热门试卷

解：（1）基因工程中，运载工具包括质粒、噬菌体及动植物病毒等，其中质粒是主要运载工具．

（2）在动物细胞培养过程中，用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶 ）处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞．培养前将细胞所需的各种营养物质按种类和所需数量严格配制成合成培养基并加入动物血清；在培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时就会停止分裂，这种现象称为细胞的接触抑制．通常将皮肤组织消化后的初次培养称为原代培养．

（3）要得到更多的卵（母）细胞需用促性腺激素对动物进行超数排卵处理；获得的卵（母）细胞在体外培养到减数第二次分裂中期再进行去核处理．．

（4）从重组细胞到早期胚胎需要才用动物细胞培养或早期胚胎培养技术．

故答案为：

（1）质粒     

（2）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶 ）  合成   接触抑制   原代培养

（3）促性腺激素   减数第二次分裂中期    

（4）动物细胞培养

解：（1）由以上分析可知，图示过程涉及到基因工程、核移植、动物细胞培养技术和胚胎移植等技术．

（2）②～③表示将目的基因导入受体细胞，在此之前需要构建基因表达载体，该过程中需先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．将目的基因导入动物细胞常用显微注射法．

（3）动物细胞培养时，需要胰蛋白酶处理组织以获得单个细胞．

（4）进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚．对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．

（5）个体⑦的核物质（或大部分遗传物质）来自荷斯坦奶牛，因此⑦的遗传性状和荷斯坦奶牛最相拟．PCR技术可在体外大量扩增目的基因．只有雌性奶牛才产奶，因此要实现⑦批量生产血清白蛋白，则要求③的性染色体是XX．

故答案为：

（1）基因工程（转基因技术）、核移植技术、动物细胞培养（或早期胚胎体外培养）、胚胎移植

（2）限制酶、DNA连接酶    显微注射

（3）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）

（4）B

（5）荷斯坦奶牛    因为个体⑦的核物质（或大部分遗传物质）来自荷斯坦奶牛    PCR或聚合酶链式反应（或化学方法）    XX

解：（1）基因工程中，将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用显微注射法．构建基因表达载体常用的工具酶是限制性内切酶和DNA连接酶．在培育有些转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上，将目的基因转移到受体细胞中．

（2）资料乙中可以看出，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造，提高T4溶菌酶的耐热性，该技术属于蛋白质工程的范畴．该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新蛋白质的技术．在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的氨基酸序列发生了改变．

（3）胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到同种的、生理状况相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术．资料丙中，兔甲是提供胚胎的个体，称为供体，兔乙是接受胚胎的个体，称为受体．

故答案为：

（1）显微注射法 限制性内切酶 DNA连接酶   农杆菌可感染植物将目的基因转移到受体细胞中

（2）蛋白质工程 现有蛋白质 新的蛋白质 氨基酸

（3）同 供 受

解：（1）将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法．图示中将目的基因导入到水稻胚细胞的方法称为农杆菌转化法．

（2）将含杀虫基因的重组质粒进行扩增的技术为PCR技术，其全称是多聚酶链式反应．

（3）能使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达的原因是通过该种方法能使目的基因进入植物细胞并将其插入到植物细胞中的染色体的DNA上．

（4）图示中④过程应用的主要生物技术是植物组织培养，该技术的过程主要包括脱分化和再分化两个阶段，利用的基本原理是植物细胞的全能性．

（5）蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要．蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程．

故答案为：

（1）农杆菌转化法

（2）多聚酶链式反应

（3）染色体的DNA上

（4）植物组织培养

（5）蛋白质

解：（1）步骤①基因表达载体的构建需要用DNA连接酶连接，构建表达载体并转化农杆菌，将农杆菌在含四环素的培养基中培养，筛选出成功导入B基因的农杆菌．获得的农杆菌能够侵染油菜细胞并将插入了B基因的质粒整合到受体细胞的染色体DNA上，获得转基因油菜．

（2）矮杆油菜成功导入一个B基因后，其基因型为ggBb，根据题干信息“B基因与G基因在油菜的株高上有相同的效果”可知，这样的转基因油菜表现为中杆．该转基因油菜自交产生的子一代中，高秆植株ggBB应占25%．

（3）①由于B基因插入G基因中，导致G基因被破坏，植株体细胞内的高秆基因只有一个，仍表现为中秆，所以丙植株的表现型与其余三种植株不同．

②四种转基因油菜分别自交，其中甲后代有5种表现型（含有4个显性基因、含有3个显性基因、含有2个显性基因、含有1个显性基因、不含显性基因）、乙后代只有1种表现型（均含有2个显性基因，即GGbb、ggBB、GgBb）、丙后代只有3种表现型（含有一个有效显性基因B、不含显性基因、含有2个有效显性基因BB）、丁后代只有1种表现型（均含有2个显性基因）．另有一种转基因油菜自交子代也有3种表现型，则B基因应该在G基因所在的染色体上，表现为连锁遗传，其在染色体上的位置如图：

故答案为：

（1）DNA连接酶    四环素   质粒   染色体DNA

（2）中杆    25%

（3）①B基因插入G基因中，导致G基因被破坏，植株体细胞内的高秆基因只有一个，仍表现为中秆

②丙 B基因的位置见下图：

解：（1）根据题干信息“载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制”可知，在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，科学家选择性地放弃了具有复制原点的载体．

