- 基因工程的基本操作程序
- 共6244题
（1）图中涉及的现代生物技术有______、______、______（至少写三种）．
（2）小羊a、小羊b、小羊c的性状表现（填“相同”或“不同”）______，原因是______；
（3）若研究发现羊N细胞中线粒体发达，故而它的产奶率高，则小羊a会有这一优良性状吗？______，判断依据是______．
（4）有人设想将羊体细胞与牛体细胞进行融合，以获得新物种“羊-牛”，你认为依据目前的生物技术和理论能否实现这一构想？______．理由是______．
（5）2003年1月世界第一只克隆羊、年仅3岁的“多利”，因患老年羊常得的肺部感染疾病，研究人员不得不对它实施了“安乐死”，同时某些科学狂人宣布成功克隆了人“夏娃”，根据以上信息，谈谈你对克隆技术或克隆人的评价．______．
正确答案
解：（1）图中涉及的现代生物技术有基因工程、核移植、胚胎移植、胚胎分割、动物细胞培养．
（2）小羊a、小羊b和小羊c都是由同一个重组细胞发育形成的，所以这些个体的性状表现相同．
（3）线粒体中的基因一般通过细胞质传递给后代，小羊a的细胞质主要来自羊O，故小羊a不会有羊N产奶率高这一优良性状．
（4）因为高度分化的动物体细胞的全能性受到限制，由羊体细胞和牛体细胞融合得到的杂交细胞不能正常发育成完整个体，即使得到一个个体也不能成为一个新物种，因为它不能正常生殖，所以“将羊体细胞与牛体细胞进行融合，以获得新物种‘羊-牛’”这一构想不能实现．
（5）我认为克隆人是不可以的：一是现在技术还没有达到足够高的程度；二是克隆人一旦成功，将严重威胁着人类社会的稳定，打破原有的人际关系；三是影响人类社会的进步
故答案为：
（1）基因工程、核移植、胚胎移植、胚胎分割、动物细胞培养
（2）相同 这些个体都是由同一个重组细胞发育形成的
（3）不会 线粒体中的基因一般通过细胞质传递给后代，小羊a的细胞质主要来自羊O
（4）不能 因为高度分化的动物体细胞的全能性受到限制，由羊体细胞和牛体细胞融合得到的杂交细胞不能正常发育成完整个体，即使得到一个个体也不能成为一个新物种，因为它不能正常生殖（答案合理即可）
（5）我认为克隆人是不可以的：一是现在技术还没有达到足够高的程度；二是克隆人一旦成功，将严重威胁着人类社会的稳定，打破原有的人际关系；三是影响人类社会的进步
解析
解：（1）图中涉及的现代生物技术有基因工程、核移植、胚胎移植、胚胎分割、动物细胞培养．
（2）小羊a、小羊b和小羊c都是由同一个重组细胞发育形成的，所以这些个体的性状表现相同．
（3）线粒体中的基因一般通过细胞质传递给后代，小羊a的细胞质主要来自羊O，故小羊a不会有羊N产奶率高这一优良性状．
（4）因为高度分化的动物体细胞的全能性受到限制，由羊体细胞和牛体细胞融合得到的杂交细胞不能正常发育成完整个体，即使得到一个个体也不能成为一个新物种，因为它不能正常生殖，所以“将羊体细胞与牛体细胞进行融合，以获得新物种‘羊-牛’”这一构想不能实现．
（5）我认为克隆人是不可以的：一是现在技术还没有达到足够高的程度；二是克隆人一旦成功，将严重威胁着人类社会的稳定，打破原有的人际关系；三是影响人类社会的进步
故答案为：
（1）基因工程、核移植、胚胎移植、胚胎分割、动物细胞培养
（2）相同 这些个体都是由同一个重组细胞发育形成的
（3）不会 线粒体中的基因一般通过细胞质传递给后代，小羊a的细胞质主要来自羊O
（4）不能 因为高度分化的动物体细胞的全能性受到限制，由羊体细胞和牛体细胞融合得到的杂交细胞不能正常发育成完整个体，即使得到一个个体也不能成为一个新物种，因为它不能正常生殖（答案合理即可）
（5）我认为克隆人是不可以的：一是现在技术还没有达到足够高的程度；二是克隆人一旦成功，将严重威胁着人类社会的稳定，打破原有的人际关系；三是影响人类社会的进步
科学家从某些能无限增殖的细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因（prG）．该基因能激发许多动物细胞的分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景．请回答以下相关问题：
（1）若用细胞融合技术制备单克隆抗体，为获得能产生特定抗体小鼠B淋巴细胞，必须对实验小鼠进行______处理．诱导融合时常用的物理方法是______．
（2）有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图1所示：请回答：
①酶A是指______．
②对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是______：Ⅲ代表的细胞具有的特点是______、______．
