- 基因工程的基本操作程序
- 共6244题
研究发现：将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药．
（1）在分子水平上对干扰素基因在家蚕细胞中是否表达进行检测，可分为三步：首先要采用分子杂交技术检测______；其次还要采用分子杂交技术检测______；最后检测是否产生了干扰素，方法是______杂交．
（2）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生______现象，若使贴满瓶壁的细胞继续增殖，需要重新用______处理，分瓶继续培养．
（3）饲养家蚕需要大量桑叶，人们遵循生态工程的______原理，建立了“桑基鱼塘”生态系统．同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使______和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的______原理．
正确答案
解：（1）基因工程中，目的基因的检测与鉴定分三步：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
（2）动物细胞培养时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制现象，若使贴满瓶壁的细胞继续增殖，需要重新用胰蛋白酶处理，分瓶继续培养．
（3）饲养家蚕需要大量桑叶，人们遵循生态工程的系统学和工程学原理，建立了“桑基鱼塘”生态系统．同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使生态效益和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的整体性原理．
故答案为：
（1）目的基因是否导入 目的基因是否发生转录 抗原-抗体
（2）接触抑制 胰蛋白酶
（3）系统学和工程学 生态效益 整体性
解析
解：（1）基因工程中，目的基因的检测与鉴定分三步：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
（2）动物细胞培养时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制现象，若使贴满瓶壁的细胞继续增殖，需要重新用胰蛋白酶处理，分瓶继续培养．
（3）饲养家蚕需要大量桑叶，人们遵循生态工程的系统学和工程学原理，建立了“桑基鱼塘”生态系统．同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使生态效益和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的整体性原理．
故答案为：
（1）目的基因是否导入 目的基因是否发生转录 抗原-抗体
（2）接触抑制 胰蛋白酶
（3）系统学和工程学 生态效益 整体性
荧火虫能发光是因为荧火虫体内可以通过荧光素酶催化的系列反应所产生的现象．如果荧光素酶存在于植物体内，也可使植物体发光．一直以来荧光素酶的惟一来源是从荧火虫腹部提取的．但加利福利亚大学的一组科学家成功地通过转基因工程实现了将荧光素酶基因导入到大肠杆菌体内，并在大肠杆菌体内产生荧光素酶．
请你根据已有的知识回答下列有关问题：
（1）在此转基因工程中，目的基因是______．
（2）在该过程中需要多种酶的参与，其中包括______等．
（3）将此目的基因导入到大肠杆菌体内需要运载体的帮助．下列所列各项是选取运载体的时不必考虑的是______．
A、能够在宿主细胞内复制并稳定保存 B、具1至多个的限制酶切点
C、具有与目的基因相同的碱基片断 D、具有某些标记基因
（4）下列可作为受体细胞的生物有______（多选）
A、土壤农杆菌 B、结核杆菌 C、噬菌体 D、枯草杆菌
（5）在此转基因工程中，是由质粒承担运载体的．在将体外重组体DNA导入大肠杆菌体内之前通常要用______处理大肠杆菌，目的是______．
（6）与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优势是______和______．
正确答案
解：（1）在此转基因工程中，实现了将荧光素酶基因导入到大肠杆菌体内，并在大肠杆菌体内产生荧光素酶，因此目的基因是荧光素酶基因．
（2）基因工程中运用的工具酶包括限制酶和DNA连接酶．
（3）作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．故选：C．
