- 土壤中分解尿素的微生物或细菌的分离与计数
- 共916题
如图为平板划线接种示意图，划线按1区到4区及由a到c顺序，相关叙述正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，共划线12次，所以接种环应灼烧灭菌13次，A正确；
B、由于每次划线的菌种都来自上一次划线的末端，所以在操作规范情况下，发现1区菌落最多，B正确；
C、接种后将平板倒置，放入培养箱中培养，以防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染，C正确；
D、该种接种方法可用于进行微生物的分离纯化，D正确．
故选：ABCD．
微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、将微生物接种到固体培养基中的方法通常为平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；
B、稀释涂布平板法接种可以形成单菌落，所以常用来进行微生物的计数，平板划线法常用来筛选分离微生物，B错误；
C、两种接种方法在培养基中形成单个菌落，C正确；
D、为防止杂菌污染．接种工具需要灭菌后使用，D正确；
故选：B．
回答下列有关微生物及其培养的相关问题．
常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差．科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母．请分析回答：
（1）微生物实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是______；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该将器皿．图1是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙指示的结构依次是______．
（2）制备酵母菌培养基要进行平板操作，待平板冷凝后，要将培养皿倒置，其主要原因是______．
（3）取从自然界中采集的葡萄，然后在超净台上将葡萄置于0.1%氯化汞水溶液中进行表面消毒5min，再用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后进行纯化培养．
图甲是经上述纯化培养的结果，在培养基上接种时划线的顺序是依次是[______]（用编号表示）．研究者在经过甲接种后得到了一个经培养后菌落分布如图乙所示的平板，推测接种时可能的操作失误是______．为了确定培养基是否被污染，需要进行的操作是：______．
（4）下表为某学生在筛选培养能利用木糖发酵的酵母菌时所配置的培养基配方，请指出其中的明显不足之处．______
（5）再将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上，并将所得的重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏______能力的酿酒酵母作为受体菌．
（6）将经上述流程培养获得的转基因酿酒酵母接种在含葡萄糖和木糖的培养基中进行酒精发酵能力测试．随着发酵的进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能______，即说明所需菌株培育成功．
正确答案
解：（1）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程．微生物实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是高压灭菌、干热灭菌；将培养皿放入灭菌锅之前通常用牛皮纸或报纸包扎避免灭菌后的再次污染．图1中甲是安全阀，乙是排气阀．
（2）待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染．
（3）在培养基上接种时划线的顺序依次是每一区的划线应从前一区划线的末端位置开始划线，从而能将菌种逐区减少，所以划线顺序是1-3-2；培养后菌落分布不均匀可能是接种时涂布不均匀造成的．为了确定培养基是否被污染，可以培养空白平板以作为对照．
（4）表格中有蔗糖、木糖两种碳原，而筛选培养能利用木糖发酵的酵母菌时，应该以木糖为唯一碳源．
（5）已知将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上，并将所得的重组质粒导入酵母菌．所以利用质粒标记基因表达的标记性状可以判断目的基因是否成功导入受体细胞，故应该选择缺乏尿嘧啶合成能力的酿酒酵母作为受体菌．
（6）转基因酿酒酵母能利用这葡萄糖和木糖进行发酵且对酒精耐受能力强，故应该接种在以葡萄糖和木糖为碳源的培养基中进行发酵能力测试．随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能利用葡萄糖和木糖产生酒精，且对酒精的耐受能力强．
故答案为：