（3）也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体．试用相关的图示及文字表示该过程（如图2）：
______．
正确答案
解：（1）若用细胞融合技术制备单克隆抗体，为获得能产生特定抗体小鼠B淋巴细胞，必须对实验小鼠进行抗原免疫处理．诱导融合时常用的物理方法是电融合．
（2）在基因工程中，获取目的基因和质粒需要使用限制酶，然后在DNA连接酶的作用下形成重组质粒；基因工程中，将目的基因导入受体细胞后，还需要目的基因的检测和鉴定，其目的是检测目的基因是否在受体细胞中成功表达．成功导入含有prG基因的细胞中，由于prG基因具有调控细胞无限增殖的功能，故Ⅲ中的细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体．
（3）由于调控细胞无限增殖的prG基因位于细胞质中，因此若要采用细胞核移植获得单克隆抗体时，只能讲浆细胞的细胞核移入到含有prG基因的细胞质中，获得重组细胞，最终获得单克隆抗体．
故答案为：
（1）抗原免疫 电融合
（2）①限制性内切酶
②检测目的基因在受体细胞中是否进行了表达（或检测受体细胞是否显示出目的基冈控制的性状） 既能无限增殖又能产生专一抗体
（3）
解析
解：（1）若用细胞融合技术制备单克隆抗体，为获得能产生特定抗体小鼠B淋巴细胞，必须对实验小鼠进行抗原免疫处理．诱导融合时常用的物理方法是电融合．
（2）在基因工程中，获取目的基因和质粒需要使用限制酶，然后在DNA连接酶的作用下形成重组质粒；基因工程中，将目的基因导入受体细胞后，还需要目的基因的检测和鉴定，其目的是检测目的基因是否在受体细胞中成功表达．成功导入含有prG基因的细胞中，由于prG基因具有调控细胞无限增殖的功能，故Ⅲ中的细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体．
（3）由于调控细胞无限增殖的prG基因位于细胞质中，因此若要采用细胞核移植获得单克隆抗体时，只能讲浆细胞的细胞核移入到含有prG基因的细胞质中，获得重组细胞，最终获得单克隆抗体．
故答案为：
（1）抗原免疫 电融合
（2）①限制性内切酶
②检测目的基因在受体细胞中是否进行了表达（或检测受体细胞是否显示出目的基冈控制的性状） 既能无限增殖又能产生专一抗体
（3）
（1）Klenow酶是一种______酶，合成的双链DNA有______个碱基对．
（2）获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证．
①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它______．
②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是______．
③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有______．
（3）经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是______．
（4）上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是______．
正确答案
解：（1）由图可得知，是以DNA一条链为模板、4种游离的脱氧核糖核苷酸为原料合成双链DNA，此过程所用的酶是DNA聚合酶．合成的双链DNA含有的碱基对有（72-18）×2+18=126个碱基对．
（2）①大肠杆菌是原核生物，具有繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少等特征，所以常将大肠杆菌作为理想的受体细胞．
②限制酶具有特异性，一种限制酶只识别一定的脱氧核苷酸序列，切割特定的位点．为了防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接或保证目的基因和载体定向连接，将获得的双链DNA经EcoRI和BamHI双切割．
③重组质粒中含有标记基因，标记基因可以鉴别受体细胞中是否含有目的基因．
（3）如上图，在合成DNA双链时，如果合成的核苷酸单链较长，容易发生缺失碱基的现象．会引起最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列的可能．
（4）制备该新型降钙素时，先从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，之后改造DNA分子，最后生成新型降钙素，这是蛋白质工程的具体过程．
