热门试卷

解：（1）由以上分析可知，试管牛E和克隆牛G的培育过程中都必须用到动物细胞培养和胚胎移植技术．

（2）受精作用激活次级卵母细胞完成减数第二次分裂．

（3）克隆牛G的乳汁中含有人的α-抗胰蛋白酶，这说明人的α-抗胰蛋白酶基因成功表达了．

（4）培育试管牛E时需对母牛B和母牛D注射孕激素，其目的是使母牛B和母牛D同期发情，以便将胚胎移至母牛D的子宫内．

故答案为：

（1）动物细胞培养     胚胎移植     

（2）受精

（3）人的α-抗胰蛋白酶基因        

（4）孕       使其同期发情

解：（1）②是基因表达载体的构建过程，该过程中首先需要用同种限制酶切割荧光蛋白基因和质粒，以产生相同的黏性末端．酶Ⅰ（识别序列和切点是-G↓GATCC-）和酶Ⅱ（识别序列和切点是-↓GATC-）的识别序列不同，但两者切割后形成的黏性末端相同，因此用这两种酶切割获得的目的基因和质粒的黏性末端能在DNA连接酶的作用下连接起来．

（2）将重组质粒导入动物细胞常用显微注射法．

（3）将猪胎儿成纤维细胞核导入到去核的卵母细胞中的技术叫动物细胞核移植．猪胎儿成纤维细胞不具有全能性，因此不能直接将猪胎儿成纤维细胞培育成胚胎．

（4）胚胎移植时，应该选择桑椹胚或囊胚期的胚胎进行．为保证胚胎移植到相同的生理环境，在胚胎移植时，需对供体母猪和受体母猪进行同情发情处理．

故答案为：

（1）限制酶     能     这两种酶切割形成的黏性末端是相同的

（2）显微注射法

（3）动物细胞核移植    猪胎儿成纤维细胞不具有全能性

（4）囊胚期或桑椹胚期    同情发情

解：（1）PCR方法扩增目的基因的过程中，需要进行高温解链过程，因此使用的DNA聚合酶具有耐高温的特性．通过PCR技术扩增目的基因前，需要根据这两个基因的一段已知核苷酸序列来合成引物．

（2）耐高温的DNA分子中通常含有G与C碱基比例大，因为它们之间形成三个氢键，因此稳定性强．引物B中含C与G的碱基对较多，可采用较高的退火温度．

（3）多种限制酶切割，形成不同的切割位点，所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列就没有专一性要求．

（4）植物基因工程中常用农杆菌做受体细胞．

（5）据图分析，用EcoRI酶和SmaI酶切割质粒产生了 M、N两个片段，如图I-②过程只能产生一种DNA片断．

（6）构建重组DNA分子所用的限制性内切酶和DNA连接酶分别作用于图中的a、a处，即磷酸二酯键．

（7）若将目的基因成功导入马铃薯细胞后通常需用到植物组织培养技术得到马铃薯植株．该技术的核心步骤是脱分化与再分化．

（8）马铃薯块茎合成淀粉时需要酶A的催化，若要获得马铃薯块茎生物反应器，则在构建动物致病菌的抗原基因表达载体时，应选择酶A基因的启动子．

故答案为：

（1）耐高温     引物     

（2）引物对B         

（3）否

（4）农杆菌         

（5）1            

（6）a、a

（7）植物组织培养         脱分化

（8）酶A

解：（1）图示过程为将发光水母的绿色荧光蛋白基因进行切割，然后与质粒重组后导入兔的体细胞中，再利用一定的技术培养为荧光克隆兔．可见，该过程中绿色荧光蛋白基因属于目的基因．

（2）目前获取目的基因的常用方法为从基因文库中获取和利用PCR技术扩增．

（3）RNA聚合酶的结合位点是启动子．

（4）②过程为筛选出具有目的基因的细胞，比较简便的方法为在细胞水平上筛选出能够发出绿色荧光的细胞．

（5）在细胞核移植过程中一般利用去核后的卵细胞作为受体，因为卵细胞中含有能使体细胞的核基因表达的物质，它的全能性大于体细胞．

（6）胚胎移植时，需对代孕母体用激素进行同期发情处理，以保证胚胎移植入相同的生理环境．

（7）性激素对下丘脑和垂体分泌相关的激素存在负反馈调节，因此为了从乙兔体内一次获得多个卵细胞，往往需要向乙兔体内注入的是促性腺激素，而不是性激素，原因是通过负反馈调节会抑制下丘脑和垂体的活动，从而导致相关激素分泌量下降，进而引起自身性激素分泌量减少，影响排卵．

