模板链和reAnti基因的模板链碱基序列互补,则Anti基因转录形成的mRNA会与reAnti基因转录形成的mRNA互补配对并结合,进而Anti基因的翻译过程.

(3)图中①、②过程涉及到的是基因工程技术,该技术的核心步骤是基因表达载体的构建.

(4)动物细胞培养时,需要先用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理,然后进行分散培养.培养时,将培养瓶置于含95%空气加5%CO2的混合气体培养箱中进行培养.

(5)过程⑤为早期胚胎培养过程,该过程中细胞分裂的方式为有丝分裂.

(6)由以上分析可知,图中④、⑤、⑥过程涉及到的现代生物技术依次为动物体细胞核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术.

故答案为:

(1)(Anti基因的)启动子

(2)翻译

(3)基因表达载体的构建

(4)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)     5% CO2

(5)有丝分裂

(6)动物体细胞核移植技术    早期胚胎培养技术(或动物细胞培养技术)    胚胎移植技术

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人的血清白蛋白在临床上需求量很大.将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,就可以利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白.大致过程如下:

(1)①过程采集的精子要进行______处理,该过程自然状态下是在______(场所)中完成的;②过程得到的卵母细胞,一般要培养到______阶段才能进行体外受精.

(2)要使人的血清白蛋白基因只在转基因牛的乳腺细胞中选择性表达,则③过程中要在目的基因前接上______(调控组件).一般情况下,将基因表达载体通过______技术导入牛的受精卵.

(3)⑤过程称技术,培养过程中不仅要加入氧气维持细胞呼吸,还要提供______ 以维持PH.

(4)为获得更多的转基因牛,通常将胚胎干细胞培养到______期后,采用胚胎分割技术获得更多胚胎,然后再采用______等技术将胚胎移到不同母牛子宫内.将胚胎干细胞置于子宫内发育成一个体,体现了胚胎干细胞具有______.将早期胚胎分割、移植可获得多个同卵胚胎,该繁殖方式是______

正确答案

解:(1)①过程采集的精子要进行获能处理,该过程自然状态下是在雌性动物的生殖道中完成的;②过程得到的卵母细胞,一般要培养到减数第二次分裂中期才能进行体外受精.

(2)要使人的血清白蛋白基因只在转基因牛的乳腺细胞中选择性表达,应在目的基因前接上乳腺蛋白基因的启动子;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法.

(3)⑤为早期胚胎培养过程.培养过程中不仅要加入氧气维持细胞呼吸,还要提供5%的CO2以维持PH.

(4)为获得更多的转基因牛,通常将胚胎干细胞培养到桑椹胚或囊胚期后,采用胚胎分割技术获得更多胚胎,然后再采用胚胎移植等技术将胚胎移到不同母牛子宫内.将胚胎干细胞置于子宫内发育成一个体,体现了胚胎干细胞具有全能性.将早期胚胎分割、移植可获得多个同卵胚胎,该繁殖方式是无性繁殖.

故答案为:

(1)获能        雌性动物的生殖道        减数第二次分裂中期(MⅡ中期)

(2)乳腺蛋白基因的启动子          显微注射

(3)早期胚胎培养                   CO2

(4)桑椹胚或囊胚                 胚胎移植            全能性          无性繁殖

解析

解:(1)①过程采集的精子要进行获能处理,该过程自然状态下是在雌性动物的生殖道中完成的;②过程得到的卵母细胞,一般要培养到减数第二次分裂中期才能进行体外受精.

(2)要使人的血清白蛋白基因只在转基因牛的乳腺细胞中选择性表达,应在目的基因前接上乳腺蛋白基因的启动子;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法.

(3)⑤为早期胚胎培养过程.培养过程中不仅要加入氧气维持细胞呼吸,还要提供5%的CO2以维持PH.

