热门试卷

解：（1）荧光素酶基因可以人工合成，也可以从基因文库中获取．PCR技术的原理是DNA复制．

（2）限制酶具有特异性，是切割DNA的工具酶，主要从微生物中分离纯化出来．要获得目的基因必须在目的基因的两侧相应的酶切位点进行切割，图1中可以看出，BamHⅠ的酶切位点在目的基因的中间，故不可取；SmaⅠ的酶切位点只有一个，故不可取；根据表格可以看出，SmaⅠ的识别序列中含有MspⅠ的识别序列，因此要获得目的基因可用限制酶MspⅠ切割．

（3）标记基因的作用是将含有目的基因的细胞筛选出来．将目的基因导入动物细胞常用显微注射法．

（4）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．将转基因受体细胞培育成转基因植株常用植物组织培养技术．

故答案为：

（1）基因文库    DNA复制

（2）微生物    Msp1

（3）含有目的基因的细胞    显微注射法

（4）T-DNA    植物组织培养

解：（1）图中①～③表示动物细胞培养过程，该过程中，①一般经胰蛋白酶处理可以得到③；在培养③时要将其置于含95%空气加5%CO2混合气体的培养箱中，通入5%CO2的目的是维持培养液的PH．

（2）②为目的基因；PCR技术可在体外大量扩增目的基因；由一个④形成多个⑤的操作技术称为胚胎分割，操作对象是囊胚期的内细胞团，该过程中需要特别注意的问题是将内细胞团均等分割．

（3）基因工程的核心是构建基因表达载体，该过程首先需要用同一种限制酶切割含有目的基因的DNA片段和运载体，其次还需要用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA分子．

（4）从分子水平检测目的基因是否在受体细胞内成功表达的技术是抗原--抗体杂交；⑤-⑥表示胚胎移植过程，需要采用胚胎移植技术．

故答案为：

（1）胰蛋白酶   维持培养液的PH

（2）目的基因   PCR技术   胚胎分割   囊胚期的内细胞团   均等分割

（3）构建的基因表达载体   同一种限制性内切酶  DNA连接酶

（4）抗原--抗体杂交   胚胎移植

解：（1）图1的碱基排列顺序是：GGTTATGCGT，由此可知图中碱基序列应从下向上解读，根据已知的碱基序列可知从左向右四种碱基依次是ACGT，所以图2中碱基序列是GATGCGTTCG．

（2）可采用PCR技术体外扩增目的基因（干扰素基因）；构建基因表达载体时，首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子，其次还需要用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA分子．

（3）基因表达载体的构建是基因工程的核心内容．一个基因表达载体的组成，主要有目的基因、标记基因、启动子和终止子，其中标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．

（4）检测目的基因是否导入受体细胞的方法：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术，②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术．

故答案为：

（1）GATGCGTTCG

（2）PCR    限制酶、DNA连接酶

（3）基因表达载体的构建      为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来    

（4）DNA分子杂交   DNA与mRNA分子杂交

解：（1）①为获取目的基因的过程，该过程需使用限制酶，其特点是能够识别某种特定的脱氧核苷酸序列，并在特定的位点切割．

（2）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；④过程中需要采用动物细胞培养、早期胚胎培养和胚胎移植技术．

（3）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法．从个体水平上鉴定目的基因（抗虫基因）导入受体细胞后是否表达的过程：让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定其是否具有抗虫性状．

（4）本实验的目的是探究污染的微生物中是否有分解纤维素的细菌，并试图将它分离出来，可用只加入纤维素作为能源物质的培养基进行培养．

故答案为：

（1）能够识别某种特定的脱氧核苷酸序列，并在特定的位点切割

（2）显微注射技术    动物细胞培养   　早期胚胎培养技术  　胚胎移植　 

（3）农杆菌转化法    让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定其是否具有抗虫性状

（4）纤维素

解：（1）基因表达载体构建过程中，首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次需要DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．

（2）显微注射法是将目的基因导入动物细胞的最常用有效的方法．

（3）山羊受精卵一般要培养到囊胚或桑椹胚阶段，才能植入母体．

（4）将早期胚胎植入母体的技术称为胚胎移植．

（5）检测目的基因是否翻译形成蛋白质，常用抗原一抗体杂交法．

故答案为：

（1）限制酶和DNA连接酶 

（2）显微注射技术 

（3）囊胚或桑椹胚 

（4）胚胎移植 

（5）抗原一抗体杂交

解：（1）利用信使RNA为模板，合成DNA分子的过程属于逆转录，原料是四种脱氧核苷酸，所用的酶是逆转录酶．

（2）聚合酶链式反应技术即PCR技术可实现DNA分子的体外快速扩增，所以要以完整双链反义基因克隆成百上千的反义基因，常利用PCR技术来扩增．

（3）指导番茄合成PG的信使RNA的碱基序列是-A-U-C-C-A-G-G-U-C-，则根据碱基互补配对原则：A-T、U-A、C-G、G-C，则PG反义基因的这段碱基对序列是：