（4）由于原核生物多为单细胞生物、繁殖快、遗传物质少等优点，因此适合作为基因工程受体细胞．而结核杆菌具有强烈的病原性，不适宜作为受体细胞；噬菌体不作为受体细胞，一般作为运载体．
（5）在此转基因工程中，是由质粒承担运载体的．在将体外重组体DNA导入大肠杆菌体内之前通常要用CaCl2处理大肠杆菌，目的是以增大细胞壁的通透性，使重组基因能够导入到受体细胞内．
（6）与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点有目的明确、培育周期短、可以克服远缘杂交的不亲和性等．
故答案为：
（1）荧光素酶基因
（2）限制性内切酶和DNA连接酶
（3）C
（4）AD
（5）CaCl2 （或 Ca2+） 以增大细胞壁的通透性，使重组基因能够导入到受体细胞内
（6）目的明确 培育周期短 可以克服远缘杂交的不亲和性
解析
解：（1）在此转基因工程中，实现了将荧光素酶基因导入到大肠杆菌体内，并在大肠杆菌体内产生荧光素酶，因此目的基因是荧光素酶基因．
（2）基因工程中运用的工具酶包括限制酶和DNA连接酶．
（3）作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．故选：C．
（4）由于原核生物多为单细胞生物、繁殖快、遗传物质少等优点，因此适合作为基因工程受体细胞．而结核杆菌具有强烈的病原性，不适宜作为受体细胞；噬菌体不作为受体细胞，一般作为运载体．
（5）在此转基因工程中，是由质粒承担运载体的．在将体外重组体DNA导入大肠杆菌体内之前通常要用CaCl2处理大肠杆菌，目的是以增大细胞壁的通透性，使重组基因能够导入到受体细胞内．
（6）与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点有目的明确、培育周期短、可以克服远缘杂交的不亲和性等．
故答案为：
（1）荧光素酶基因
（2）限制性内切酶和DNA连接酶
（3）C
（4）AD
（5）CaCl2 （或 Ca2+） 以增大细胞壁的通透性，使重组基因能够导入到受体细胞内
（6）目的明确 培育周期短 可以克服远缘杂交的不亲和性
（2016•大连模拟）阅读下列资料：
资料甲：某种细菌体内有抗虫基因，该基因能指导抗虫毒蛋白的合成．我国科学家成功地将该抗虫基因导入棉花细胞中，培育出了抗虫效果好的棉花新品种．
资料乙：研究表明，抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，科学家利用小鼠制备出了抗H蛋白的单克隆抗体．
请回答下列问题：
（1）资料甲中，获取抗虫基因时可使用EcoRI，其原因是含抗虫基因的DNA片段中含有______．向棉花细胞导入抗虫基因时，我国科学家采用了______法．抗虫基因导入棉花细胞后，为确定棉花植株是否具有抗虫特性以及抗性的程度如何，需要做______实验进行个体水平的鉴定．
（2）资料乙中，选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织细胞中______（填“低表达”或“高表达”）．将H蛋白注射到小鼠体内，从该小鼠的脾脏中获得相应的B淋巴细胞，将其与骨髓瘤细胞进行融合，细胞融合利用的原理是______．与植物原生质体融合过程相比，该融合过程特有的诱导方法是______．在杂交瘤细胞的体外培养过程中，培养液中是否需要添加血清______（填“需要”或“不需要”）；培养箱中充入5% CO2的主要作用是______．为避免培养过程中代谢产物对杂交瘤细胞的毒害，常采取的措施是______．
正确答案
解：（1）获取抗虫基因时需使用限制酶切割，如获取抗虫基因可用EcoRI切割，其原因是含抗虫基因的DNA片段中中含有EcoRI能够识别的特定的核苷酸序列．由于棉花为被子植物，故向棉花细胞导入抗虫基因时，我国科学家采用了花粉管通道法．抗虫基因导入棉花细胞后，为确定棉花植株是否具有抗虫特性以及抗性的程度如何，需要做抗虫的接种实验进行个体水平的鉴定．
（2）据题意可知H蛋白在成年个体的正常组织细胞中低表达，在癌细胞中过量表达．细胞融合利用的原理是利用了细胞膜具有流动性．与植物原生质体融合过程相比，动物细胞融合过程特有的诱导方法是 用灭活的病毒处理．在杂交瘤细胞的体外培养过程中，培养液中需要添加血清；培养箱中充入5%CO2，其目的是为了维持培养液（适宜）的pH．培养过程中要定期更换培养液，以免培养过程中代谢产物对杂交瘤细胞的毒害．
故答案为：
（1）EcoRI能够识别的特定的核苷酸序列 花粉管通道 抗虫的接种
（2）低表达 细胞膜具有流动性 用灭活的病毒处理 需要 维持培养液（适宜）的pH 定期更换培养液（基）