故答案为：
（1）DNA聚合酶 126
（2）①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少
②保证目的基因和载体定向连接（防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接）
③标记基因
（3）合成的核苷酸单链依然较长，产生缺失碱基的现象
（4）蛋白质工程
解析
解：（1）由图可得知，是以DNA一条链为模板、4种游离的脱氧核糖核苷酸为原料合成双链DNA，此过程所用的酶是DNA聚合酶．合成的双链DNA含有的碱基对有（72-18）×2+18=126个碱基对．
（2）①大肠杆菌是原核生物，具有繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少等特征，所以常将大肠杆菌作为理想的受体细胞．
②限制酶具有特异性，一种限制酶只识别一定的脱氧核苷酸序列，切割特定的位点．为了防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接或保证目的基因和载体定向连接，将获得的双链DNA经EcoRI和BamHI双切割．
③重组质粒中含有标记基因，标记基因可以鉴别受体细胞中是否含有目的基因．
（3）如上图，在合成DNA双链时，如果合成的核苷酸单链较长，容易发生缺失碱基的现象．会引起最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列的可能．
（4）制备该新型降钙素时，先从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，之后改造DNA分子，最后生成新型降钙素，这是蛋白质工程的具体过程．
故答案为：
（1）DNA聚合酶 126
（2）①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少
②保证目的基因和载体定向连接（防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接）
③标记基因
（3）合成的核苷酸单链依然较长，产生缺失碱基的现象
（4）蛋白质工程
回答下列有关遗传信息传递和表达的问题．
如图表示利用致病病毒M的表面蛋白基因和无害病毒N，通过基因工程制作重组M病毒疫苗的部分过程．其中①～⑤表示操作流程，a～h表示分子或结构．据图回答问题．
（1）基因工程除了微生物基因工程外，还有植物基因工程、动物基因工程．在图所示过程中，获取目的基因的步骤是流程______（用图中编号回答）；在流程③中必需用到的酶有限制性核酸内切酶和______酶．
（2）下列关于质粒运载体的说法正确的是______（多选）
A．使用质粒运载体是为了使目的基因在宿主细胞中稳定存在（避免被分解）
B．质粒运载体只有在与目的基因重组后才能进入宿主细胞
C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达
F．没有限制酶就无法使用质粒运载体
（3）据图比较结构g和结构h的物质组成的异同，并解释产生差异的原因：相同点：______相同；不同点：______不同．差异的原因：因为g导入受体细胞后，目的基因得以表达，合成了______．
正确答案
解：（1）由以上分析可知，图中流程①、②是获取目的基因的步骤；流程③是基因表达载体的构建过程，首先需要限制酶切割含有目的基因的DNA和运载体，其次还需用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．
（2）A、若直接将目的基因片段导入受体细胞，则很容易被分解失效，只有整合后随运载体一起友好的寄居在受体细胞，A正确；
B、无论与目的基因重组与否，质粒运载体都能进入宿主细胞，B错误；
C、质粒通常是来自细菌，病毒没有质粒，因此质粒运载体可能是从细菌的DNA改造形成的，C错误；
D、质粒的本质是小型环状DNA，其复制和表达都遵循中心法则，D正确；
E．质粒可独立的在受体细胞表达，E错误；
F、质粒作为运载体，必须有限制酶的切割位点，才能与目的基因整合重组，F正确．
故选：ADF．
（3）因为g导入受体细胞后，目的基因得以表达，合成了致病病毒M的表面蛋白，因此结构g和结构h的遗传物质（DNA）相同，但表面蛋白质不同．
故答案为：
（1）①、②DNA连接酶
（2）A、D、F
（3）遗传物质（DNA） 表面蛋白质 致病病毒M的表面蛋白
解析
