- 基因工程的基本操作程序
- 共6244题
(2015秋•江西校级期末)如图表示大肠杆菌细胞中组成核糖体的蛋白质(简称RP)的合成及调控过程. RP基因操纵元是控制核糖体蛋白质合成的DNA分子片段,RBS是核糖体结合位点.请回答下列问题:
(1)RP基因操纵元的基本组成单位是______;①过程发生的场所是______.
(2)过程②合成的RP1的多肽有一段氨基酸序列为“-丝氨酸-组氨酸-谷氨酸-”,转运丝氨酸、组氨酸和谷氨酸的tRNA上的相应碱基序列分别为AGA、GUG、CUU,则决定该氨基酸序列的基因的碱基序列为______.
(3)核糖体主要由______等物质构成,图中核糖体沿着mRNA的移动依次合成的有关物质是______等(用图中所示物质表示),当细胞中缺乏rRNA时,RP1与RBS结合,导致RBS被封闭,引起的后果是______,通过这种调节机制可以避免______.
(4)大肠杆菌细胞中的RNA,其功能有______(多选).
A.作为遗传物质 B.传递遗传信息 C.转运氨基酸 D.构成核糖体.
正确答案
解:(1)RP基因操纵元是控制核糖体蛋白质合成的DNA分子片段,DNA的基本单位为脱氧核苷酸.图中①为转录过程,原核细胞中转录发生在拟核中.
(2)RP1中有一段氨基酸序列为“-丝氨酸-组氨酸-谷氨酸-”,它们的反密码了分别为AGA、GUG、CUU,则它们的密码子依次为UCG、CAU、CAG,根据碱基互补配对原则,则基因1中决定该氨基酸序列的模板链碱基序列为AGAGTGCTT.
(3)核糖体主要由核糖体蛋白质(RP)和rRNA(或蛋白质和rRNA或RP1、RP2、RP3和rRNA)等物质构成,看图可知:核糖体沿着mRNA的移动依次合成的物质是RP1、RP2、RP3等蛋白质;当细胞中缺乏rRNA时,RP1与RBS结合,导致RBS被封闭,引起的后果是RP1等蛋白质合成终止,进而使核糖体数目减少,通过这种调节机制可以避免细胞内物质和能量的浪费.
(4)大肠杆菌细胞中:mRNA可以传递遗传信息;tRNA可以识别密码子并转运相应的氨基酸;rRNA是组成核糖体的重要成分;作为遗传物质是DNA的功能.
故答案为:
(1)脱氧核苷酸 拟核
(2)-AGAGTGCTT-
-TCTCACGAA-
(3)核糖体蛋白质(RP)和rRNA(或蛋白质和rRNA或RP1、RP2、RP3和rRNA) RP1、RP2、RP3
RP1等蛋白质合成终止,进而使核糖体数目减少 细胞内物质和能量的浪费
(4)BCD
解析
解:(1)RP基因操纵元是控制核糖体蛋白质合成的DNA分子片段,DNA的基本单位为脱氧核苷酸.图中①为转录过程,原核细胞中转录发生在拟核中.
(2)RP1中有一段氨基酸序列为“-丝氨酸-组氨酸-谷氨酸-”,它们的反密码了分别为AGA、GUG、CUU,则它们的密码子依次为UCG、CAU、CAG,根据碱基互补配对原则,则基因1中决定该氨基酸序列的模板链碱基序列为AGAGTGCTT.
(3)核糖体主要由核糖体蛋白质(RP)和rRNA(或蛋白质和rRNA或RP1、RP2、RP3和rRNA)等物质构成,看图可知:核糖体沿着mRNA的移动依次合成的物质是RP1、RP2、RP3等蛋白质;当细胞中缺乏rRNA时,RP1与RBS结合,导致RBS被封闭,引起的后果是RP1等蛋白质合成终止,进而使核糖体数目减少,通过这种调节机制可以避免细胞内物质和能量的浪费.
(4)大肠杆菌细胞中:mRNA可以传递遗传信息;tRNA可以识别密码子并转运相应的氨基酸;rRNA是组成核糖体的重要成分;作为遗传物质是DNA的功能.
故答案为:
(1)脱氧核苷酸 拟核
(2)-AGAGTGCTT-
-TCTCACGAA-
(3)核糖体蛋白质(RP)和rRNA(或蛋白质和rRNA或RP1、RP2、RP3和rRNA) RP1、RP2、RP3
RP1等蛋白质合成终止,进而使核糖体数目减少 细胞内物质和能量的浪费
(4)BCD
棉铃虫是一种严重危害棉花的害虫.我国科学家发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金芽孢杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死,而此毒蛋白对人畜无害.通过基因工程的方法,我国已将该毒蛋白基因移人棉株细胞内并实现成功表达.由于棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡,所以该棉花新品种在1998年推广后,已取得了很好的经济效益.请根据上述材料回答下列问题:
(1)进行基因操作“四步曲”是:提取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→______.