解析
解：（1）获取抗虫基因时需使用限制酶切割，如获取抗虫基因可用EcoRI切割，其原因是含抗虫基因的DNA片段中中含有EcoRI能够识别的特定的核苷酸序列．由于棉花为被子植物，故向棉花细胞导入抗虫基因时，我国科学家采用了花粉管通道法．抗虫基因导入棉花细胞后，为确定棉花植株是否具有抗虫特性以及抗性的程度如何，需要做抗虫的接种实验进行个体水平的鉴定．
（2）据题意可知H蛋白在成年个体的正常组织细胞中低表达，在癌细胞中过量表达．细胞融合利用的原理是利用了细胞膜具有流动性．与植物原生质体融合过程相比，动物细胞融合过程特有的诱导方法是 用灭活的病毒处理．在杂交瘤细胞的体外培养过程中，培养液中需要添加血清；培养箱中充入5%CO2，其目的是为了维持培养液（适宜）的pH．培养过程中要定期更换培养液，以免培养过程中代谢产物对杂交瘤细胞的毒害．
故答案为：
（1）EcoRI能够识别的特定的核苷酸序列 花粉管通道 抗虫的接种
（2）低表达 细胞膜具有流动性 用灭活的病毒处理 需要 维持培养液（适宜）的pH 定期更换培养液（基）
以下是采用不同方法培育良种牛的过程，请据图回答下列有关问题：
（1）②过程使用______酶，③表示______技术，该技术的条件是原料、能量______．④表示基因工程中______过程，目的是______．
（2）如果要人工控制牛的性别，可采用______技术，若要对早期胚胎进行性别鉴定，可以取______细胞进行DNA分析，所使用的基因探针来自______染色体．
（3）如果转基因牛D的牛奶中含有______，则说明该基因在个体水平已表达成功，其他细胞中不含血清白蛋白是______的结果．
正确答案
解：（1）②是采用反转录法合成目的基因的过程，该过程需要逆转录酶的参与．③为目的基因的扩增过程，需要采用PCR技术，该技术的条件包括：原料（脱氧核苷酸）、能量、酶（Taq酶）、模板（目的基因）和引物．④表示基因表达载体的构建过程，该过程的目的是 使目的基因在受体细胞中稳定存在、遗传、表达并发挥作用．
（2）由于只要雌性奶牛才产奶，因此要人工控制牛的性别，可采用X精子与Y精子分离技术；若要对早期胚胎进行性别鉴定，可以取滋养层细胞进行DNA分析；由于雌性和雄性都含有X染色体，但只要雄性含有Y染色体，因此使用的基因探针来自Y染色体，若形成杂交带，则表明为雄牛，否则为雌牛．
（3）目的基因是血清白蛋白基因，因此目的基因产物是血清白蛋白，如果转基因牛D的牛奶中含有血清白蛋白，则说明该基因在个体水平已表达成功，其他细胞中不含血清白蛋白是基因选择性表达的结果．
故答案为：
（1）反转录酶 PCR 模板、引物、Taq酶 构建基因表达载体 使目的基因在受体细胞中稳定存在、遗传、表达并发挥作用
（2）X精子与Y精子分离技术 滋养层 Y
（3）血清白蛋白 基因选择性表达
解析
解：（1）②是采用反转录法合成目的基因的过程，该过程需要逆转录酶的参与．③为目的基因的扩增过程，需要采用PCR技术，该技术的条件包括：原料（脱氧核苷酸）、能量、酶（Taq酶）、模板（目的基因）和引物．④表示基因表达载体的构建过程，该过程的目的是 使目的基因在受体细胞中稳定存在、遗传、表达并发挥作用．
（2）由于只要雌性奶牛才产奶，因此要人工控制牛的性别，可采用X精子与Y精子分离技术；若要对早期胚胎进行性别鉴定，可以取滋养层细胞进行DNA分析；由于雌性和雄性都含有X染色体，但只要雄性含有Y染色体，因此使用的基因探针来自Y染色体，若形成杂交带，则表明为雄牛，否则为雌牛．
（3）目的基因是血清白蛋白基因，因此目的基因产物是血清白蛋白，如果转基因牛D的牛奶中含有血清白蛋白，则说明该基因在个体水平已表达成功，其他细胞中不含血清白蛋白是基因选择性表达的结果．
故答案为：
（1）反转录酶 PCR 模板、引物、Taq酶 构建基因表达载体 使目的基因在受体细胞中稳定存在、遗传、表达并发挥作用
（2）X精子与Y精子分离技术 滋养层 Y
（3）血清白蛋白 基因选择性表达
应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品，是生物科学技术转化为生产力的重要体现．请据图回答下列问题：
（1）在培育转基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是______、______，②过程常用的方法是______．
（2）转基因牛可通过分泌乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有______，它是______识别和结合点部位．③过程培养到______或______阶段，可以采用______技术，培育出多头相同的转基因牛犊．
