热门试卷

番茄果实成熟过程中，某种酶（PG）开始合成并显著增加，促使果实变红变软．但不利于长途运输和长期保鲜．科学家利用反义RNA技术（见图解），可有效解决此问题．该技术的核心是，从番茄体细胞中获得指导PG合成的信使RNA，继而以该信使RNA为模板人工合成反义基因并将之导入离体番茄体细胞，经组织培养获得完整植株．新植株在果实发育过程中，反义基因经转录产生的反义RNA与细胞原有mRNA（靶mRNA）互补形或双链RNA，阻止靶mRNA进一步翻译形成PG，从而达到抑制果实成熟的目的．请结合图解回答．

（1）若要将人工合成的完整反义基因克隆出成百上千的反义基因，可用______（写出中文名称）技术实现体外快速扩增．

（2）假设PCR反应中的初始只有一个DNA作为模板，n轮循环的产物中含有模板DNA链的DNA分子有______个、含有人工合成的DNA引物的DNA分子有______个．若DNA分子中共含900个碱基对，碱基数量满足：，经5次循环，至少需要向试管中加入______个腺嘌呤脱氧核苷酸（不考虑引物所对应的片段）．

（3）PCR反应中所用到的酶是______，其具有______的特性．

（4）普通番茄细胞导入目的基因后，先要接种到诱导培养基上培养，脱分化后得到______，再转接到分化培养基上，诱导出试管苗，然后进一步培养成正常植株．

资料显示，近十年来，PCR技术（DNA聚合酶链式反应技术）成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制（如图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体．请据图回答：

（1）加热至94℃的目的是使DNA样品的______键断裂，这一过程在生物体细

胞内是通过______酶的作用来完成的．通过分析得出新合成的DNA分子中，A=T，C=G，这个事实说明DNA分子的合成遵循______．

（2）通过PCR技术使DNA分子大量复制时，若将一个用15N标记的模板DNA分子（第一代）放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制到第五代时，含15N标记的DNA分子单链数占全部DNA总单链数的比例为______．

（3）PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法．若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的______

A．白细胞DNA   B．病毒蛋白质 　   C．血浆抗体  　 D．病毒核酸．

多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术．它能以极少量的DNA为模板，在几个小时内复制出上百万份相同的DNA片段．请根据所学知识回答有关PCR技术的基本原理和应用问题．

（1）在80～100℃时，DNA双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性．当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链，称为______．PCR利用DNA的______原理，通过控制______控制双链的结聚与结合．

（2）为了解决高温导致DNA聚合酶是失活的问题，促成PCR技术的自动化，20世纪80年代科学家从水生耐热细菌Taq中分离得到了耐高温的______．实验室中微生物的筛选，是人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物生长，用于筛选目的菌株的培养基称为______．

（3）PCR反应的条件：稳定的缓冲液环境、______、分别与两条模板链结合的两种______、四种______、耐热的DNA聚合酶、能严格控制温度变化的温度设备．

（4）PCR一般要经历30多次循环，每次循环可以分为______三步．从第二次循环开始，上一次循环的产物也作为______参与反应．DNA聚合酶只能特异性地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增．如果在PCR反应中只有一个DNA片段，在6次循环后，反应体系中共有______个这样的DNA分子．

（5）简述目前PCR技术的具体应用（至少两点）______．

利用基因工程技术，可以使目的基因上特定的碱基发生替换，从而产生定向变异以获得性 能更优异的蛋白质，其基本过程如图所示，请回答：

（1）参照PCR技术，可用______方法使质粒DNA双链解开，甲过程中加入的一定长度的核苷酸链，其中一个位置碱基C替代了碱基A，其它的序列与目的基因的一条链互补，该多核苷酸链在质粒DNA复制中作为______．

（2）乙过程是表示在DNA聚合酶作用下DNA链延伸，要形成闭合环状DNA分子，还需要______酶的参与

（3）丙和丁过程表示质粒分别导入目的细胞，进行增殖并______，多代繁殖后，能指导突变蛋白质产生的质粒占总数的______．