(2)害虫在喷洒农药进行化学防治后抗药性增强是______的结果.
(3)“转基因抗虫棉”抵抗害虫的遗传信息表达过程可以表示为______.
(4)“转基因抗虫棉”的抗虫变异,属于可遗传变异类型中的______.
(5)该项科学成果在环境保护上的重要作用是______.
(6)题中“毒蛋白基因转人棉花植株内并实现成功表达中的“成功表达”含义是指______.
(7)与杂交育种、诱变育种相比,通过基因工程培育新品种的主要优点是______.
(8)现代农业防治害虫的新理念是:将害虫数量控制在不危害农作物的较低水平,而不是消灭害虫.其依据是______.
(9)转基因技术有利有弊,请各举一例加以说明:
有利方面:______.
有害方面:______.
正确答案
解:(1)进行基因操作“四步曲”是:提取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定翻译
(2)害虫在喷洒农药进行化学防治后抗药性增强是农药对害虫的变异类型进行定向选择的结果.
(3)“转基因抗虫棉”抵抗害虫的遗传信息表达过程可以表示为:抗虫基因RNA
蛋白质
(4)“转基因抗虫棉”的抗虫变异,属于可遗传变异类型中的基因重组.
(5)该项科研成果在环境保护上的重要作用是减少了农药对环境的污染,保护了生态环境.
(6)题中“毒蛋白基因转入棉花植株内并实现成功表达”中的“成功表达”说明毒蛋白基因在棉花细胞内经转录和翻译合成了毒蛋白.
(7)与杂交育种、诱变育种相比,通过基因工程培育新品种的主要优点是目的性强,育种周期短,克服了远缘杂交不亲和的障碍.
(8)本着保护生物多样性,维持生态系统的稳定性原则,生物防治就是利用生物来防治病虫害.可以分为以虫治虫、以鸟治虫和以菌治虫三大类.它是降低杂草和害虫等有害生物种群密度的一种方法.它利用了生物物种间的相互关系,以一种或一类生物抑制另一种或另一类生物.它的最大优点是不污染环境.
(9)转基因技术有利有弊,用于疾病的诊断和治疗则有利,而培育优良动、植物新品种可能引起环境问题、食物安全性问题、生物安全性问题等则不利.
故答案为:
(1)目的基因的检测与鉴定翻译
(2)农药对害虫的变异类型进行选择转录
(3)抗虫基因RNA
蛋白质
(4)基因重组
(5)减少了农药对环境的污染,保护了生态环境
(6)毒蛋白基因在棉花细胞内经转录和翻译合成了毒蛋白
(7)目的性强,育种周期短,克服了远源杂交不亲和的障碍,能定向改变生物的遗传性状
(8)保护生物多样性,维持生态系统的稳定性
(9)用于疾病的诊断和治疗;用于培育优良动、植物新品种,不利于环境保护 可能引起环境问题、食物安全性问题、生物安全性问题等
解析
解:(1)进行基因操作“四步曲”是:提取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定翻译
(2)害虫在喷洒农药进行化学防治后抗药性增强是农药对害虫的变异类型进行定向选择的结果.
(3)“转基因抗虫棉”抵抗害虫的遗传信息表达过程可以表示为:抗虫基因RNA
蛋白质
(4)“转基因抗虫棉”的抗虫变异,属于可遗传变异类型中的基因重组.
(5)该项科研成果在环境保护上的重要作用是减少了农药对环境的污染,保护了生态环境.
(6)题中“毒蛋白基因转入棉花植株内并实现成功表达”中的“成功表达”说明毒蛋白基因在棉花细胞内经转录和翻译合成了毒蛋白.
(7)与杂交育种、诱变育种相比,通过基因工程培育新品种的主要优点是目的性强,育种周期短,克服了远缘杂交不亲和的障碍.
(8)本着保护生物多样性,维持生态系统的稳定性原则,生物防治就是利用生物来防治病虫害.可以分为以虫治虫、以鸟治虫和以菌治虫三大类.它是降低杂草和害虫等有害生物种群密度的一种方法.它利用了生物物种间的相互关系,以一种或一类生物抑制另一种或另一类生物.它的最大优点是不污染环境.
(9)转基因技术有利有弊,用于疾病的诊断和治疗则有利,而培育优良动、植物新品种可能引起环境问题、食物安全性问题、生物安全性问题等则不利.
