热门试卷

解：（1）基因工程的操作步骤是：目的基因的获取--构建基因表达载体--导入受体细胞--目的基因的检测和表达．过程②代表的是目的基因（A）的获取，可以通过PCR技术大量扩增A基因，该技术的原理是DNA双链的复制．

（2）构建A基因重组载体时，首先需用限制性核酸内切酶切割含有A基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶连接A基因和运载体形成A基因重组载体．

（3）④是将目的基因导入受体细胞的过程，常用显微注射法将目的基因导入动物细胞，A蛋白是外源基因控制产生的，属于抗原性物质．

（4）过程⑦采用动物细胞融合技术，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，获得的细胞叫杂交瘤细胞，其具备了骨髓瘤细胞无限增殖的特性和效应B细胞产生抗体的特性，从而制备单克隆抗体．动物细胞融合技术的原理是细胞膜的流动性．

（5）本题中提示该RNA病毒表面的A蛋白为主要的抗原，故而可选用通过基因工程生产的A蛋白制备疫苗；确诊时为判断该病毒是否为题目中的RNA病毒，可以进行核酸序列的比对，也可以利用单克隆抗体具备特异性，利用抗A蛋白的特异性单克隆抗体通过能否特异性结合判断病毒表面是否有A蛋白的存在进一步进行检测是否为目的RNA病毒．

故答案为：

（1）PCR    DNA双链的复制

（2）DNA连接酶

（3）显微注射法   抗原

（4）动物细胞融合技术    细胞膜的流动性

（5）A蛋白  核酸序列（或基因序列）   抗A蛋白的单克隆抗体

解：（1）图中a过程表示目的基因的获取，该过程要用到限制酶．

（2）在进行目的基因导致棉花植物细胞时，由我国科学家独创的十分简便经济的方法是花粉管通道法；若要培育转基因绵羊，则此过程要用显微注射的方法．

（3）为确定抗虫棉是否培育成功，既要用放射性同位素标记的目的基因（或Bt基因）作探针进行分子杂交测试，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是让害虫吞食抗虫棉叶子，观察害虫的存活状态．

（4）我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究，可以减少农药、杀虫剂的使用．这将对环境保护起到重要作用．

故答案为：

（1）限制酶

（2）花粉管通道法      显微注射

（3）目的基因（或Bt基因）      让害虫吞食抗虫棉叶子，观察害虫的存活状态（合理即可）

（4）环境保护

解：（1）图中①分别是供体细胞的细胞核，②所示内细胞团，因为这些细胞还未分化，具有全能性，可以定向诱导分化成各类细胞、组织、器官．

（2）过程④通常用③内细胞团细胞做受体细胞的原因是该类细胞具有较强的分裂和分化能力．

（3）过程④所用生物工程技术是转基因技术，完成需要用到限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体等基因操作工具．

（4）图示用患者的体细胞培养正常合成胰岛素的胰岛B细胞是克隆性治疗，用克隆形成的器官进行移植属于自体移植，与异体移植相比最大的优点是没有排斥反应．

（5）从基因文库中获取健康的胰岛B基因主要依据的相关信息有基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA等．

故答案为：

（1）细胞核

（2）分裂和分化

（3）限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体

（4）避免排斥反应

（5）基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA

解：（1）杂合子自交的过程中，随着自交代数的增多，纯合子所占的比例逐渐升高．若逐代筛选掉不符合要求的植株，那么如果从杂交所得的F1杂合体算起自交→淘汰→自交→淘汰…，第1代中符合要求的植株中杂合子占，第二代中符合要求的植株中杂合子占，因此到第n代时，表现型符合要求的植株中杂合子的比例为 2÷（1+2n）；按这样的比例，自交n代后纯合植株的比例为1-2÷（1+2n），要使该比例达到95%以上，即1-2÷（1+2n）＞95%，n至少为6．

（2）切割含有目的基因的外源DNA和运载体时需要限制酶，因此酶A为限制酶；将目的基因与运载体连接起来需要用DNA连接酶，因此酶B为DNA连接酶．

（3）检测这一性状是否能遗传：

①选取维生素c含量较高的个体×♂维生素c含量正常个体．

②若子代中总有维生素c含量较高的个体出现，也不能确定该性状能遗传．因为在环境没有任何改变的情况下，还有可能是环境的作用结果．

③若子代中没有出现维生素c含量较高的个体出现，也不能确定该性状不能遗传．因为该性状有可能是隐性基因决定的，在子一代中不一定能表现出来．

若已确定该性状为稳定遗传，则利用正交和反交方法可确定遗传方式，方案如下：

第一步：选取♀维生素c含量高×♂维生素c含量正常杂交．

第二步：测定子代果实中的维生素c含量．

第三步：再选取♀维生素c含量正常×♂维生素c含量高杂交．

第四步：测定子代果实中的维生素c含量．

实验结果与结论：如果正反交结果一致，可判定为细胞核遗传；如果正反交结果不一致，可判定为细胞质遗传．

故答案为：

（1）高   2÷（1+2n） 6

（2）DNA限制性内切酶   DNA连接酶

（3）方案一：①维生素c含量较高的个体      

②不一定．若环境没有任何改变的情况下，还有可能是环境的作用结果．

③不一定．有可能是隐性基因决定的，在子一代中不一定能表现出来．

方案二：第一步：♀维生素c含量高×♂维生素c含量正常    

第三步：♀维生素c含量正常×♂维生素c含量高     

实验结果：如果正反交结果一致，可判定为细胞核遗传      如果正反交结果不一致，可判定为细胞质遗传

解：（1）质粒上的抗性基因可作标记基因，便于鉴定受体细胞中是否导入目的基因．

（2）在目的基因的两侧各有1个EcoRⅠ的切点，即目的基因两侧有-GAATTC-，且EcoRⅠ的切割位点在G和A之间，因此目的基因两侧被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端为．

