热门试卷

解：（1）抗虫基因作为目的基因常从基因文库中获取，然后可用PCR技术进行扩增．

（2）欲从转基因牛的乳汁中获得人的生长激素，在构建基因表达载体时，必需在基因的首段接上启动子，启动转录形成信使RNA．在③即早期胚胎培养的过程中桑椹胚或囊胚阶段，可利用胚胎分割移植技术，获得多头基因型相同的转基因牛犊．

（3）在制作单克隆抗体的过程中，常将PrG基因利用显微注射技术导入能产生抗体的浆细胞中，从而获得大量专一性的抗体．

（4）抗虫棉培育过程中，将目的基因导入棉花受体细胞常用方法是农杆菌转化法，将受体细胞培养成棉花植株常用的方法是植物组织培养技术．

故答案为：

（1）从基因文库中获取      PCR技术   

（2）启动子   胚胎分割移植

（3）显微注射   浆（或效应B）   

（4）农杆菌转化   植物组织培养

解：（1）由于在欧文氏菌中无2，5-二酮基-D-葡萄糖酸还原酶，所以利用基因工程技术改造欧文氏菌，使其可直接利用D-葡萄糖生成2-二酮基-L-古龙酸．

（2）利用基因工程技术改造此细菌的基本方法是：先用同种限制性核酸内切酶同时切割2，5-二酮基-D-葡萄糖酸还原酶基因和质粒，然后用DNA连接酶将上述切割产物连接，构成重组质粒，并将其导入到受体菌中．

（3）培养“工程菌”的培养基应含有碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等几类营养物质．可以采用划线法或稀释涂布法将菌种接种在固体培养基上，以获得单个菌落，进行纯化；进行扩大培养和获得产品时，应选用液体培养基．

故答案为：

（1）欧文氏

（2）同种限制性核酸内切酶    2，5-二酮基-D-葡萄糖酸还原酶基因（2，5-DKG还原酶基因）      质粒     重组质粒（重组DNA）

（3）碳源、氮源、水、无机盐、生长因子     划线（或稀释涂布）   固体     单个     液体

解：（1）获取重组载体用到的“手术刀”是限制性核酸内切酶．②过程是将目的基因导入受体细胞，由于水稻属于双子叶植物，通常用农杆菌转化法将重组载体导入愈伤组织细胞．

（2）基因表达载体的组成包括启动子、目的基因、标记基因和终止子等．

（3）重组载体中的标记基因的作用是检测目的基因是否导入受体细胞．检测目的基因是否转录，需用同位素标记的铁结合蛋白基因作探针，即分子杂交的方法．

（4）图中基因工程的操作以及植物的组织培养过程须在无菌条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加植物激素（生长素和细胞分裂素），作用是促进细胞分裂、生长、分化．

（5）秋水仙素的作用是抑制有丝分裂前期纺锤体的形成，进而导致细胞中的染色体数目加倍．

故答案为：

（1）限制性核酸内切酶　农杆菌转化

（2）启动子   终止子

（3）检测目的基因是否导入受体细胞　分子杂交技术

（4）无菌　植物激素

（5）前    纺锤体

解

：（1）基因表达载体的构建过程：首先用同一种限制酶切割目的基因和质粒，然后再用DNA连接酶把目的基因和运载体质粒连接成重组质粒．（2）所谓农杆菌转化是指让其侵染植物组织细胞从而把目的基因导入植物细胞，在这个过程中不是所有细胞都导入了目的基因．将目的基因导入受体细胞后，检测受体细胞染色体DNA上是否插入了目的基因常采用DNA分子杂交技术；

（3）生长素和细胞分裂素在植物组织培养中起非常重要作用．要诱导出愈伤组织还要进行筛选，筛选出被含重组质粒的农杆菌侵染的叶片细胞，淘汰掉普通细胞，则放在含有卡那霉素的选择培养基上进行选择培养．

（4）图中转化组织或细胞发育为完整的植株，体现了细胞具有全能性．

故答案为：

（1）限制酶　DNA连接酶

（2）不是　DNA分子杂交

（3）生长素　卡那霉素

（4）细胞的全能性

解：（1）获得目的基因的方法有①从基因文库中获取；②利用PCR技术扩增；③人工合成（逆转录法和化学合成法）．从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因，需要用到的工具是限制性内切酶，此工具主要是从原核生物中分离纯化出来的，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧梭苷酸之间的磷酸二酯键断开．

（2）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有T-DNA，它能把目的基因整合到受体细胞染色体DNA．