故答案为:
(1)目的基因的检测与鉴定翻译
(2)农药对害虫的变异类型进行选择转录
(3)抗虫基因RNA
蛋白质
(4)基因重组
(5)减少了农药对环境的污染,保护了生态环境
(6)毒蛋白基因在棉花细胞内经转录和翻译合成了毒蛋白
(7)目的性强,育种周期短,克服了远源杂交不亲和的障碍,能定向改变生物的遗传性状
(8)保护生物多样性,维持生态系统的稳定性
(9)用于疾病的诊断和治疗;用于培育优良动、植物新品种,不利于环境保护 可能引起环境问题、食物安全性问题、生物安全性问题等
治疗心脏病的药物TPA是一种组织纤维蛋白溶酶原活化剂,可利用生物工程技术来生产.如图是利用生物工程技术让羊生产TPA的大致过程,图中①、②、③、④表示部分生产过程.请据图分析回答:
(1)图中①表示______的构建,所用的工具酶有______、______.
(2)图中②过程选择受精卵作为TPA基因受体细胞的主要原因是______;若需体外形成羊的受精卵,需在______(垂体激素)的作用下促其排卵,然后再进行体外受精.
(3)图中③过程是否成功,与供体和受体的______状况有关;受体对移入子宫的______基本上不发生______反应,这为胚胎在受体内的存活提供了可能.
(4)图中④过程表示产生大量的克隆羊,则该过程可采用的技术有______,这些克隆羊的基因型______(填“相同”或“不同”).
正确答案
解:(1)图中①表示基因表达载体的构建,该过程首先要用限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子,其次还需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子.
(2)由于受精卵发育的全能性最高,因此图中②过程选择受精卵作为tPA基因受体细胞;给良种母畜注射促性腺激素可促使其超数排卵.
(3)图中③表示胚胎移植过程,该过程是否成功,与供体和受体的生理状况有关,因此受体母羊需要进行同期发情处理,为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境.受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应,这为胚胎在受体内的存活提供了可能.
(4)要扩大转基因羊群,可采取细胞核移植技术转基因羊进行克隆和胚胎分割,由于采用克隆技术形成的后代的核遗传物质都来自供体,来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质,因此这些克隆羊的基因型相同.
故答案为:
(1)基因表达载体 限制酶和DNA连接酶
(2)受精卵发育的全能性最高 促性腺激素
(3)生理 胚胎 免疫排斥
(4)细胞核移植和胚胎分割移植 相同
解析
解:(1)图中①表示基因表达载体的构建,该过程首先要用限制酶切割运载体和含有目的基因的外源DNA分子,其次还需要用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子.
(2)由于受精卵发育的全能性最高,因此图中②过程选择受精卵作为tPA基因受体细胞;给良种母畜注射促性腺激素可促使其超数排卵.
(3)图中③表示胚胎移植过程,该过程是否成功,与供体和受体的生理状况有关,因此受体母羊需要进行同期发情处理,为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境.受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应,这为胚胎在受体内的存活提供了可能.
(4)要扩大转基因羊群,可采取细胞核移植技术转基因羊进行克隆和胚胎分割,由于采用克隆技术形成的后代的核遗传物质都来自供体,来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质,因此这些克隆羊的基因型相同.
故答案为:
(1)基因表达载体 限制酶和DNA连接酶
(2)受精卵发育的全能性最高 促性腺激素
(3)生理 胚胎 免疫排斥
(4)细胞核移植和胚胎分割移植 相同
金花茶是中国特有的观赏品种,但易得枯萎病,降低观赏价值.科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因,用转基因方法培育了抗枯萎病的新品种.
(1)通过转基因技术使野生品种的抗性基因转移到农作物中去,已经得到抗性强的农作物新品种,反映了生物多样性具有______
A.间接使用价值 B.潜在使用价值 C.科学研究价值 D.美学价值
(2)将②连接到①上并形成③,常用到的酶有______和______,抗枯萎病基因能够拼接到①上,其物质基础是______.
(3)为使抗枯萎病的基因成功表达,需构建基因表达载体,一个完整的基因表达载体除目的基因、复制原点之外还需具备的是______、______、______.
(4)经检测,被③侵染的金花茶叶片细胞具备了抗病性,这说明②已经在金花茶细胞内得到______.该项科技成果在环境保护上的意义是______.欲快速培育大量该抗病新品种,应该采用的技术是______,依据的理论基础是______.
(5)基因工程技术还可用于基因诊断和基因治疗,基因诊断的基本原理是______,基因治疗包括______和______两种方法,采用的载体通常是______.
正确答案
解:(1)通过转基因技术使野生品种的抗性基因转移到农作物中去,已经得到抗性强的农作物新品种,反映了生物多样性具有直接价值(科学研究价值).
(2)将②连接到①上并形成③的过程中,首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒,其次还需用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒;由于不同生物的DNA结构成分基本相同且都是双螺旋结构,因此抗枯萎病基因能够拼接到①上.
(3)基因表达载体的组成包括目的基因、复制原点、启动子、终止子和标记基因等.