解：（1）由以上分析可知，图中流程①、②是获取目的基因的步骤；流程③是基因表达载体的构建过程，首先需要限制酶切割含有目的基因的DNA和运载体，其次还需用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．
（2）A、若直接将目的基因片段导入受体细胞，则很容易被分解失效，只有整合后随运载体一起友好的寄居在受体细胞，A正确；
B、无论与目的基因重组与否，质粒运载体都能进入宿主细胞，B错误；
C、质粒通常是来自细菌，病毒没有质粒，因此质粒运载体可能是从细菌的DNA改造形成的，C错误；
D、质粒的本质是小型环状DNA，其复制和表达都遵循中心法则，D正确；
E．质粒可独立的在受体细胞表达，E错误；
F、质粒作为运载体，必须有限制酶的切割位点，才能与目的基因整合重组，F正确．
故选：ADF．
（3）因为g导入受体细胞后，目的基因得以表达，合成了致病病毒M的表面蛋白，因此结构g和结构h的遗传物质（DNA）相同，但表面蛋白质不同．
故答案为：
（1）①、②DNA连接酶
（2）A、D、F
（3）遗传物质（DNA） 表面蛋白质 致病病毒M的表面蛋白
应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品．请据图回答下列问题
（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，①过程需要的工具酶______，②过程常用的方法是______．
（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有______．③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用胚胎分割和______技术，培育出多头相同的转基因犊牛
正确答案
解：（1）图中①表示基因表达载体的构建过程，首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．②表示将目的基因导入动物受精卵的过程，而将目的基因导入动物细胞的最有效的方法是显微注射法．
（2）在构建的相应基因表达载体中，人抗血栓基因的首端必须含有使其仅能在山羊乳腺细胞中特异性表达的启动子，它是RNA聚合酶识别和结合点部位．来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此为了获得多头相同的转基因动物，人们可以采用胚胎分割移植技术．
故答案为：
（1）限制酶、DNA连接酶 显微注射法
（2）（乳腺蛋白基因的）启动子 胚胎移植
解析
解：（1）图中①表示基因表达载体的构建过程，首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．②表示将目的基因导入动物受精卵的过程，而将目的基因导入动物细胞的最有效的方法是显微注射法．
（2）在构建的相应基因表达载体中，人抗血栓基因的首端必须含有使其仅能在山羊乳腺细胞中特异性表达的启动子，它是RNA聚合酶识别和结合点部位．来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此为了获得多头相同的转基因动物，人们可以采用胚胎分割移植技术．
故答案为：
（1）限制酶、DNA连接酶 显微注射法
（2）（乳腺蛋白基因的）启动子 胚胎移植
酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可作食用、药用等，是提取核苷酸、三磷酸腺苷等多种生化产品的原料，还可用于生产维生素、氨基酸等．科学家将大麦细胞中的使啤酒产生丰富泡沫的LTPl基因植入啤酒酵母菌中，使其产生LTPl蛋白，酿出泡沫丰富的啤酒，具体的操作过程如下：
请据图回答问题：
（1）LTPl基因与B在体外拼接时除了需要使用限制酶，还需要的工具是______．C中除了LTPl基因和标记基因外，还应包含______等．
（2）有C导入的酵母菌分别在含有青霉素和四环素的两种______（从用途上分类）培养基上的生长情况是______．
（3）在酒精发酵时罐内温度一般应控制为______，如何检测LTPl基因在啤酒酵母菌中是否表达？______．
正确答案
解：（1）图中C为目的基因和运载体（质粒）连接形成的重组DNA（重组质粒）；构建基因表达载体时，首先需用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次需用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．C中除了LTPl基因和标记基因外，还应包含启动子、终止子、复制原点等．