（3）prG基因的产物能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是______细胞，Ⅲ代表的细胞具有______的特点．
（4）在抗虫花生植株培育过程中，将目的基因导入花生受体细胞采用最多的方法是______法．④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是______，⑤过程采用的技术是______．
正确答案
解：（1）图中①表示基因表达载体的构建过程，首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．②表示将目的基因导入动物受精卵的过程，而将目的基因导入动物细胞的最有效的方法是显微注射法．
（2）在构建的相应基因表达载体中，人抗血栓基因的首端必须含有使其仅能在山羊乳腺细胞中特异性表达的启动子，它是RNA聚合酶识别和结合点部位．来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此为了获得多头相同的转基因动物，人们在将受精卵培养到桑椹胚或囊胚阶段，采用胚胎分割移植技术．
（3）能产生单克隆抗体的细胞必须具备既能无限增殖，又能产生特异性抗体的能力，由图可知，给细胞Ⅱ导入无限增殖调控基因（prG）能产生单克隆抗体，可知细胞Ⅱ本身具备产生抗体的能力，故为浆细胞（效应B细胞），Ⅲ代表的细胞具有既能无限增殖又能产生特定抗体的特点．
（4）在抗虫花生植株培育过程中，将目的基因导入花生受体细胞采用最多的方法是农杆菌转化法．愈伤组织是经脱分化而来，其全能性要高于体细胞；⑤过程表示将单个体细胞培育成完整植株个体，其方法是植物组织培养．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶 DNA连接酶 显微注射法
（2）启动子 RNA聚合酶 桑椹胚 囊胚 胚胎分割移植
（3）浆（或效应B）既能无限增殖又能产生特定抗体
（4）农杆菌转化 全能性高 植物组织培养
解析
解：（1）图中①表示基因表达载体的构建过程，首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．②表示将目的基因导入动物受精卵的过程，而将目的基因导入动物细胞的最有效的方法是显微注射法．
（2）在构建的相应基因表达载体中，人抗血栓基因的首端必须含有使其仅能在山羊乳腺细胞中特异性表达的启动子，它是RNA聚合酶识别和结合点部位．来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此为了获得多头相同的转基因动物，人们在将受精卵培养到桑椹胚或囊胚阶段，采用胚胎分割移植技术．
（3）能产生单克隆抗体的细胞必须具备既能无限增殖，又能产生特异性抗体的能力，由图可知，给细胞Ⅱ导入无限增殖调控基因（prG）能产生单克隆抗体，可知细胞Ⅱ本身具备产生抗体的能力，故为浆细胞（效应B细胞），Ⅲ代表的细胞具有既能无限增殖又能产生特定抗体的特点．
（4）在抗虫花生植株培育过程中，将目的基因导入花生受体细胞采用最多的方法是农杆菌转化法．愈伤组织是经脱分化而来，其全能性要高于体细胞；⑤过程表示将单个体细胞培育成完整植株个体，其方法是植物组织培养．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶 DNA连接酶 显微注射法
（2）启动子 RNA聚合酶 桑椹胚 囊胚 胚胎分割移植
（3）浆（或效应B）既能无限增殖又能产生特定抗体
（4）农杆菌转化 全能性高 植物组织培养
在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．如图为获得抗虫棉的技术流程．请据图回答：
（1）A过程需要的酶有______．
（2）要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用______处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为______态；然后将______在缓冲液中混合培养完成转化过程．
（3）含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过[C]______和[E]______．如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C过程的培养基中加入______．