（3）E过程是根据植物细胞的全能性，利用植物组织培养技术完成的，要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做抗虫接种实验，在分子水平上还需要做抗原-抗体杂交技术实验．

（4）将目的基因导入动物细胞的方法有显微注射法，最好的受体细胞是受精卵．

故答案为：

（1）限制酶       原核      磷酸二酯

（2）T-DNA    染色体的DNA

（3）植物组织培养     抗虫接种      抗原-抗体杂交

（4）显微注射法   受精卵

解：（1）建立生产生长激素的乳腺生物反应器，其核心步骤是基因表达载体的构建，科学家将生长激素基因和牛乳腺蛋白基因的启动子、终止子等重组在一起，通过显微注射方法导入牛的受精卵中．其中启动子的作用是启动转录过程．

（2）制备乳腺动物生物反应器的受体细胞为受精卵，由于要从乳汁提取药物，所以应该选择雌性，其性染色体组成为XX．

（3）基因工程中，DNA分子杂交技术可用于检测目的基因是否导入，一般是用放射性同位素标记含有目的基因的DNA片段 作探针．

（4）早期胚胎培养的培养液中中要加入动物血清、血浆等天然成分．

故答案为：

（1）标记基因    显微注射技术   启动转录过程

（2）受精卵     XX

（3）DNA分子杂交    含有目的基因的DNA片段 

（4）血清

解：（1）切割运载体时采用的是限制酶EcoRⅠ、SmaⅠ，为了便于目的基因与运载体定向连接形成重组DNA，还应在基因两侧的A和B位置接上限制酶EcoRⅠ、SmaⅠ的识别序列．

（2）PCR技术利用的是DNA复制的原理，DNA复制具有半保留复制的特点．根据题意可知，若共用了引物Ⅱ31个，说明产生了32个子代DNA分子，由此可见目的基因扩增了5代．

（3）由于质粒是小型环状DNA，若用EcoRⅠ和PstⅠ两种限制酶同时切割载体质粒，则能形成2种不同长度的DNA片段，共有4个游离的磷酸基团．

（4）图示中将基因表达载体构建完成后没有直接导入农杆菌，而是先将其导入大肠杆菌，目的是获取大量重组质粒（让目的基因扩增）．

（5）将目的导入微生物细胞时，需要用Ca2+处理微生物细胞，使其成为易于吸收周围环境中DNA的感受态．因此步骤⑤⑥过程中都需用Ca2+处理两类细菌．从分子水平检测目的基因是否表达，采用抗原-抗体杂交法．

故答案为：

（1）EcoRⅠ、SmaⅠ

（2）5 

（3）2   4

（4）获取大量重组质粒（让目的基因扩增）

（5）Ca2+   抗原-抗体杂交

解：（1）对供体用促性腺激素处理，使其超数排卵，才可以公鼠交配．

（2）过程③是构建基因表达载体，此过程需要用同一种限制酶切割目的基因和运载体，是它们露出相同的末端，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体．此过程是基因工程的核心步骤．过程④是转化重组质粒，受体细胞是动物细胞，常用显微注射法．

（3）过程⑥是筛选出含有目的基因的小鼠胚胎，常用基因探针根据DNA分子杂交技术检测．

故答案为：

（1）促性腺激素   

（2）限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶     显微注射法     基因表达载体构建    

（3）DNA分子杂交技术

解：（1）图中A为基因表达载体的构建过程，该过程首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．

（2）B过程是培养并选择含有重组质粒的土壤农杆菌，其中“选择”体现了质粒作为运载体必须具备具有标记基因；“培养”体现了质粒作为运载体必须能在宿主细胞中复制并稳定保存．

（3）由图可知，标记基因是卡那霉素抗性基因，因此要在培养基中添加卡那霉素．将离体棉花叶片组织培育成再生植株还需用采用植物组织培养技术，该技术的原理是植物细胞具有全能性．

（4）在分子水平上利用目的基因作为探针，采用分子杂交技术对再生植株进行检测，以鉴定其是否表达．

（5）基因控制蛋白质的合成包括转录和翻译两个过程，因此抗虫基因表达过程中遗传信息的流动方向：抗虫基因mRNA毒蛋白．

故答案为：

（1）限制性内切酶     DNA连接酶        显微注射法

（2）具有标记基因    能在宿主细胞中复制并稳定保存   

（3）卡那霉素    植物组织培养    全能性

（4）分子杂交

（5）抗虫基因mRNA毒蛋白