(4)经检测,被③侵染的金花茶叶片细胞具备了抗病性,这说明②已经在金花茶细胞内得到表达.通过基因工程技术获得抗病性植株,可以减少化学农药的使用,减轻环境污染.植物组织培养技术能快速繁育优良品种,因此欲快速培育大量该抗病新品种,应该采用植物组织培养技术;植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性.
(5)基因诊断的基本原理是DNA分子杂交;基因治疗包括体外基因治疗和体内基因治疗两种方法,采用的载体通常是(修饰的)动物病毒.
故答案为:
(1)C
(2)限制性内切酶、DNA连接酶 DNA结构成分基本相同且都是双螺旋结构
(3)启动子 终止子 标记基因
(4)表达 减轻农药对环境的污染 植物组织培养 细胞的全能性
(5)DNA分子杂交 体外基因治疗和体内基因治 (修饰的)动物病毒(或修饰的腺病毒)
解析
解:(1)通过转基因技术使野生品种的抗性基因转移到农作物中去,已经得到抗性强的农作物新品种,反映了生物多样性具有直接价值(科学研究价值).
(2)将②连接到①上并形成③的过程中,首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒,其次还需用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒;由于不同生物的DNA结构成分基本相同且都是双螺旋结构,因此抗枯萎病基因能够拼接到①上.
(3)基因表达载体的组成包括目的基因、复制原点、启动子、终止子和标记基因等.
(4)经检测,被③侵染的金花茶叶片细胞具备了抗病性,这说明②已经在金花茶细胞内得到表达.通过基因工程技术获得抗病性植株,可以减少化学农药的使用,减轻环境污染.植物组织培养技术能快速繁育优良品种,因此欲快速培育大量该抗病新品种,应该采用植物组织培养技术;植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性.
(5)基因诊断的基本原理是DNA分子杂交;基因治疗包括体外基因治疗和体内基因治疗两种方法,采用的载体通常是(修饰的)动物病毒.
故答案为:
(1)C
(2)限制性内切酶、DNA连接酶 DNA结构成分基本相同且都是双螺旋结构
(3)启动子 终止子 标记基因
(4)表达 减轻农药对环境的污染 植物组织培养 细胞的全能性
(5)DNA分子杂交 体外基因治疗和体内基因治 (修饰的)动物病毒(或修饰的腺病毒)
如图为某生物科技工程操作流程模式图,请据图回答:
(1)如果此图表示基因工程的操作流程,A为质粒,则C表示______;如果D为动物受体细胞,则C→D的过程采用______法.A为质粒,则B的获取方法有______、______和______根据已知蛋白质中的氨基酸序列推知基因的脱氧核苷酸序列再进行化学合成.在基因工程操作过程中,最核心的步骤是______.在分子水平上检测目的基因是否导入受体细胞的方法是______,检测目的基因是否转录的方法是______,检测目的基因是否表达的方法是______.
(2)若A为骨髓瘤细胞,B为B淋巴细胞,则C为______细胞,C细胞在无限增殖过程中,还能产生______,这项技术叫动物细胞融合技术.
(3)若此图为试管牛的工厂化生产的技术流程图,从C发育到D(胚胎)需经历卵裂、______、______、等阶段,然后通过______,让它在受体牛内发育.
正确答案
解:(1)如果此图表示基因工程的操作流程,A为质粒,则C表示重组DNA分子;如果D为动物受体细胞,则C→D的过程采用显微注射法.A为质粒,则B的获取方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和反转录法根据已知蛋白质中的氨基酸序列推知基因的脱氧核苷酸序列再进行化学合成.在基因工程操作过程中,最核心的步骤是基因表达载体的构建.在分子水平上检测目的基因是否导入受体细胞的方法是DNA分子杂交技术,检测目的基因是否转录的方法是分子杂交技术,检测目的基因是否表达的方法是抗原-抗体杂交技术.
(2)若A为骨髓瘤细胞,B为B淋巴细胞,则C为杂交瘤细胞,C细胞在无限增殖过程中,还能产生单克隆抗体,这项技术叫动物细胞融合技术.
(3)若此图为试管牛的工厂化生产的技术流程图,从C发育到D(胚胎)需经历卵裂、桑椹胚、囊胚、原肠胚等阶段,然后通过胚胎移植,让它在受体牛内发育.
故答案为:
(1)重组DNA分子 显微注射 从基因文库中获取 利用PCR技术扩增 反转录法 基因表达载体的构建 DNA分子杂交技术 分子杂交技术 抗原-抗体杂交技术
(2)杂交瘤 单克隆抗体
(3)桑椹胚 囊胚 胚胎移植
解析
解:(1)如果此图表示基因工程的操作流程,A为质粒,则C表示重组DNA分子;如果D为动物受体细胞,则C→D的过程采用显微注射法.A为质粒,则B的获取方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和反转录法根据已知蛋白质中的氨基酸序列推知基因的脱氧核苷酸序列再进行化学合成.在基因工程操作过程中,最核心的步骤是基因表达载体的构建.在分子水平上检测目的基因是否导入受体细胞的方法是DNA分子杂交技术,检测目的基因是否转录的方法是分子杂交技术,检测目的基因是否表达的方法是抗原-抗体杂交技术.