(4)为获得更多的转基因牛,通常将胚胎干细胞培养到桑椹胚或囊胚期后,采用胚胎分割技术获得更多胚胎,然后再采用胚胎移植等技术将胚胎移到不同母牛子宫内.将胚胎干细胞置于子宫内发育成一个体,体现了胚胎干细胞具有全能性.将早期胚胎分割、移植可获得多个同卵胚胎,该繁殖方式是无性繁殖.

故答案为:

(1)获能        雌性动物的生殖道        减数第二次分裂中期(MⅡ中期)

(2)乳腺蛋白基因的启动子          显微注射

(3)早期胚胎培养                   CO2

(4)桑椹胚或囊胚                 胚胎移植            全能性          无性繁殖

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图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.

(1)若用限制酶SmaI完全切割图1中DNA片段,其产物长度分别为______

若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从隐形纯合子中分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶Sma I完全切割,产物中共

______种不同长度的DNA片段.

(2)为了提高试验成功率,需要通过______技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.该方法也是检测______多样性的最简单方法.

(3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是______

(4)为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌,首先将大肠杆菌在含______的培养基上培养,得到如图3的菌落. 再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含______的培养基上培养,得到如图4的结果(空圈表示与图11对照无菌落的位置).请在图3中圈出一个含目的基因的重组质粒的大肠杆菌的菌落.

(5)在选出的大肠杆菌内基因D能成功表达的原因是______.其表达产物是一条多肽链,如考虑终止密码,则其至少含有的氧原子数为______

正确答案

解:(1)根据图1中的酶切位点,可判断用限制酶SmaⅠ完全切割该DNA片段,其产物长度为537bp、790bp、661bp.若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,基因D就突变为基因d,那么基因d上只有一个限制酶SmaⅠ切割位点,被限制酶SmaⅠ切割的产物长度为534+796-3=1327kb、658+3=661bp.因此从隐性纯合子(dd)分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有2种不同DNA片段.

(2)为了提高试验成功率,需要通过PCR技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.该方法也是检测遗传多样性的最简单方法.

(3)由图1可知,目的基因两侧是GGATCC序列,该序列是限制酶BamHⅠ的识别序列,因此要将质粒和目的基因D连接形成重组质粒,应选用限制酶BamHⅠ切割.

(4)用限制酶BamHⅠ切割质粒后,用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因,但没有破环抗生素B抗性基因,因此首先用含有抗生素B的培养基培养大肠杆菌,能生存下来的是含有普通质粒和重组质粒的大肠杆菌;再用含有抗生素A的培养基培养,能生存下来的是含有普通质粒的大肠杆菌.最后能在培养皿1上生存,但不能在培养皿2上生存的大肠杆菌菌落进行培养,即可得到含重组质粒的大肠杆菌.图4中空心圈在图3中对应的位置是含目的基因的重组质粒的大肠杆菌的菌落.

(5)不同生物共用一套遗传密码子,所以基因D能再大肠杆菌内成功表达.基因D含有1020对碱基,最多能翻译形成含有1020÷3-1(终止密码子)=339个氨基酸的多肽链.多肽链含有O原子数=肽键数+2肽链数+R基中的O原子数,所以该多肽至少含有O原子数为338+2×1=340个.

故答案为:

(1)537、790、661     2

(2)PCR        遗传

(3)BamH1

(4)抗生素B    抗生素A

(5)生物共用一套遗传密码子      340

解析

解:(1)根据图1中的酶切位点,可判断用限制酶SmaⅠ完全切割该DNA片段,其产物长度为537bp、790bp、661bp.若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,基因D就突变为基因d,那么基因d上只有一个限制酶SmaⅠ切割位点,被限制酶SmaⅠ切割的产物长度为534+796-3=1327kb、658+3=661bp.因此从隐性纯合子(dd)分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有2种不同DNA片段.

(2)为了提高试验成功率,需要通过PCR技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.该方法也是检测遗传多样性的最简单方法.