（4）如想利用分子杂交技术检测再生植株中的抗虫基因是否转录，应该用放射性同位素标记的目的基因作为探针与______杂交．
正确答案
解：（1）图中A为基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．
（2）将重组质粒导入微生物细胞时，常采用感受态细胞法，即首先用Ca2+处理微生物细胞，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞；然后将将重组质粒和感受态细胞在缓冲液中混合培养完成转化过程．
（3）将离体棉花叶片组织培养成再生植株还需要采用植物组织培养技术，该技术包括脱分化和再分化两个过程．由图可知，标记基因时卡那霉素抗性基因，因此可用含有卡那霉素的培养基筛选含有抗虫基因的再生植株．
（4）检测目的基因是否转录出mRNA常采用分子杂交技术，即以标记的目的基因为探针与mRNA分子杂交．
故案为：
（1）（同一种）限制酶、DNA连接酶
（2）Ca2+ 感受 将重组质粒和感受态细胞
（3）脱分化、再分化 卡那霉素
（4）mRNA
解析
解：（1）图中A为基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．
（2）将重组质粒导入微生物细胞时，常采用感受态细胞法，即首先用Ca2+处理微生物细胞，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞；然后将将重组质粒和感受态细胞在缓冲液中混合培养完成转化过程．
（3）将离体棉花叶片组织培养成再生植株还需要采用植物组织培养技术，该技术包括脱分化和再分化两个过程．由图可知，标记基因时卡那霉素抗性基因，因此可用含有卡那霉素的培养基筛选含有抗虫基因的再生植株．
（4）检测目的基因是否转录出mRNA常采用分子杂交技术，即以标记的目的基因为探针与mRNA分子杂交．
故案为：
（1）（同一种）限制酶、DNA连接酶
（2）Ca2+ 感受 将重组质粒和感受态细胞
（3）脱分化、再分化 卡那霉素
（4）mRNA
以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a-h为操作过程，请据图1回答有关问题：
（1）图中“激素处理”的激素是______．“试管牛”的操作过程一般是______
（用a-h字母表示），属于______（填“有性”/“无性”）生殖．
（2）外源基因可以利用PCR技术扩增获得，PCR中的Taq DNA聚合酶______（填“能”/“不能”）催化图2所示的反应，所以在反应体系中需要加入______．
（3）图中数字标号代表的结构名称是①______③______
（4）胚胎移植前需要对供受体牛进行______处理．移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是______．
（5）下列关于胚胎工程的叙述，正确的有______（不定项）
A．体外受精是指获能的精子和培养成熟的卵子在相应溶液中受精
B．受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植
C．早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清
D．试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术．
正确答案
解：（1）对供体要用促性腺激素处理，使其超数排卵．试管动物的培育过程包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植，即a→b→f→g．试管牛是由两性生殖细胞结合形成的受精卵发育而来的，属于有性生殖．
（2）利用PCR技术扩增DNA时需要一对引物，因此PCR中的TaqDNA聚合酶不能催化图2所示的反应．
（3）由以上分析可知，图中①是滋养层细胞，③是内细胞团．
（4）胚胎移植前需要对受体母牛进行同情发情处理，使胚胎移入相同的生理环境；移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是受体对植入胚胎基本上不发生免疫排斥反应．
（5）A、体外受精是指获能的精子和培养成熟的卵子在相应溶液中受精，A正确；
B、受精卵发育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行胚胎移植，B错误；
C、早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清，C正确；