(2)若A为骨髓瘤细胞,B为B淋巴细胞,则C为杂交瘤细胞,C细胞在无限增殖过程中,还能产生单克隆抗体,这项技术叫动物细胞融合技术.
(3)若此图为试管牛的工厂化生产的技术流程图,从C发育到D(胚胎)需经历卵裂、桑椹胚、囊胚、原肠胚等阶段,然后通过胚胎移植,让它在受体牛内发育.
故答案为:
(1)重组DNA分子 显微注射 从基因文库中获取 利用PCR技术扩增 反转录法 基因表达载体的构建 DNA分子杂交技术 分子杂交技术 抗原-抗体杂交技术
(2)杂交瘤 单克隆抗体
(3)桑椹胚 囊胚 胚胎移植
分析有关资料,回答有关遗传、基因工程问题.
油菜的株高由等位基因G和g决定,GG为高杆,Gg为中杆,gg为矮杆.B基因是另一种植物的高杆基因,B 基因与 G 基因在油菜的株高上有相同的效果,并且株高与这两个基因的数量正相关.如图1所示是培育转基因油菜的操作流程.请回答下列问题:
(1)步骤①中用到的工具酶是______,培育转基因油菜主要运用了转基因技术和______技术.
(2)图1中质粒是双链闭合环状的DNA分子,若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N切割,通过凝胶电泳分离分析得如表.限制酶M和N的识别序列和切割位点如图2所示.
①该质粒的长度为______kb.在该质粒中,M酶与N酶的切割位点分别有______、______个.
②M酶与N酶切出的能相互粘连的末端在酶的作用下相互连接,请将连接的结果表示出来:______.连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割:______.
如图3所示为B基因的结构示意图以及限制酶M和N的切割位点.
③现用图3中基因作为目的基因,若采用直接从供体细胞中分离,可选用酶______来切割.
④已知Ⅱ区的碱基数是2000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中G和C的总数共有400个,则由该区转录的mRNA中A和U总数是______.
(3)若将一个B基因转移到矮杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达,且B基因与g基因位于非同源染色体上,这样的转基因油菜植株表现型为______.
(4)若将一个B基因转移到中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达,培育了甲~丁四种转基因油菜(如图4所示).
①与甲的株高相同的是______.四种转基因油菜分别自交,在不考虑交叉互换的前提下,子代有3种表现型的是______.
②另有一种转基因油菜自交子代也有3种表现型,请在如图5中的染色体上标出B基因的位置.
正确答案
解:(1)步骤①表示已经用限制酶切割后的目的基因和质粒,因此再用DNA连接酶连接形成重组DNA.培育转基因油菜首先利用转基因技术将目的基因导致受体细胞,然后利用植物组织培养技术将受体细胞培育成植株.
(2)①表格中+表示该片段的存在以及含量,用酶M切割产生了一个1.0kb的、一个5.0kb的、一个10.0kb的片段,因此则该DNA的长度为16Kb.由于质粒为环状DNA,用酶M得到3个片段,则有3个切点,用酶N得到2个片段,则有2个切点.
②M酶和N酶切割能得到相同的黏性末端,可以用DNA连接酶催化连接,连接结果见答案;当连接后,没有了两种酶的识别序列,因此两种酶不能再切割.
③从供体细胞中获得目的基因最常用的方法是一定的限制酶切割.如果选用酶M切割,将会将能指导蛋白质合成的片段破坏掉,故应选用酶N来切割.
④由于Ⅱ区阴影部分不能指导蛋白质的合成,故Ⅱ区能指导蛋白质合成的碱基数=总数(2000个)-阴影部分(800个)=1200个;该部分碱基中C和G占400个,A和T点800个,则每条链中A+T有400个,根据碱基互补配对原则,由其转录得到的RNA中有A和U为400个.
(3)若将一个B基因导入矮秆油菜,其基因型为Bbgg,故根据题意其表现型为中秆.
(4)①根据图解,甲植株同时含有G、B两个基因且两个基因都能表达,甲表现为高秆,故与甲的株高相同的有乙和丁;而丙虽说也导入了B基因,但由于B基因的导入位置在G基因的中间,其导入破坏了G基因,故丙植株只能表现出一个B基因即为中秆.四种转基因油菜分别自交(无目的基因表示为b),甲基因型为GgBb,其自交后代为1GGBB:(2GGBb+2GgBB):(4GgBb+1GGbb+1ggBB):(2Ggbb+2ggBb):1ggbb=1:4:6:4:1,故甲自交后代有五种表现型;乙基因型为GgBb,但由于两对基因位于一对同源染色体上,故其自交后代为(GGbb+ggBB):2GgBb,其自交后代只有一种表现型;丙的基因型为ggBb,其自交后代为ggBB:2ggBb:ggbb,后代共有3种表现型;丁的基因型为GgBb,其自交后代和甲一样.