（3）经BamHⅠ处理后的质粒与用另一种限制酶BglⅡ处理得到的目的基因能连接起来，说明这两种酶切割获得的黏性末端相同．

（4）构建基因表达载体时，将四环素抗性基因破坏了，而没有破坏氨苄青霉素抗性基因，因此导入重组质粒的大肠杆菌能在含有氨苄青霉素的培养基上生存，但不能在含有四环素的培养基上生存，而导入普通质粒的大肠杆菌在这两种培养基上都能生存．因此图二中的菌落能抗氨苄青霉素，将灭菌绒布按到图二中培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到图三含四环素的培养基上培养，仍能生长的也能抗四环素，空圈为不能抗四环素的（只能抗氨苄青霉素）．图三结果显示，多数大肠杆菌既能抗氨苄青霉素，又能抗四环素，说明导入的是pBR322质粒，而不是重组质粒（重组质粒的四环素抗性基因被切断，不能表达，因此含重组质粒的大肠杆菌抗氨苄青霉素）．

故答案为：

（1）筛选（鉴别目的基因是否导入受体细胞）

（2）

（3）限制酶BamHⅠ和限制酶BglⅡ的酶切产物具有相同末端．

（4）能抗氨苄青霉素，但不能抗四环素      既能抗氨苄青霉素，又能抗四环素的pBR322质粒

解：（1）在减数分裂过程中，X与Y染色体的同源区段能发生交叉互换．

（2）根据图甲分析可知，A_bb表现为金黄色，即开金黄色花的雄株的基因型有AAXbY或AaXbY；A_B_表现为绿色，因此绿花植株的基因型有AAXBXB、AAXBXb、AaXBXB、AaXBXb、AAXBY、AaXBY．

（3）某一白花雌株（aaX-X-）与一开金黄色花雄株（A_XbY）杂交所得F1都开绿花（A_XBXb或A_XBY），则白花雌株的基因型是aaXBXB，遗传图解见答案．

（4）要确定某一开绿花的雌性植株的基因型，可采用的最简捷杂交方案是用aaXbY个体对其测交．

（5）某开金黄色花的女娄菜植株的一个侧芽发育成的枝条开出了绿花（用该绿花进行组织培养发现其后代植株均开绿花），则从分子水平角度看出现该紫花性状的最可能原因是基因b突变成基因B．

（6）目的基因分子水平的检测的方法有：利用DNA分子杂交技术检测目的基因的有无；利用分子杂交技术检测目的基因的转录；利用抗原-抗体杂交检测目的基因的翻译．

故答案为：

（1）Ⅰ

（2）AaXbY     6        

（3）aaXBXB      遗传图解见右

（4）用aaXbY个体对其测交

（5）基因b突变成基因B（答基因突变也可）

（6）①检测植物体内有无相应的抗虫蛋白

②检测植物体内有无相应的抗虫基因的mRNA

解：（1）图1中A基因控制酶1的合成，酶1促进有香味的物质2生成物质3，即A_能合成酶1，而aa则不能合成酶1，导致甲品种水稻香味物质积累，这也说明基因可以通过控制酶的合成来控制代谢过程，进而控制生物的性状．

（2）图中C→E→F表示单倍体育种，其中E表示花药离体培养；由于单倍体植株高度不育，因此F过程常用秋水仙素处理单倍体幼苗．

（3）图中A表示诱变育种，原理是基因突变，基因突变能产生新基因．

（4）B表示基因工程育种，基因工程的核心步骤是构建基因表达的载体；检测抗稻褐飞虱基因是否成功整合到水稻细胞的染色体上所用的方法是DNA分子杂交技术，如出现杂交带，说明已经成功导入目的基因．

故答案为：

（1）酶1    酶的合成

（2）单倍体育种    花药离体培养    用（一定浓度的）秋水仙素处理幼苗

（3）A

（4）构建基因表达载体   DNA分子杂交

解：（1）①质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端如图所示：

②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的，所以能够连接起来．

（2）基因工程的核心是基因表达载体的构建．基因表达载体含有绿色荧光蛋白基因（目的基因）、启动子、终止子和标记基因．

（3）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是显微注射技术．目的基因能否在受体母猪体内稳定遗传的关键是目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上，这需要采用DNA分子杂交技术进行检测才能确定．

（4）采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列、①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸、③蓝色荧光蛋白基因的修饰和④表达出蓝色荧光蛋白．

故答案为：

（1）①

②可以连接      因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的

（2）②启动子      终止子

（3）显微注射技术  目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上  DNA分子杂交技术

（4）②①③④

解：（1）①表示基因表达载体的构建过程，该过程首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次还要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子；该过程中最常用的运载工具是质粒．

（2）②表示动物细胞培养过程，该过程中要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理将皮肤组织块，使之分散成单个成纤维细胞．

（3）③表示从母羊中获取卵母细胞的过程，该过程中可用促性腺激素处理母羊，促进其超数排卵，以获取更多的卵（母）细胞．成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理．

（4）从重组细胞到早期胚胎需要采用（早期）胚胎培养技术．在胚胎移植前，通过胚胎分割技术可获得较多胚胎．

故答案为：

（1）质粒      DNA连接酶

（2）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶 ）

（3）促性腺激素（或促滤泡素，孕马血清）       去核

（4）（早期）胚胎培养       胚胎分割