- 土壤中分解尿素的微生物或细菌的分离与计数
- 共916题
从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．
（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．培养噬盐菌的菌样应从______环境采集．
（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择______的培养基，并在______条件下培养．
（3）接种前要对培养基进行______处理．在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在______条件下进行．
（4）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法．
获得图A效果的接种方法是______，图B效果的接种方法是______．一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是______，应当怎样操作？
（5）如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是______，应该保持______等不变（至少答两项）．
正确答案
解：（1）噬盐菌的菌样应从高盐环境采集，如高盐海滩等．
（2）目的微生物能够产生淀粉酶说明其碳源是淀粉，筛选菌株时应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养．
（3）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在实验中要注意在无菌条件下进行｡
（4）据图分析，A培养皿中的菌落均匀属于稀释涂布平板法接种，B培养皿中的菌落分为5个区域，属于平板划线法接种．题干中的同学的操作结果的原因是菌液浓度过高（或培养过程被杂菌污染），所以应该增大稀释倍数（或严格无菌操作，原因与操作要对应）．
（5）如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是温度，而无关变量应保持相同且适宜，因此应该保持纤维素的量与浓度、反应时间、pH等不变．
故答案为：
（1）海滩等高盐
（2）以淀粉为惟一碳源 高温
（3）高压蒸汽灭菌 无菌
（4）稀释涂布平板法 平板划线法 菌液浓度过高 增大稀释倍数（或培养过程被杂菌污染 严格无菌操作；或用接种环划下一区域前接种环没有灭菌 每划一个新区域前都要对接种环进行灭菌处理）（原因与操作要对应）
（5）温度 纤维素的量与浓度、反应时间、pH
解析
解：（1）噬盐菌的菌样应从高盐环境采集，如高盐海滩等．
（2）目的微生物能够产生淀粉酶说明其碳源是淀粉，筛选菌株时应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养．
（3）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在实验中要注意在无菌条件下进行｡
（4）据图分析，A培养皿中的菌落均匀属于稀释涂布平板法接种，B培养皿中的菌落分为5个区域，属于平板划线法接种．题干中的同学的操作结果的原因是菌液浓度过高（或培养过程被杂菌污染），所以应该增大稀释倍数（或严格无菌操作，原因与操作要对应）．
（5）如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是温度，而无关变量应保持相同且适宜，因此应该保持纤维素的量与浓度、反应时间、pH等不变．
故答案为：
（1）海滩等高盐
（2）以淀粉为惟一碳源 高温
（3）高压蒸汽灭菌 无菌
（4）稀释涂布平板法 平板划线法 菌液浓度过高 增大稀释倍数（或培养过程被杂菌污染 严格无菌操作；或用接种环划下一区域前接种环没有灭菌 每划一个新区域前都要对接种环进行灭菌处理）（原因与操作要对应）
（5）温度 纤维素的量与浓度、反应时间、pH
随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重．为了筛选出分解石油烃能力更强的微生物，人们不断地进行研究．请回答与此筛选过程有关的问题：
（1）一般来说，微生物生长过程中需要的营养物质包括碳源、氮源、水、无机盐等营养物质．分解石油烃的微生物一般要从土壤中分离，获取土壤样品的取样地点最好选在______．
如图为获取土壤样品后的培养研究过程：
（2）为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①～④所用培养基，其成分的特点是只有______为唯一碳源，从而有利于______的生长，抑制其他微生物的生长，这样的培养基可称做______培养基．
（3）④中的培养基从物理特征看属于______培养基，这可以通过往培养基中加入一定量的______来实现，对④进行接种常采用的两种方法分别是______和______．
（4）若发现在⑤中无法区分菌落，可以将③中取出的菌液______．
（5）在实验室应采用______法对培养基进行灭菌处理．在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在______条件下进行．
正确答案
解：（1）有些培养基可以抑制其他微生物的生长，这样的培养基可称做选择培养基．因此，为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①一④所用培养基，其成分的特点是只含石油烃一种碳源，从而有利于目的菌的生长，抑制其他微生物的生长．
（2）④中的培养基从物理特征看属于固体培养基，可加入凝固剂琼脂处理，常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）若发现无法区分菌落，说明稀释度不够，可以将重新进行梯度稀释．
（4）配置好的培养基进行高压蒸汽灭菌，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行．
故答案为：
（1）只含石油烃一种碳源 目的菌 选择
（2）固体 琼脂 平板划线法 稀释涂布平板法
（3）进行梯度稀释
（6）高压蒸汽灭菌 无菌
解析
解：（1）有些培养基可以抑制其他微生物的生长，这样的培养基可称做选择培养基．因此，为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①一④所用培养基，其成分的特点是只含石油烃一种碳源，从而有利于目的菌的生长，抑制其他微生物的生长．