（2）P53功能蛋白是由4条完全相同的肽链组装而成，每条肽链由393个氨基酸缩合而成．若考虑到翻译过程起始密码和终止密码的存在，则控制每条肽链合成的p53基因至少应该含有（393+1）×6=2364个核苷酸．在形成P53蛋白时，脱去的水分子数=氨基酸数-肽链数=393×4-4=1568个．核糖体的组成成分是蛋白质和RNA（组成单位是核糖核苷酸），其能与mRNA（含有密码子）结合进行翻译过程，翻译时还需要tRNA（含有反密码子）转运氨基酸，因此该核糖体中不含脱氧核苷酸．

（3）人体成熟的红细胞不含细胞核和各种细胞器，因此不含p53基因．

（4）已知如图1中1号个体的一条染色体上的p53基因突变为无功能的假基因，假设其基因型为Aa，则2号的基因型为AA，3号的基因型及概率为AA、Aa，其与4号（aa）婚配，所生5号个体为“易患癌症者”的概率为×=．

（5）由图可知，接受治疗后出现相应的p53蛋白质，说明她的治疗是有效的，左边那幅图是治疗后的电泳分析图．

（6）A、根据题干信息“其基因不整合到宿主细胞基因组中”可知，p53基因不整合到体细胞中，A错误；   

B、其治疗效果不显著，说明该个体中的p53基因可转录出mRNA，B错误；

C、其治疗效果不显著，说明该个体中的p53基因已经表达出P53蛋白，C错误；   

D．其治疗效果不显著，其原因可能是注射浓度或注射次数不够，D正确．

故选：D．

故答案为：

（1）自我复制或整合复制能力（答复制起点亦可）

（2）2364   1568    D 

（3）成熟红细胞（血小板亦可）

（4） 

（5）是        左

（6）D

解：（1）过程①表示用DNA酶水解部分裸露的DNA分子，其作用部位是磷酸二酯键；过程②表示蛋白酶处理复合体，水解其中的蛋白质，其作用部位是肽键．

（2）①、②两过程利用了酶的专一性，即一种酶只能催化一种或类化学反应．

（3）构建重组质粒时，需要限制酶和DNA连接酶，因此需将过程③的测序结果与限制性核酸内切酶的识别序列进行对比，以确定选用何种限制酶．

（4）RNA聚合酶能识别基因的启动子，并与之结合．

（5）A．分离得到核糖体，用蛋白酶酶解后提取rRNA，采用了酶的专一性原理，A正确；

B．无水乙醇能溶解色素，因此提取叶绿体基粒膜上的光合色素时，要用无水乙醇处理菠菜叶片，这与生物分子间的特异性无关，B错误；

C．分子杂交手段的原理是DNA分子杂交技术，采用了DNA分子的特异性原理，C正确；

D．mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合，终止后者翻译，这是采用了核酸的特异性原理，D正确．

故选：ACD．

故答案为：

（1）磷酸二酯键    肽键

（2）专一

（3）限制性核酸内切酶

（4）启动子

（5）ACD

解：（1）白叶枯病菌属于原核细胞，水稻属于真核细胞，其根本区别是无核膜包被的细胞核．

（2）构建野生稻的基因文库，从中得到抗性基因，利用限制性核酸内切酶对其进行切割，再与载体连接，得到重组质粒，然后导入到用CaCl2处理后的大肠杆菌中，用含抗生素的培养基筛选菌落，而后提取并得到重组质粒．最后，将验证正确的抗性基因利用农杆菌转化法转入水稻细胞．

（3）据图分析，甲自交后代抗白叶枯病：不抗白叶枯病=3：1，乙自交后代抗白叶枯病：不抗白叶枯病=15：1，其可能的原因是甲细胞中有一个抗性基因，乙细胞中有两个抗性基因，且两个抗性基因位于非同源染色体上．

（4）甲植株含有1个抗性基因，基因型为R+R-，非转基因植株的基因型为R-R-，进行杂交．（具体见答案）

故答案为：

（1）无核膜包被的细胞核

（2）基因文库             限制性核酸内切酶          CaCl2 农杆菌转化

（3）甲细胞中有一个抗性基因，乙细胞中有两个抗性基因，且两个抗性基因位于非同源染色体上

（4）

解：（Ⅰ）限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-．在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点．目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端如图：．

（Ⅱ）（1）所有生物的DNA分子结构相似，因此源自不同生物的DNA能够重组；所有生物共用一套遗传密码，因此相同的基因在不同生物体内都能成功表达出相同的产物．

（2）基因工程最终获得成功的标志是：目的基因顺利表达（或产生人们需要的功能物质）．

（3）在植物组织培养的再分化过程中，若要将愈伤组织诱导出根，则植物生长调节剂的浓度配比应为：生长素多，细胞分裂素少．

（4）动物细胞克隆（克隆培养法）要取得成功的最基本要求是：必须保证分离出来的细胞是一个而不是多个．为提高克隆形成率，还应该在培养基中加入滋养细胞以支持生长．

（5）动物细胞培养时，要用胰蛋白酶处理，使组织细胞分散成单个细胞．开始培养时一滴培养液有100个肿瘤细胞，经24h培养后，一滴培养液中有6400个肿瘤细胞，因此2n×100=6400，分裂次数n=6，细胞周期约为24÷6=4h．

故答案为：

（Ⅰ）

（Ⅱ）（1）所有生物的DNA分子结构相似      所有生物共用一套遗传密码．

（2）目的基因顺利表达（或产生人们需要的功能物质）  

（3）生长素多，细胞分裂素少．

（4）必须保证分离出来的细胞是一个而不是多个   滋养细胞

（5）胰蛋白酶   4