②另一种转基因油菜自交后代也有三种表现型,由B基因和G基因位于同一条染色体上,二者遵循分离定律,图解见答案.
故答案为:
(1)DNA连接酶 植物组织培养
(2)①16kb; 3、2;
② 否
③N
④400
(3)中杆
(4)①乙和丁 丙 ②
解析
解:(1)步骤①表示已经用限制酶切割后的目的基因和质粒,因此再用DNA连接酶连接形成重组DNA.培育转基因油菜首先利用转基因技术将目的基因导致受体细胞,然后利用植物组织培养技术将受体细胞培育成植株.
(2)①表格中+表示该片段的存在以及含量,用酶M切割产生了一个1.0kb的、一个5.0kb的、一个10.0kb的片段,因此则该DNA的长度为16Kb.由于质粒为环状DNA,用酶M得到3个片段,则有3个切点,用酶N得到2个片段,则有2个切点.
②M酶和N酶切割能得到相同的黏性末端,可以用DNA连接酶催化连接,连接结果见答案;当连接后,没有了两种酶的识别序列,因此两种酶不能再切割.
③从供体细胞中获得目的基因最常用的方法是一定的限制酶切割.如果选用酶M切割,将会将能指导蛋白质合成的片段破坏掉,故应选用酶N来切割.
④由于Ⅱ区阴影部分不能指导蛋白质的合成,故Ⅱ区能指导蛋白质合成的碱基数=总数(2000个)-阴影部分(800个)=1200个;该部分碱基中C和G占400个,A和T点800个,则每条链中A+T有400个,根据碱基互补配对原则,由其转录得到的RNA中有A和U为400个.
(3)若将一个B基因导入矮秆油菜,其基因型为Bbgg,故根据题意其表现型为中秆.
(4)①根据图解,甲植株同时含有G、B两个基因且两个基因都能表达,甲表现为高秆,故与甲的株高相同的有乙和丁;而丙虽说也导入了B基因,但由于B基因的导入位置在G基因的中间,其导入破坏了G基因,故丙植株只能表现出一个B基因即为中秆.四种转基因油菜分别自交(无目的基因表示为b),甲基因型为GgBb,其自交后代为1GGBB:(2GGBb+2GgBB):(4GgBb+1GGbb+1ggBB):(2Ggbb+2ggBb):1ggbb=1:4:6:4:1,故甲自交后代有五种表现型;乙基因型为GgBb,但由于两对基因位于一对同源染色体上,故其自交后代为(GGbb+ggBB):2GgBb,其自交后代只有一种表现型;丙的基因型为ggBb,其自交后代为ggBB:2ggBb:ggbb,后代共有3种表现型;丁的基因型为GgBb,其自交后代和甲一样.
②另一种转基因油菜自交后代也有三种表现型,由B基因和G基因位于同一条染色体上,二者遵循分离定律,图解见答案.
故答案为:
(1)DNA连接酶 植物组织培养
(2)①16kb; 3、2;
② 否
③N
④400
(3)中杆
(4)①乙和丁 丙 ②
下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要,请回答:
本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素.所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子,通过某方法合成若干DNA片段,拼接而成,重组DNA分子可通过农杆菌介导的方法转入番茄中,在番茄的果实中表达人胰岛素.
(1)本专利是采用______方法获得目的基因.获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同,但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同,原因是______.要想在体外获得大量该目的基因的片段,可以采用______技术.该技术中使用的关键酶是______;原料是四种脱氧核苷酸.
(2)根据上述摘要,转基因操作时所用的载体是______,载体上的______可以转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上.
(3)如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用______技术,再经______ 方法培养成个体.
正确答案
解:(1)根据题干信息“所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱的密码子来设计所含的密码子,通过某方法合成若干DNA片段,拼接而成”可知,本专利是采用人工合成方法获得目的基因.由于密码子具有简并性,即使基因序列不同,但其控制合成的蛋白质可以相同,因此获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同,但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同.PCR技术可以在体外大量扩增目的基因片段,PCR技术是在较高温度环境中进行的,因此该技术中使用的关键酶是热稳定性DNA聚合酶(或Taq酶).
(2)根据题干信息“通过农杆菌介导的方法”可知,转基因操作时所用的载体是农杆菌的Ti质粒,载体上的T-DNA可以转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上.
(3)要检测在受体细胞中是否存在目的基因,可采用DNA分子杂交技术;将转基因受体细胞培育成转基因植株,可采用植物组织培养技术.