--T--A--G--G--T--C--C--A--G--

--A--T--C--C--A--G--G--T--C--．

（4）一个完整的基因表达载体包括：目的基因、启动子、终止子、标记基因．启动子位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，控制着转录的开始．

（5）将人工合成的反义基因导入番茄叶肉细胞，是将外源基因导入细胞内，属于基因重组．反义基因导入番茄叶肉细胞后，指导合成的最终产物是反义RNA，其与细胞原有mRNA（靶mRNA）互补形成双链RNA，阻止靶mRNA进一步翻译形成PG，从而达到抑制果实成熟的目的．

故答案为：

（1）脱氧（核糖）核苷酸   反（逆）转录酶   

（2）PCR

（3）-T-A-G-G-T-C-C-A-G-

-A-T-C-C-A-G-G-T-C-

（4）标记基因  RNA聚合酶

（5）基因重组  反义RNA

解：（1）图中C为目的基因和运载体（质粒）连接形成的重组DNA（重组质粒）；构建基因表达载体时，首先需用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次需用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．

（2）标记基因的作用是供重组DNA的鉴定和选择．

（3）检测LTP1基因在啤酒酵母菌中的表达的方法是检测转基因啤酒酵母能否产生LTP1蛋白．

故答案为：

（1）重组DNA（重组质粒）    DNA连接

（2）供重组DNA的鉴定和选择

（3）检测转基因啤酒酵母能否产生LTP1蛋白

解：（1）新型疫苗在免疫学中属于抗原，该疫苗由基因控制合成，化学本质是蛋白质．①表示基因表达载体的构建，具有黏性末端的目的基因与质粒（上有切口，表示已被限制酶切割）在DNA连接酶的作用下形成重组质粒．

（2）图中②过程是将重组质粒导入农杆菌，由于受体细胞是细菌，常用Ca2+处理使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，称为感受态细胞，以完成转化过程．

（3）图中③过程是让叶盘细胞脱分化形成愈伤组织，进而再经④再分化形成幼苗，此过程叫做植物组织培养；原理是植物细胞的全能性．

（4）检查转基因草莓果实提取液中有无相应抗原，采用抗原-抗体杂交的方法检测，如出现杂交带，表明已出现相应产物．

（5）乙肝病毒表面抗原基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为转化．

故答案为：

（1）抗原    蛋白质    　基因表达载体（重组质粒  重组DNA ）　

（2）CaCl2溶液（或Ca2+）　   　感受态

（3）再分化（错字不给分）　　细胞的全能性

（4）抗原-抗体杂交          

（5）转化

解：（1）第二步中，获取与“靶基因”同源的DNA片段使用的工具酶是限制酶，限制酶能够切割形成黏性末端，也能形成平末端．neoR基因由于能使靶基因失活，这样只有靶基因失活的干细胞才能在含新霉素的培养基上生存，所以neoR基因还起到了标记基因的作用．“靶基因失活”的含义是靶基因不能正常表达．

（2）将目的基因转移到动物细胞的方法一般为显微注射法．

（3）neoR基因即为新霉素抗性基因，发生同源区段互换的胚胎干细胞具有该基因，因此可以抗新霉素．则第四步中，该培养基要额外添加新霉素，以筛选出导入neoR基因成功的胚胎干细胞．

（4）从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠，运用到的生物技术有基因工程、细胞工程、胚胎工程等．

（3）上题中获得的基因敲除小鼠，可以用Aa基因型表示，即A表示失活靶基因．该小鼠自交，后代有AA、Aa、aa，其中只有aa能够直接用来研究基因功能．其它小鼠体内至少有一个正常的靶基因，也能表达性状，故不能得到靶基因的功能．

故答案为：

（1）限制酶   平    标记基因 靶基因不能正常表达

（2）显微注射技术

（3）新霉素

（4）细胞  胚胎

（5）    这些小鼠体内至少有一个正常的靶基因，也能表达性状．故不能得到靶基因的功能