D、试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，D正确．
故选：ACD．
故答案为：
（1）促性腺激素 abfg 有性
（2）不能 引物
（3）滋养层 内细胞团
（4）同期发情 受体对植入胚胎基本上不发生免疫排斥反应
（5）ACD
解析
解：（1）对供体要用促性腺激素处理，使其超数排卵．试管动物的培育过程包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植，即a→b→f→g．试管牛是由两性生殖细胞结合形成的受精卵发育而来的，属于有性生殖．
（2）利用PCR技术扩增DNA时需要一对引物，因此PCR中的TaqDNA聚合酶不能催化图2所示的反应．
（3）由以上分析可知，图中①是滋养层细胞，③是内细胞团．
（4）胚胎移植前需要对受体母牛进行同情发情处理，使胚胎移入相同的生理环境；移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是受体对植入胚胎基本上不发生免疫排斥反应．
（5）A、体外受精是指获能的精子和培养成熟的卵子在相应溶液中受精，A正确；
B、受精卵发育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行胚胎移植，B错误；
C、早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清，C正确；
D、试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，D正确．
故选：ACD．
故答案为：
（1）促性腺激素 abfg 有性
（2）不能 引物
（3）滋养层 内细胞团
（4）同期发情 受体对植入胚胎基本上不发生免疫排斥反应
（5）ACD
电影中，“蜘蛛侠”能产生高强度的蜘蛛丝，现实中的基因工程也创造出了“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域．请回答：
（1）为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需要从______ （基因组/cDNA）文库中获取，并与______ 等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成为表达载体；再通过______等方法，将表达载体导入羊的______，获得重组细胞．
（2）将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过______处理的受体母羊子宫内．因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加______．若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”，可将早期胚胎进行______处理．
（3）若所得到的“蜘蛛羊”（已知表达载体已进入细胞）乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，科学家为判断问题所在，应该用______的方法，先检测______，若已确认此步成功，则应该继续检测______．
正确答案
解：（1）cDNA文库是利用mRNA反转录获得的，除去了基因结构中内含子的干扰，实验容易成功．为让目的基因在羊的乳汁中表达，应在目的基因前加上羊的乳腺蛋白基因的启动子，构建成表达载体；基因表达载体常用显微注射法导入受精卵，获得重组细胞．
（2）胚胎移植时，要对受体进行同期发情处理，这样可以为胚胎移植入受体子宫提供相同的生理环境；早期胚胎的培养中，除基本营养成分外，还需要添加动物血清．使用胚胎分割移植技术，可一次产生两头转基因“蜘蛛羊”．
（3）表达载体已进入细胞，但乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，可能是蛛丝蛋白基因没有整合到染色体上，也可能是蛛丝蛋白没有表达，因此可先采用DNA分子杂交技术检测蛛丝蛋白基因是否整合到了染色体上，若已确认此步成功，则应该继续采用分子杂交技术检测蛛丝蛋白基因是否转录形成mRNA，以找出原因．
故答案为：
（1）cDNA 羊的乳腺蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵
（2）同期发情 动物血清 胚胎分割
（3）DNA分子杂交 蛛丝蛋白基因是否整合到了染色体上（或“是否在细胞中稳定存在”，或“是否被细胞降解或水解”等都可以） 是否转录出了蛛丝蛋白的mRNA
