热门试卷

科学家发现家蝇幼虫体内有一种抗肿瘤蛋白，具有抗癌的奇特疗效．它能对肿瘤产生特异性的抑制，并能增强机体的免疫力．如图所示为通过基因工程技术生产这种蛋白质的方法，请回答下列问题：

（1）图中A是______，在此过程中A作为______，将A提取出后要用______酶进行切割，切割家蝇DNA和物质A的酶______（相同/不同）．

（2）图中C过程是基因工程的核心步骤．此步骤的目的是______，此步骤所需的酶是______．

（3）B是______，便于B检测和鉴定，图中A的组成必须有______．

（4）经检测抗肿瘤基因已经成功导入受体细胞．为了检测目的基因是否转录，需要从受体细胞提取_______ （DNA/RNA/蛋白质）；为了检测目的基因是否翻译，需要从受体细胞提取______（DNA/RNA/蛋白质）．

科学家通过对鼠近10多年的研究，不仅积累了大量的遗传学资料，而且还逐渐形成了一整套比较成熟的技术体系，使鼠成为研究高等哺乳动物的模式动物，在单克隆抗体、转基因、胚胎发育等方面得到广泛的应用．

Ⅰ．世界上首例转基因动物是转大鼠生长激素基因的小鼠，其生产过程如图1：

（1）生产转基因的小鼠，其基因工程的核心步骤是______．

（2）对供体雌鼠甲用______处理一段时间后与雄鼠乙交配，然后通过手术的方法从雌鼠甲的______中取出受精卵．

（3）在显微镜下观察受精卵，待卵细胞核完成减数分裂后，在精核、卵核尚未融合前，将DNA注入精核中，这表明（2）步骤取到的“受精卵”实质上正处于______时期．

（4）将早期胚胎移植到丙鼠内，一段时间后孕育出小鼠．为确定小鼠是否含有大鼠的生长激素基因，通常的检测方法是取一小段幼鼠的尾巴，提取______后进行分子杂交检测．若要检测该转基因是否成功表达出大鼠的生长激素，则应从小鼠内环境中提取蛋白质，进行______检查．

（5）转入小鼠细胞内的生长激素基因，通常是随机整合进小鼠的染色体上，经检测，某些转基因小鼠的体细胞内可能含有一个或两个转基因，在染色体上的整合情况如图2（黑点表示转基因的整合位点，等长的两条竖直线分别表示同源染色体）．将某转基因小鼠与非转基因小鼠杂交，在不考虑转基因纯合致死的情况下：

①若子代转基因小鼠所占比例为50%，则转基因的整合位点属于图______类型．

②若子代转基因小鼠所占比例为75%，则转基因的整合位点属于图______类型．

Ⅱ．已知小鼠毛色的黄与灰由等位基因B、b控制，尾形的弯曲与正常由等位基因T、t控制，两对基因独立遗传．在毛色遗传中，具有某种纯合基因型的合子不能完成胚胎发育．从鼠群中选择多只基因型相同的雌鼠与多只基因型相同的雄鼠杂交，所得F1的表现型及比例如表，则：

（1）毛色遗传中不能完成胚胎发育的纯合基因型是______．

（2）亲本的基因型分别是______．

以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a-h为操作过程，请据图回答有关问题：

（1）图中数字标号代表的结构名称是①______；②______；③______；

（2）d操作的名称是______．

（3）图中用到的激素是______，其目的是获得更多的卵母细胞，经受精后可得到早期胚胎．

（4）为了能确定目的基因已经导入到受精卵，相应的载体需要有______以便于进行检测．

（5）若要获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到______阶段的早期胚胎进行______处理，再植入到受体内．要注意将内细胞团均等分割，否则会______若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于冷冻或液氮条件下．

（6）受体母牛必须和供体牛属于同一物种．移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是______．

对番茄的研究中发现，害虫损伤番茄叶片后，叶上的细胞壁能释放出一种类激素因子，这种物质能通过细胞组织扩散到茎和其他叶片上，启动蛋白酶抑制剂的基因后，开始高效合  成蛋白酶抑制剂，并在茎叶中迅速积累，以对付害虫的再次侵袭．蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作用，因此害虫取食后，就会因无法消化食物而被杀死．