故答案为:
(1)人工合成 密码子具有简并性,基因序列不同,蛋白质可以相同 PCR 热稳定性DNA聚合酶(或Taq酶)
(2)农杆菌的Ti质粒 T-DNA
(3)DNA分子杂交 组织培养
解析
解:(1)根据题干信息“所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱的密码子来设计所含的密码子,通过某方法合成若干DNA片段,拼接而成”可知,本专利是采用人工合成方法获得目的基因.由于密码子具有简并性,即使基因序列不同,但其控制合成的蛋白质可以相同,因此获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同,但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同.PCR技术可以在体外大量扩增目的基因片段,PCR技术是在较高温度环境中进行的,因此该技术中使用的关键酶是热稳定性DNA聚合酶(或Taq酶).
(2)根据题干信息“通过农杆菌介导的方法”可知,转基因操作时所用的载体是农杆菌的Ti质粒,载体上的T-DNA可以转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上.
(3)要检测在受体细胞中是否存在目的基因,可采用DNA分子杂交技术;将转基因受体细胞培育成转基因植株,可采用植物组织培养技术.
故答案为:
(1)人工合成 密码子具有简并性,基因序列不同,蛋白质可以相同 PCR 热稳定性DNA聚合酶(或Taq酶)
(2)农杆菌的Ti质粒 T-DNA
(3)DNA分子杂交 组织培养
材料一:人类可利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素.所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子,通过人工合成若干DNA片段,拼接而成,并且在胰岛素-COOH端加上KDEL内质网滞留序列,避免胰岛素在植物细胞中的降解.将该基因置于果实专一性启动子的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中,在番茄的果实中表达人胰岛素.
材料二:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性,科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造,使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性.
(1)材料一中基因工程操作是采用______方法获得目的基因的.获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因中编码氨基酸的碱基序列不同,但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同,这是因为______.要想在体外获得大量该目的基因的片段,可以采用______技术.
(2)根据上述描述,转基因操作时所用的载体是______,载体上的______可以转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上.
(3)材料二属于______工程范畴.该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,对______进行改造,或制造一种______的技术.
正确答案
解:(1)根据题干信息可知材料一中基因工程操作是采用人工合成方法获得目的基因的.虽然获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因中编码氨基酸的碱基序列不同,密码子具有简并性(或一种氨基酸有多个密码子),基因序列不同,蛋白质可以相同,所以但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同.目的基因可以采用PCR技术扩增产生大量的目的基因.
(2)根据“将该基因置于果实专一性启动子的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中”可知该过程的载体是农杆菌的Ti质粒,质粒上的T-DNA可以转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上.
(3)材料二中的技术属于蛋白质工程的范畴,该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过对基因修饰或基因合成,对现有的蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质的技术.
故答案为:
(1)人工合成 密码子具有简并性(或一种氨基酸有多个密码子),基因序列不同,蛋白质可以相同 PCR
(2)农杆菌的Ti质粒 T-DNA
(3)蛋白质 现有蛋白质 新蛋白质
解析
解:(1)根据题干信息可知材料一中基因工程操作是采用人工合成方法获得目的基因的.虽然获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因中编码氨基酸的碱基序列不同,密码子具有简并性(或一种氨基酸有多个密码子),基因序列不同,蛋白质可以相同,所以但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同.目的基因可以采用PCR技术扩增产生大量的目的基因.
(2)根据“将该基因置于果实专一性启动子的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中”可知该过程的载体是农杆菌的Ti质粒,质粒上的T-DNA可以转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上.
(3)材料二中的技术属于蛋白质工程的范畴,该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过对基因修饰或基因合成,对现有的蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质的技术.
故答案为:
(1)人工合成 密码子具有简并性(或一种氨基酸有多个密码子),基因序列不同,蛋白质可以相同 PCR
(2)农杆菌的Ti质粒 T-DNA
(3)蛋白质 现有蛋白质 新蛋白质
如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线.图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点.
据图回答:
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用______限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因.筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含______的培养基上进行.
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是______(填字母代号).
A.启动子 B.tetR C.复制原点 D.ampR
(3)过程①可采用的操作方法是______(填字母代号).
A.农杆菌转化 B.大肠杆菌转化 C.显微注射 D.细胞融合
(4)过程②采用的生物技术是______.
(5)对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体.这利用了细胞的______性.
(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用______(填字母代号)技术.
A.核酸分子杂交 B.基因序列分析 C.抗原-抗体杂交 D.PCR.
正确答案
解:(1)由图中信息可知,载体上有HindⅢ和BamHⅠ酶切位点,目的基因上也有它们的酶切位点,应用此2种酶切.当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后,tetR基因被人乳铁蛋白基因隔开,不是完整的,而ampR基因是完整的,所以筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要含氨苄青霉素的培养基上进行.