解析
解：（1）cDNA文库是利用mRNA反转录获得的，除去了基因结构中内含子的干扰，实验容易成功．为让目的基因在羊的乳汁中表达，应在目的基因前加上羊的乳腺蛋白基因的启动子，构建成表达载体；基因表达载体常用显微注射法导入受精卵，获得重组细胞．
（2）胚胎移植时，要对受体进行同期发情处理，这样可以为胚胎移植入受体子宫提供相同的生理环境；早期胚胎的培养中，除基本营养成分外，还需要添加动物血清．使用胚胎分割移植技术，可一次产生两头转基因“蜘蛛羊”．
（3）表达载体已进入细胞，但乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，可能是蛛丝蛋白基因没有整合到染色体上，也可能是蛛丝蛋白没有表达，因此可先采用DNA分子杂交技术检测蛛丝蛋白基因是否整合到了染色体上，若已确认此步成功，则应该继续采用分子杂交技术检测蛛丝蛋白基因是否转录形成mRNA，以找出原因．
故答案为：
（1）cDNA 羊的乳腺蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵
（2）同期发情 动物血清 胚胎分割
（3）DNA分子杂交 蛛丝蛋白基因是否整合到了染色体上（或“是否在细胞中稳定存在”，或“是否被细胞降解或水解”等都可以） 是否转录出了蛛丝蛋白的mRNA
基因疫苗是指编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答．某科研所计划利用基因疫苗，通过基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛．请回答下列问题：
（1）基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括目的基因，______，______，标记基因等．
（2）动物基因工程常用的受体细胞是______和______，因为该细胞的全能性高，一般用______法将目的基因导入受体细胞．
（3）欲检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上检测的方法及结果是从基因牛中提取______，用______杂交，如果出现杂交带，表明奶牛中出现了抗原蛋白，如果不出现杂交带，表明奶牛中未出现抗原蛋白．
（4）胚胎工程最后一道工序是胚胎移植，其实质是______．
（5）为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用什么样的胚胎进行分割？______．
（6）现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用______技术获得具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛．请简要叙述过程．______．
正确答案
解：（1）一个基因表达载体的组成除目的基因之外，还包括启动子，驱动基因转录出mRNA；终止子使转录在需要的地方停止下来；标记基因作用是为了鉴别受体细胞是否含有目的基因，从而进行筛选，如抗生素的抗性基因．
（2）受体是动物细胞，我们要选择全能性高的受精卵或胚胎干细胞，一般用显微注射法将目的基因导入．
（3）检测目的基因是否翻译成了蛋白质，分子水平的检测方法是抗原-抗体杂交，出现了杂交带表明出现了抗原蛋白．
（4）胚胎移植的实质是早期胚胎在相同的生理环境条件下空间位置的转移．
（5）胚胎分割时选择发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚，因为这个时期的胚胎细胞全能性高．
（6）利用体细胞核移植技术，可以获得体细胞克隆的动物，促进优良畜群的繁育．其过程为：取该转基因牛的体细胞进行体细胞核移植，培养获得大量的重组胚胎，再进行胚胎移植，就会得到大量具有口蹄疫免疫特性的高产克隆奶牛．
故答案为：
（1）启动子；终止子
（2）受精卵；胚胎干细胞；显微注射
（3）蛋白质；相应的抗体进行抗原--抗体
（4）早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
（5）发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚
（6）体细胞核移植；取该转基因牛的体细胞进行体细胞核移植，培养获得大量的重组胚胎，再进行胚胎移植，就会得到大量具有口蹄疫免疫特性的高产克隆奶牛
解析