人们尝试着将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米，让玉米获得与番茄相似的抗虫性状，以对付异常猖獗的玉米螟（一种玉米害虫）．试分析回答下列问题：

（1）若检测转入的蛋白酶抑制剂基因是否转入，应采用______法进行检测；若检测蛋白酶抑制剂基因是否表达，应采用______技术进行检测．

（2）将番茄的蛋白酶抑制基因转入玉米细胞时，最常采用的方法是______，除此之外还有______和______等．

（3）重组DNA的建构需要的工具酶有______．

（4）在构建基因表达载体时，除了要在重组DNA中插入目的基因外，还需要有启动子、终止子以及______．

（5）若要培养无病毒玉米植株，可取玉米的______进行快速繁殖．在培养的培养基中除了要加入所需的营养物质外，还要加入______和______两种激素．

苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白．如图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），据图回答下列问题．

（1）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有______种DNA片段．

（2）图中②表示HindⅢ与BamⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得______种重组质粒；如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得______种重组质粒．

（3）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的______．

（4）图中②过程所用的酶为______，作用部位为______．

（5）已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡．而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞______．

（6）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的______基因频率的增长速率．

利用基因工程培育抗病香蕉的流程如下：

回答下列问题：

（1）获得抗病基因后，常利用______技术进行扩增，利用该技术扩增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成______．该技术的完成需要______酶．

（2）使用农杆菌将抗病基因导入香蕉细胞中，农杆菌中的Ti质粒上的______可将抗病基因转移至香蕉细胞______上．

（3）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长．欲利用添加了卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，则基因表达载体A的构建时应含有______，以作为标记基因．

（4）抗病基因进入香蕉细胞内，并在香蕉细胞内维持稳定和表达，该过程称为______．

（5）欲检测抗病基因是否表达出蛋白质，可从转基因抗病香蕉中提取蛋白质，用______予以检测．

回答下列有关生物工程的问题．

Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图1（图中数字序号表示的是相关过程）．

                          图1

                                  图2 

（1）在核移植前应去除______的细胞核．

（2）过程②，重组胚胎培养到一定时期时，可从其______中分离出的ES细胞的特点是______．

（3）过程③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体，具体过程如图2．图中Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因，限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同．可以根据Rag2基因的______设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段．为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，④过程采用的酶是______，⑤过程采用的酶是______．如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成的DNA片段有______种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占______．

（4）在ES细胞培养液中加入______可以体外诱导定向形成造血干细胞．

（5）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的______，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验．

糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致西方发达国家把它列为第三号“杀手”．治疗该病的胰岛素过去主要从动物（如猪、牛）中获得，自20世纪70年代遗传工程（又称基因工程）发展起来以后，人们开始采用这种高新技术生产胰岛素，其操作的基本过程如图所示．

（1）图中基因工程的基本过程可概括为“四步曲”，即______、______、______、______．

（2）图中的质粒存在于细菌细胞内，在基因工程中通常被用作______，从其分子结构可确定它是一种______．

（3）根据碱基互补配对的规律，在______酶的作用下，把图中甲与乙拼接起来（即重组）．

（4）细菌进行分裂后，其中被拼接起来的质粒也由一个变成两个，两个变成四个…质粒的这种增加方式在遗传学上称为______．目的基因通过活动（即表达）后，能使细菌产生治疗糖尿病的激素，这是因为基因具有控制______合成的功能，它的过程包括______．

如图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图．据图回答：

（1）随着科技发展，获取目的基因的方法也越来越多，若乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取的，该方法称为______．图中③过程是在______（填“酶的名称”）作用下进行延伸的；

（2）离体棉花叶片组织经C、D、E成功地培育出了转基因抗虫植株，此过程涉及的细胞工程技术是______，该技术的原理是______；

（3）检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用______与提取出的mRNA分子做分子杂交．