(2)能让目的基因开始表达的是启动子,启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列,是基因的一个组成部分,控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度.
(3)将目的基因导入到动物中常用显微注射法.
(4)早期胚胎移入代孕牛的体内利用的是胚胎移植的技术.
(5)对早期胚胎进行切割,经过程胚胎移植过程可获得多个新个体都发育成了个体,这体现了细胞全能性.
(6)一般检测目的基因是否表达里用抗原-抗体杂交的方法.
故答案为:
(1)HindⅢ和BamHⅠ氨苄青霉素
(2)A (3)C
(4)胚胎移植
(5)全能
(6)C
解析
解:(1)由图中信息可知,载体上有HindⅢ和BamHⅠ酶切位点,目的基因上也有它们的酶切位点,应用此2种酶切.当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后,tetR基因被人乳铁蛋白基因隔开,不是完整的,而ampR基因是完整的,所以筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要含氨苄青霉素的培养基上进行.
(2)能让目的基因开始表达的是启动子,启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列,是基因的一个组成部分,控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度.
(3)将目的基因导入到动物中常用显微注射法.
(4)早期胚胎移入代孕牛的体内利用的是胚胎移植的技术.
(5)对早期胚胎进行切割,经过程胚胎移植过程可获得多个新个体都发育成了个体,这体现了细胞全能性.
(6)一般检测目的基因是否表达里用抗原-抗体杂交的方法.
故答案为:
(1)HindⅢ和BamHⅠ氨苄青霉素
(2)A (3)C
(4)胚胎移植
(5)全能
(6)C
图表示某抗虫水稻主要培育流程.请据图分析回答问题:
(1)过程①需要的工具酶有______.过程②常用______溶液处理土壤农杆菌,使其成为感受态.过程④依据的生物学原理是______.
(2)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造.下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(图上标注了部分基因及部分限制酶作用位点).请据图分析回答问题:
①人工改造时,要使抗虫基因表达,还应插入______.
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理,其目的是:第一,去除质粒上的______两个基因(用图中基因字母符号表示),以保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于______的准确插入.第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等.
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒.分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,结果是在含______的培养基上能够生长.
(3)限制酶Ⅱ识别的核苷酸序列及切割位点为-G↓ACGTC-(“↓”表示切割位点),请在答题纸提供的双链上标出切割DNA分子后形成的黏性末端上的碱基______.
正确答案
解:(1)过程①表示基因表达载体的构建,需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶.过程②常用CaCl2溶液处理土壤农杆菌,使其成为感受态,使目的基因容易导入.过程④表示植物组织培养,依据的生物学原理是植物细胞的全能性.
(2)①基因表达载体一般由目的基因、标记基因、启动子和终止子等部分组成,人工改造时,要使抗虫基因表达,还应插入启动子.
②如图tms和tmr是控制生长素和细胞分裂素的基因所以应去除,保证T-DNA进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长;为了目的基因的准确插入应使质粒带有单一限制酶作用位点.
③限制酶Ⅱ分别切割经过②过程改造的理想质粒,则没有抗四环素的标记基因,所以在含四环素和卡那霉素的培养基培养后,在含四环素的培养基中不能生长,在含卡那霉素的培养基能够生长.
(3)限制酶Ⅱ识别的核苷酸序列及切割位点为-G↓ACGTC-(“↓”表示切割位点),所以切割DNA分子后形成的黏性末端上的碱基序列为.
故答案为:
(1)限制酶和DNA连接酶 CaCl2 植物细胞的全能性
(2)①启动子 ②tms和tmr 目的基因 ③卡那霉素
(3)
解析
解:(1)过程①表示基因表达载体的构建,需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶.过程②常用CaCl2溶液处理土壤农杆菌,使其成为感受态,使目的基因容易导入.过程④表示植物组织培养,依据的生物学原理是植物细胞的全能性.
(2)①基因表达载体一般由目的基因、标记基因、启动子和终止子等部分组成,人工改造时,要使抗虫基因表达,还应插入启动子.
②如图tms和tmr是控制生长素和细胞分裂素的基因所以应去除,保证T-DNA进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长;为了目的基因的准确插入应使质粒带有单一限制酶作用位点.
③限制酶Ⅱ分别切割经过②过程改造的理想质粒,则没有抗四环素的标记基因,所以在含四环素和卡那霉素的培养基培养后,在含四环素的培养基中不能生长,在含卡那霉素的培养基能够生长.
(3)限制酶Ⅱ识别的核苷酸序列及切割位点为-G↓ACGTC-(“↓”表示切割位点),所以切割DNA分子后形成的黏性末端上的碱基序列为.
故答案为:
(1)限制酶和DNA连接酶 CaCl2 植物细胞的全能性
(2)①启动子 ②tms和tmr 目的基因 ③卡那霉素
(3)
扫码查看完整答案与解析