解：（1）一个基因表达载体的组成除目的基因之外，还包括启动子，驱动基因转录出mRNA；终止子使转录在需要的地方停止下来；标记基因作用是为了鉴别受体细胞是否含有目的基因，从而进行筛选，如抗生素的抗性基因．
（2）受体是动物细胞，我们要选择全能性高的受精卵或胚胎干细胞，一般用显微注射法将目的基因导入．
（3）检测目的基因是否翻译成了蛋白质，分子水平的检测方法是抗原-抗体杂交，出现了杂交带表明出现了抗原蛋白．
（4）胚胎移植的实质是早期胚胎在相同的生理环境条件下空间位置的转移．
（5）胚胎分割时选择发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚，因为这个时期的胚胎细胞全能性高．
（6）利用体细胞核移植技术，可以获得体细胞克隆的动物，促进优良畜群的繁育．其过程为：取该转基因牛的体细胞进行体细胞核移植，培养获得大量的重组胚胎，再进行胚胎移植，就会得到大量具有口蹄疫免疫特性的高产克隆奶牛．
故答案为：
（1）启动子；终止子
（2）受精卵；胚胎干细胞；显微注射
（3）蛋白质；相应的抗体进行抗原--抗体
（4）早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
（5）发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚
（6）体细胞核移植；取该转基因牛的体细胞进行体细胞核移植，培养获得大量的重组胚胎，再进行胚胎移植，就会得到大量具有口蹄疫免疫特性的高产克隆奶牛
如图是转基因绿色荧光鼠的培育过程，据图回答相关问题：
（1）若需在短时间内获得较多的GFP基因，通常采用______技术．
（2）过程①是转基因技术的核心步骤，为使GFP基因在小鼠细胞中高效表达，需要把GFP基因片段正确插入表达载体的______和______之间．
（3）③过程在使用合成培养基进行培养时，通常需要加入______等天然成分．
（4）②过程通常采用的技术是______；在个体水平上检测GFP基因是否表达的方法是______．
（5）④过程通过______技术实现．科学家欲获得多个相同性状的绿色荧光小鼠，则应该选择发育良好、形态正常的桑椹胚或______，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割．
正确答案
解：（1）PCR技术能在短时间内合成大量的DNA分子，因此要在短时间内获得较多的GFP基因，通常采用PCR技术．
（2）①是基因表达载体的构建过程，该过程是转基因技术的核心步骤．基因表达载体的组成部分：启动子、目的基因、标记基因和终止子，为使GFP基因在小鼠细胞中高效表达，需要把GFP基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间．
（3）③是早期胚胎培养过程，该过程在使用合成培养基进行培养时，通常需要加入血清（或血浆）等天然成分．
（4）②是将目的基因导入受体细胞的过程，当受体细胞是动物细胞时，通常采用显微注射法；在个体水平上检测GFP基因是否表达的方法是小鼠是否发出绿色荧光．
（5）④表示胚胎移植过程．胚胎分割时，应该选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚．
故答案为：
（1）PCR
（2）启动子 终止子
（3）血清（或血浆）
（4）显微注射 小鼠是否发出绿色荧光
（5）胚胎移植 囊胚
解析
解：（1）PCR技术能在短时间内合成大量的DNA分子，因此要在短时间内获得较多的GFP基因，通常采用PCR技术．
（2）①是基因表达载体的构建过程，该过程是转基因技术的核心步骤．基因表达载体的组成部分：启动子、目的基因、标记基因和终止子，为使GFP基因在小鼠细胞中高效表达，需要把GFP基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间．
（3）③是早期胚胎培养过程，该过程在使用合成培养基进行培养时，通常需要加入血清（或血浆）等天然成分．
（4）②是将目的基因导入受体细胞的过程，当受体细胞是动物细胞时，通常采用显微注射法；在个体水平上检测GFP基因是否表达的方法是小鼠是否发出绿色荧光．
（5）④表示胚胎移植过程．胚胎分割时，应该选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚．
故答案为：
（1）PCR
（2）启动子 终止子
（3）血清（或血浆）
（4）显微注射 小鼠是否发出绿色荧光
（5）胚胎移植 囊胚
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