案为：

（1）目的         

（2）从基因文库中获取     利用PCR技术扩增    

（3）启动子

（4）能否发出绿色荧光   

（5）卵细胞中含有能使体细胞的核基因表达的物质（或卵细胞的全能性大于体细胞）    

（6）同期发情     

（7）负反馈

解：（1）对供体要用促性腺激素处理，使其超数排卵．精子则要用一定浓度的肝素或钙离子载体A23187进行获能处理．

（2）科学家将乙肝病毒表面抗原基因与牛的乳腺蛋白基因启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射技术等方法导入到牛的受精卵中，最终培育出能在乳汁中含乙肝病毒表面抗原的转基因牛D．为了检测目的基因是否导入受体细胞，我们常选用图中①滋养层细胞来做检测；检测目的基因是否导入受体细胞常用DNA分子杂交技术．

（3）f为动物体细胞核移植过程．

（4）c为胚胎移植过程，该过程中的胚胎一般培育到桑椹胚或囊胚．d为胚胎分割过程，该过程要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后的胚胎的恢复和进一步的发育．

故答案为：

（1）促性腺   肝素

（2）受精卵   ①DNA分子杂交技术

（3）动物体细胞核移植

（4）桑椹胚或囊胚    内细胞团均等分割

解：（1）在基因工程中，A→B为PCR技术，利用的原理是DNA复制．

（2）加热至94℃的目的是使DNA中的氢键键断裂，即高温解链，其代替了DNA复制中的解旋酶的功能．

（4）目的基因导入绵羊受体细胞常用显微注射技术．

（5）B→D为抗虫棉的培育过程，目的基因导入植物细胞中常用农杆菌转化法，要确定目的基因（抗虫基因）导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，在个体生物学水平上的鉴定可以让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定性状．

故答案为：

（1）PCR  DNA复制

（2）氢键

（4）显微注射

（5）农杆菌转化法       让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定性状

解：（1）检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因常用DNA分子杂交技术；从个体水平检测所得植株是否具有抗虫特性，需要做抗虫接种实验．

（2）植物细胞原生质体融合后要进行筛选，目的是要获得杂种细胞进行组织培养．在植物组织培养过程中，由于培养的细胞一直处于不断的分生状态，容易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变，但基因突变具有多害少利性，因此可以对愈伤组织进行一定处理后，从中筛选出对人们有用的突变体（具有优良性状的突变体），以培育新品种．

（3）单克隆抗体制备过程中，首先要用选项培养基对融合的细胞进行筛选，之后还需进行克隆化培养和抗体检测，最终选择出的细胞具有既能大量繁殖、又能产生专一抗体的特点．

（4）在胚胎移植时，首先要对供、受体进行选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；胚胎移植后，要对受体进行是否妊娠的检查．

故答案为：

（1）DNA分子杂交   抗虫接种实验

（2）杂种细胞   对人们有用的突变体（具有优良性状的突变体）

（3）选择培养基    既能大量繁殖、又能产生专一抗体

（4）供、受体 妊娠

解：该基因用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp三种长度的DNA片段，说明在正常人体内BamHⅠ的识别序列有2个；用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp后，再用EcoRⅠ再次切割得到100bp，300bp，150bp，50bp，200bp，说明400bp被切割成100bp，300bp，其中一个200bp被切割成150bp，50bp，可见EcoRⅠ识别序列也有2个．患者体内获取的这段基因，用BamHⅠ切割得到的区段变为400bp，400bp，用EcoRⅠ再次切割得到100bp，300bp，150bp，250bp，说明有一个BamHⅠ识别序列发生了基因突变，不能被BamHⅠ切割．

故答案为：

2个     2个        基因突变

解：（1）植物A和D对草甘膦敏感，B和E对草甘膦天然具有抗性，C和F则经过了转基因处理，所以A-C浇清水，都能健康成长；F虽经过了转基因处理，但是否成功还未知，所以D-F浇的水中含有草甘膦，D肯定不能健康成长，E肯定能健康成长，F未知．因此，肯定能健康成长的是ABCE．

（2）要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株，则必须要用含草甘膦的选择培养基培养大肠杆菌．

（3）基因表达载体的组成包括复制原点、启动子、终止子、标记基因和目的基因．

（4）用BamHⅠ切割会破坏目的基因，用MboⅠ切割也会破坏目的基因，因此要用酶切法获得目的基因，最应选择的限制酶是MspⅠ和SmaⅠ，这样既可获得目的基因，也可以防止目的基因与运载体反向链接．

（5）将目的基因导入受体细胞常用农杆菌转化法．若EPSPS基因已被成功转移到植物F中，但植物F仍没有表现出抗性，可能的原因目的基因没有成功表达或表达的产物失活．

故答案为：

（1）ABCE     

（2）草甘膦   

（3）标记基因  目的基因   

（4）MspⅠSmaⅠ

（5）农杆菌转化法   目的基因没有成功表达或表达的产物失活