（2）由于目的基因插入了质粒中的抗四环素基因中间，所以重组质粒中的抗四环素基因不能表达．将有C导入的酵母菌分别在含有青霉素和四环素的两种选择培养基上培养，则生长情况是在含有青霉素的培养基上能存活，但在含有四环素的培养基上不能存活．
（3）在酒精发酵时罐内温度一般应控制为18-25℃．通过看啤酒泡沫丰富程度，检验转基因啤酒酵母菌能否产生LTPl蛋白等方法来检测LTPl基因在啤酒酵母菌中是否表达．
故答案为：
（1）DNA连接酶 启动子、终止子、复制原点
（2）选择
（3）18-25℃看啤酒泡沫丰富程度，检验转基因啤酒酵母菌能否产生LTPl蛋白
解析
解：（1）图中C为目的基因和运载体（质粒）连接形成的重组DNA（重组质粒）；构建基因表达载体时，首先需用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次需用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．C中除了LTPl基因和标记基因外，还应包含启动子、终止子、复制原点等．
（2）由于目的基因插入了质粒中的抗四环素基因中间，所以重组质粒中的抗四环素基因不能表达．将有C导入的酵母菌分别在含有青霉素和四环素的两种选择培养基上培养，则生长情况是在含有青霉素的培养基上能存活，但在含有四环素的培养基上不能存活．
（3）在酒精发酵时罐内温度一般应控制为18-25℃．通过看啤酒泡沫丰富程度，检验转基因啤酒酵母菌能否产生LTPl蛋白等方法来检测LTPl基因在啤酒酵母菌中是否表达．
故答案为：
（1）DNA连接酶 启动子、终止子、复制原点
（2）选择
（3）18-25℃看啤酒泡沫丰富程度，检验转基因啤酒酵母菌能否产生LTPl蛋白
图1表示应用现代生物技术制备H7N9病毒单克隆抗体的流程．回答下列问题：
（1）①过程表示______；②过程用到的工具酶的作用部位是图2中的______（填字母）．
（2）构建基因表达载体时，目的基因的首端必须含有______，以利于目的基因的表达．
（3）从分子水平上鉴定目的基因是否转录可采用______技术；对于转基因成功的细胞I还要进行培养和______检测，经多次筛选从而得到符合要求细胞Ⅱ．
（4）若要预防H7N9禽流感，可用图中的______作为疫苗．
（5）传统农业中，植物秸秆往往是通过焚烧以便使其中的______还田，该做法的最大缺点是环境污染；而现代农业中，植物秸秆除作为禽畜的饲料外，还可以经过微生物产生的______酶水解，最终生成葡萄糖，进而转化成乙醇作为燃料．在充分利用能量、减少环境污染的同时，通过饲养家禽、家畜，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，主要体现了生态工程的______原理．
正确答案
解：（1）图中①表示逆转录过程；②表示目的基因的获取过程，该过程需要用限制酶切割特定位点之间的磷酸二酯键，即图中的b．
（2）基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因，其中启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始．
（3）从分子水平上鉴定目的基因的转录产物RNA，采用的方法是DNA分子杂交技术；对于转基因成功的细胞还要进行克隆化培养和抗体检测，才能获得足量所需要的细胞．
（4）疫苗为毒性弱的抗原，因此要预防H7N9禽流感，可以用图中的抗原蛋白作为疫苗．
（5）传统农业中，植物秸秆往往是通过焚烧以便使其中的无机盐还田，该做法的最大缺点是环境污染；而现代农业中，植物秸秆除作为禽畜的饲料外，还可以经过微生物产生的纤维素酶水解，最终生成葡萄糖，进而转化成乙醇作为燃料．在充分利用能量、减少环境污染的同时，通过饲养家禽、家畜，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，主要体现了生态工程的整体性原理．
故答案为：
（1）逆转录 b
（2）启动子
（3）分子杂交 抗体
（4）抗原蛋白
（5）无机盐 纤维素 整体性
解析
解：（1）图中①表示逆转录过程；②表示目的基因的获取过程，该过程需要用限制酶切割特定位点之间的磷酸二酯键，即图中的b．
（2）基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因，其中启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始．
（3）从分子水平上鉴定目的基因的转录产物RNA，采用的方法是DNA分子杂交技术；对于转基因成功的细胞还要进行克隆化培养和抗体检测，才能获得足量所需要的细胞．
（4）疫苗为毒性弱的抗原，因此要预防H7N9禽流感，可以用图中的抗原蛋白作为疫苗．