（1）高压灭菌、干热灭菌 用牛皮纸包扎 安全阀、排气阀
（2）防止冷凝水污染培养基
（3）1-3-2 涂布不均匀 培养空白平板
（4）应该以木糖为唯一碳源
（5）尿嘧啶合成能力
（6）既能利用木糖，又能耐受酒精
解析
解：（1）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程．微生物实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是高压灭菌、干热灭菌；将培养皿放入灭菌锅之前通常用牛皮纸或报纸包扎避免灭菌后的再次污染．图1中甲是安全阀，乙是排气阀．
（2）待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染．
（3）在培养基上接种时划线的顺序依次是每一区的划线应从前一区划线的末端位置开始划线，从而能将菌种逐区减少，所以划线顺序是1-3-2；培养后菌落分布不均匀可能是接种时涂布不均匀造成的．为了确定培养基是否被污染，可以培养空白平板以作为对照．
（4）表格中有蔗糖、木糖两种碳原，而筛选培养能利用木糖发酵的酵母菌时，应该以木糖为唯一碳源．
（5）已知将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上，并将所得的重组质粒导入酵母菌．所以利用质粒标记基因表达的标记性状可以判断目的基因是否成功导入受体细胞，故应该选择缺乏尿嘧啶合成能力的酿酒酵母作为受体菌．
（6）转基因酿酒酵母能利用这葡萄糖和木糖进行发酵且对酒精耐受能力强，故应该接种在以葡萄糖和木糖为碳源的培养基中进行发酵能力测试．随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能利用葡萄糖和木糖产生酒精，且对酒精的耐受能力强．
故答案为：
（1）高压灭菌、干热灭菌 用牛皮纸包扎 安全阀、排气阀
（2）防止冷凝水污染培养基
（3）1-3-2 涂布不均匀 培养空白平板
（4）应该以木糖为唯一碳源
（5）尿嘧啶合成能力
（6）既能利用木糖，又能耐受酒精
从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种的方法不包括（ ）
正确答案
解析
解：A、根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基，例如培养自养型的菌，在培养基中不需加入碳源，A正确；
B、不同的微生物需要不同的生长因子，根据需要的菌可以加入在培养基中加入相应的生长因子进行分离，B正确；
C、根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素，C正确；
D、灭菌会杀灭所有微生物，D错误．
故选：D．
赤霉病是由雪瘸镰刀菌等真菌感染引起的，广泛发生在小麦等粮食作物上．雪腐镰刀菌代谢产生的脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON，分子式为C15H20O6）严重影响禽畜生产和人体健康．请分析回答下列问题：
（1）下列微生物与雪腐镰刀菌的细胞结构类似的是______（选填选项前的符号）．
a．酵母菌 b．醋酸杆菌 c．毛霉 d．乳酸菌 e．大肠杆菌
（2）为探究DON的致畸性是否与细胞的染色体变异有关，可向动物细胞培养液中加入一定剂量的DON，在培养箱中保温培养一段时间后，在显微镜下观察染色体的______．
（3）某同学为筛选专一降解DON的菌，配制了下列培养基，在适宜条件下培养：
①为实现筛选目的，步骤I所使用的培养基配方中，应去除并加入______．
②为实现目的菌的分离和计数，步骤Ⅱ所使用的培养基中还应加入______制成平板，采用的接种方泫是______．
③步骤Ⅲ的目的是______．
正确答案
解：（1）雪腐镰刀菌是真菌，酵母菌与毛霉也是真菌，结构相似．
（2）动物细胞的培养需要在CO2培养箱中进行．通过在显微镜下观察染色体的数目和形态，可以识别是否发生了染色体变异．
（3）为筛选专一降解DON的菌，在培养基配方中，不应加入葡萄糖，而应加入DON．分离和计数目的菌，使用加入琼脂的固体培养基中，并制成平板，采用稀释涂布法进行接种．挑选出单菌落后，需继续培养，增加分解DON的真菌数量．
故答案为：
（1）a、c
（2）数目和形态
（3）①葡萄糖 DON
②琼脂 （稀释）涂布法
③使分解DON 的真菌数量增加
解析
解：（1）雪腐镰刀菌是真菌，酵母菌与毛霉也是真菌，结构相似．
（2）动物细胞的培养需要在CO2培养箱中进行．通过在显微镜下观察染色体的数目和形态，可以识别是否发生了染色体变异．
（3）为筛选专一降解DON的菌，在培养基配方中，不应加入葡萄糖，而应加入DON．分离和计数目的菌，使用加入琼脂的固体培养基中，并制成平板，采用稀释涂布法进行接种．挑选出单菌落后，需继续培养，增加分解DON的真菌数量．
故答案为：
（1）a、c
（2）数目和形态
（3）①葡萄糖 DON
②琼脂 （稀释）涂布法
③使分解DON 的真菌数量增加
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