（2）④中的培养基从物理特征看属于固体培养基，可加入凝固剂琼脂处理，常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）若发现无法区分菌落，说明稀释度不够，可以将重新进行梯度稀释．
（4）配置好的培养基进行高压蒸汽灭菌，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行．
故答案为：
（1）只含石油烃一种碳源 目的菌 选择
（2）固体 琼脂 平板划线法 稀释涂布平板法
（3）进行梯度稀释
（6）高压蒸汽灭菌 无菌
【生物--选修1生物技术实践专题】
从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．
（1）接种前要对培养基进行______处理．在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在______条件下进行．
（2）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．如培养纤维素分解菌的菌样应从______环境中采集．
（3）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制______培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的______．
（4）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是______，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生______来筛选纤维素分解菌．某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是______．
正确答案
解：（1）微生物的培养最重要的程序之一就是防止杂菌的污染，防止杂菌的污染首先要对培养基进行灭菌处理，培养基灭菌的方式是高压蒸汽灭菌法；在微生物接种的操作中也要注意无菌操作．
（2）分离纤维素分解菌要从富含纤维素的环境中寻找，以纤维素为唯一碳源的培养基上进行选择，就可以分离到纤维素分解菌．
（3）以纤维素为唯一碳源的培养基属于选择培养基．
（4）刚果红可以和纤维结合形成红色复合物，纤维素分解菌将纤维素分解以后，红色复合物消失，会形成透明圈；纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够）．
答案：（1）高压蒸汽灭菌 无菌
（2）富含纤维素
（3）选择 碳源
（4）刚果红 透明圈 菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够）
解析
解：（1）微生物的培养最重要的程序之一就是防止杂菌的污染，防止杂菌的污染首先要对培养基进行灭菌处理，培养基灭菌的方式是高压蒸汽灭菌法；在微生物接种的操作中也要注意无菌操作．
（2）分离纤维素分解菌要从富含纤维素的环境中寻找，以纤维素为唯一碳源的培养基上进行选择，就可以分离到纤维素分解菌．
（3）以纤维素为唯一碳源的培养基属于选择培养基．
（4）刚果红可以和纤维结合形成红色复合物，纤维素分解菌将纤维素分解以后，红色复合物消失，会形成透明圈；纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够）．
答案：（1）高压蒸汽灭菌 无菌
（2）富含纤维素
（3）选择 碳源
（4）刚果红 透明圈 菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够）
关于灭菌和消毒的不正确理解是（ ）
正确答案
解析
解：A、灭菌是指采用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子A正确；
B、消毒是指消除或杀灭外环境中的病原体，使其无害化，灭菌则是要将所有的微生物和病毒全部杀灭，以达到无菌的目的，灭菌一定可以达到消毒的目的，但消毒不一定能达到灭菌的效果，B错误；
C、接种工具常用灼烧法灭菌，C正确；
D、常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等，灭菌可以采用高温蒸汽灭菌法，D正确．
故选：B．
为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作．
（1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是______和______．制备的培养基常用______法进行灭菌．
（2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液．为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行______，用______法接种于固体培养基上．接种后的培养基______状态放入培养箱．
正确答案
解：（1）由于实验目的是分离果胶酶产生菌，所以培养基中需要加入果胶，在配制过程中，需要用蒸馏水先配制成液体培养基，再凝固成固体培养基．制备的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌．
（2）为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行梯度稀释，并用稀释涂布法接种于固体培养基上．接种后的培养基倒置状态放入培养箱，防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染．
故答案为：
（1）果胶和蒸馏水 高压蒸汽灭菌
（2）梯度稀释 稀释涂布 倒置
解析
解：（1）由于实验目的是分离果胶酶产生菌，所以培养基中需要加入果胶，在配制过程中，需要用蒸馏水先配制成液体培养基，再凝固成固体培养基．制备的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌．
（2）为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行梯度稀释，并用稀释涂布法接种于固体培养基上．接种后的培养基倒置状态放入培养箱，防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染．
故答案为：
（1）果胶和蒸馏水 高压蒸汽灭菌
（2）梯度稀释 稀释涂布 倒置
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