（5）传统农业中，植物秸秆往往是通过焚烧以便使其中的无机盐还田，该做法的最大缺点是环境污染；而现代农业中，植物秸秆除作为禽畜的饲料外，还可以经过微生物产生的纤维素酶水解，最终生成葡萄糖，进而转化成乙醇作为燃料．在充分利用能量、减少环境污染的同时，通过饲养家禽、家畜，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，主要体现了生态工程的整体性原理．
故答案为：
（1）逆转录 b
（2）启动子
（3）分子杂交 抗体
（4）抗原蛋白
（5）无机盐 纤维素 整体性
多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损．成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜．利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期．科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图．据图回答下列问题：
（1）若已获取PG的mRNA，可通过______获取PG基．
（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有______的培养基进行筛选．
（3）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用______技术；其中，愈伤组织经______形成完整植株．
（4）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，通过观察细胞是否发生______现象来鉴别细胞壁是否再生．
正确答案
解：（1）若已获取PG的mRNA，可通过逆转录法获取PG基．
（2）由图可知，标记基因是卡那霉素抗性基因，因此用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有卡那霉素的培养基进行筛选．
（3）将转基因番茄细胞培育成完整的植株还需要采用植物组织培养技术；该技术包括脱分化和再分化两个步骤，其中愈伤组织经再分化形成完整植株．
（4）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，通过观察细胞是否发生质壁分离现象来鉴别细胞壁是否再生．
故答案为：
（1）逆转录法
（2）卡那霉素
（3）植物组织培养再分化（或细胞增殖与分化）
（4）质壁分离
解析
解：（1）若已获取PG的mRNA，可通过逆转录法获取PG基．
（2）由图可知，标记基因是卡那霉素抗性基因，因此用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有卡那霉素的培养基进行筛选．
（3）将转基因番茄细胞培育成完整的植株还需要采用植物组织培养技术；该技术包括脱分化和再分化两个步骤，其中愈伤组织经再分化形成完整植株．
（4）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，通过观察细胞是否发生质壁分离现象来鉴别细胞壁是否再生．
故答案为：
（1）逆转录法
（2）卡那霉素
（3）植物组织培养再分化（或细胞增殖与分化）
（4）质壁分离
利用转基因奶牛乳腺生物反应器可生产人的生长激素，根据如图回答有关问题．
（1）基因表达载体的构建需要用到的工具酶包括：______、______．基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有______、______以及标记基因等．
（2）在体外受精前，要对精子进行______处理．
（3）图中①过程常采用______技术，图中②过程的培养液成分比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等成分，以及______等物质．
正确答案
解：（1）构建基因表达载体时，首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次还需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（2）在体外受精前，要对精子进行获能处理．
（3）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；图中②为早期胚胎培养过程，该过程的培养液成分比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等成分，以及动物血清等物质．