(3)由图1可知,目的基因两侧是GGATCC序列,该序列是限制酶BamHⅠ的识别序列,因此要将质粒和目的基因D连接形成重组质粒,应选用限制酶BamHⅠ切割.

(4)用限制酶BamHⅠ切割质粒后,用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因,但没有破环抗生素B抗性基因,因此首先用含有抗生素B的培养基培养大肠杆菌,能生存下来的是含有普通质粒和重组质粒的大肠杆菌;再用含有抗生素A的培养基培养,能生存下来的是含有普通质粒的大肠杆菌.最后能在培养皿1上生存,但不能在培养皿2上生存的大肠杆菌菌落进行培养,即可得到含重组质粒的大肠杆菌.图4中空心圈在图3中对应的位置是含目的基因的重组质粒的大肠杆菌的菌落.

(5)不同生物共用一套遗传密码子,所以基因D能再大肠杆菌内成功表达.基因D含有1020对碱基,最多能翻译形成含有1020÷3-1(终止密码子)=339个氨基酸的多肽链.多肽链含有O原子数=肽键数+2肽链数+R基中的O原子数,所以该多肽至少含有O原子数为338+2×1=340个.

故答案为:

(1)537、790、661     2

(2)PCR        遗传

(3)BamH1

(4)抗生素B    抗生素A

(5)生物共用一套遗传密码子      340

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题型:简答题
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简答题

番茄营养丰富,是人们喜爱的一类果蔬.但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄软化,不耐贮藏.为满足人们的生产生活需要,科学家们通过基因工程技术,培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种.(操作流程如图)请回答:

(1)过程①中切割抗多聚半乳糖醛酸酶基因需要的工具酶是______

(2)培养②、③分别为植物组织培养过程中的____________

(3)在基因表达载体中,除了要含有目的基因和启动子外,还要有______以及______

(4)在番茄新品种的培育过程中,将目的基因导入受体细胞的方法叫做______

(5)从图中可见,mRNA1和mRNA2的结合直接导致了______无法合成,最终使番茄获得了抗软化的性状.

正确答案

解:(1)构建基因表达载体时,需要用到同一种的限制性内切酶处理含有目的基因的外源DNA分子和运载体,以形成相同的黏性末端,再用DNA连接酶将目的基因和载体连接构成重组质粒.因此,过程①中切割抗多聚半乳糖醛酸酶基因需要的工具酶是限制酶.

(2)由以上分析可知,图中②是脱分化过程,③是再分化过程.

(3)基因表达载体含有目的基因、启动子、终止子、标记基因.

(4)据图分析,在番茄新品种的培育过程中,将目的基因导入受体细胞的方法为农杆菌转化法.

(5)从图中可见,mRNA1和mRNA2的结合直接阻碍了多聚半乳糖醛酸酶合成时的翻译过程,最终使番茄获得抗软化的性状.

故答案为:

(1)限制酶

(2)脱分化   再分化

(3)终止子、标记基因

(4)农杆菌转化法   

(5)多聚半乳糖醛酸酶

解析

解:(1)构建基因表达载体时,需要用到同一种的限制性内切酶处理含有目的基因的外源DNA分子和运载体,以形成相同的黏性末端,再用DNA连接酶将目的基因和载体连接构成重组质粒.因此,过程①中切割抗多聚半乳糖醛酸酶基因需要的工具酶是限制酶.

(2)由以上分析可知,图中②是脱分化过程,③是再分化过程.

(3)基因表达载体含有目的基因、启动子、终止子、标记基因.

(4)据图分析,在番茄新品种的培育过程中,将目的基因导入受体细胞的方法为农杆菌转化法.

(5)从图中可见,mRNA1和mRNA2的结合直接阻碍了多聚半乳糖醛酸酶合成时的翻译过程,最终使番茄获得抗软化的性状.

故答案为:

(1)限制酶

(2)脱分化   再分化

(3)终止子、标记基因

(4)农杆菌转化法   

(5)多聚半乳糖醛酸酶

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