故答案为：
（1）限制（性核酸内切）酶 DNA连接酶 启动子 终止子
（2）获能
（3）显微注射 动物血清
解析
解：（1）构建基因表达载体时，首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次还需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（2）在体外受精前，要对精子进行获能处理．
（3）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；图中②为早期胚胎培养过程，该过程的培养液成分比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等成分，以及动物血清等物质．
故答案为：
（1）限制（性核酸内切）酶 DNA连接酶 启动子 终止子
（2）获能
（3）显微注射 动物血清
过去一年中，全球范围内的转基因种植呈现进一步增长，据国际农业生物技术应用服务组织发布的《全球生物技术/转基因作物使用情况研究》报告，2013年全球转基因作物种植面积比上年增加500万公顷，其中中国种植面积位居世界第六．
（1）与诱变育种、杂交育种相比，通过基因工程培育新品种的主要优点是______．基因工程的基本步骤包括目的基因的获取、______、______、目的基因的检测与鉴定．例如：科学家们正在利用一些可以调节______的基因，来提高农作物的抗盐碱和抗干旱的能力．
（2）据中国之声《央广新闻》报道，随着日前某知名快消企业被指其饮料中含转基因成分，有关转基因食品安全性的争论再度甚嚣尘上，著名主持人崔永元和方舟子的论战也还在继续．请举一例说明转基因食品在安全上的可能出现的问题：______．
（3）除了基因工程育种外还可以用植物组织培养技术来快速繁殖优良品种，这种技术叫做______．在用该技术培育无病毒草莓苗时，一般选取______作为外植体，其选择的依据是______．
正确答案
解：（1）诱变育种具有不定向性，杂交育种局限于同种生物之间，因此与诱变育种和杂交育种相比，采用基因工程技术培育新品种的优点是：目的性强，可克服远缘杂交不亲和的障碍；基因工程的操作步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定；在基因工程中，科学家可以将一些调节细胞渗透压的基因导入植物细胞，来提高农作物的抗盐碱和抗干旱的能力．
（2）转基因食品在安全上可能出现的问题：出现新的过敏原；出现滞后效应；转基因农作物所表达的某些蛋白质可能会影响人的免疫系统等．
（3）得用植物组织培养技术来快速繁殖优良品种的技术叫微型繁殖技术（快速繁殖技术）；由于植物分生区附近（如茎尖、根尖）病毒少甚至无病毒，因此常用茎尖等分生区组织作为外植体培养获得无病毒植株．
故答案为：
（1）目的性强，可克服远缘杂交不亲和的障碍（其他合理答案均可） 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 细胞渗透压
（2）出现新的过敏原等（担心出现滞后效应，转基因农作物所表达的某些蛋白质可能会影响人的免疫系统）
（3）微型繁殖技术（快速繁殖技术） 茎尖 茎尖的病毒少，甚至无病毒
解析
解：（1）诱变育种具有不定向性，杂交育种局限于同种生物之间，因此与诱变育种和杂交育种相比，采用基因工程技术培育新品种的优点是：目的性强，可克服远缘杂交不亲和的障碍；基因工程的操作步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定；在基因工程中，科学家可以将一些调节细胞渗透压的基因导入植物细胞，来提高农作物的抗盐碱和抗干旱的能力．
（2）转基因食品在安全上可能出现的问题：出现新的过敏原；出现滞后效应；转基因农作物所表达的某些蛋白质可能会影响人的免疫系统等．
（3）得用植物组织培养技术来快速繁殖优良品种的技术叫微型繁殖技术（快速繁殖技术）；由于植物分生区附近（如茎尖、根尖）病毒少甚至无病毒，因此常用茎尖等分生区组织作为外植体培养获得无病毒植株．
故答案为：
（1）目的性强，可克服远缘杂交不亲和的障碍（其他合理答案均可） 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 细胞渗透压
（2）出现新的过敏原等（担心出现滞后效应，转基因农作物所表达的某些蛋白质可能会影响人的免疫系统）
（3）微型繁殖技术（快速繁殖技术） 茎尖 茎尖的病毒少，甚至无病毒
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