热门试卷

一、下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。

据图回答：

（1）图中将人乳蛋白基因插入载体，需用            限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含            的培养基上进行。

（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是       （填字母代号）。

a.启动子    b .tetR    c.复制原点     d. ampR

（3）过程①可采用的操作方法是       （填字母代号）。

a.农杆菌转化   b.大肠杆菌转化    c.显微注射  d .细胞融合

（4）过程②可采用的生物技术是           。

（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的       性。

（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用       （填字母代号）技术。

a.核酸分子杂交 b.基因序列分析    c.抗原—抗体杂交    d. PCR

二、某地区从1964年开始使用杀虫剂杀灭蚊子幼虫，至1967年中期停用。下图是五年间蚊子幼虫基因型频率变化曲线。R表示杀虫剂抗性基因，S表示野生敏感型基因。据图回答：

（1）R基因的出现是                 的结果。

（2）在RR基因型频率达到峰值时，RS、SS基因型频率分别为4%和1%，此时R基因的频率为          。

（3）1969年中期RR基因型几近消失，表明在        的环境条件下，RR基因型幼虫比SS基因型幼虫的生存适应能力          。

（4）该地区从此不再使用杀虫剂。预测未来种群中，最终频率最高的基因型是      ，原因是                                    。

黄曲霉毒素B1 （AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶，将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。

( 1 ) AFB1属于                        类致癌因子。

( 2 ) AFB1能结合在DNA 的G 上，使该位点受损伤变为G ' ，在DNA复制中，G '会与A配对。现有受损伤部位的序列为，经两次复制后，该序列突变为               。

( 3 ）下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图

据图回答问题：

① 在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株，经测定，甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶：乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶，过程l 应选择        菌液的细胞提取总RNA ，理由是

② 过程Ⅱ中，根据图示，可以看出与引物结合的模版是

③ 检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用                     方法。

( 4 ）选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果间下表：

据表回答问题：

① 本实验的两个自变量，分别为                     。

② 本实验中，反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是                     。

③ 经测定，某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg ，则每千克饲料应添加     克AFB1解毒酶，解毒效果最好，同时节的了成本。

（5）采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高每的活性出发，设计语气的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的                     。

根据基因工程的有关知识，回答下列问题：·

（１）限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型有　  　　和　  　　。

（２）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是　                            　　。

（３）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即　　　　　DNA连接酶和　　　　　　　DNA连接酶。

（４）反转录作用的模板是　     　　，产物是　　    　。若要在体外获得大量反转录产物，常采用　　      　技术。

（５）基因工程中除质粒外，　　　　　和　　　　　　也可作为运载体。

（６）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是　　　　                                              　　　。

红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如右图

（1）图中①所指的是          技术。

（2）图中②所指的物质是                   ，③所指的物质是                   。

（3）培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换                   。

（4）检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的               细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成

一对表现型正常的夫妇，生了一个镰刀型细胞贫血症（常染色体隐性遗传病）患儿。在他们欲生育第二胎时，发现妻子的双侧输卵管完全堵塞，不能完成体内受精。医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断，过程如图。

请回答：

（1）过程①是指在体外进行的_______处理，从而使精子与卵子结合形成受精卵；过程②称为_______。

（2）在对胎儿进行镰刀型细胞贫血症的产前基因诊断时，要先从羊水中的胎儿细胞提取物质③_______进行PCR扩增。然后用MstⅡ对扩增产物进行切割，产生多个片段的酶切产物。据此判断，MstⅡ是一种_______酶。

（3）不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同，形成不同的电泳条带。该家庭成员的镰刀型细胞贫血症基因分析的电泳带谱如④，据此判断胎儿为_______（正常/患者/携带者）。

cry是能编码一种毒蛋白的抗虫基因。研究人员将cry基因转入水稻的核基因组中，构建并选育出一株抗虫水稻。请回答：

（1）要确定水稻染色体数目和形态特征的全貌，即染色体______型，可对处于有丝分裂______期的水稻染色体进行配对、分组和排队。要确定cry基因是否已在水稻细胞中表达，可用带荧光标记的毒蛋白抗体进行检测，如在细胞的______部位出现荧光，说明毒蛋白已被成功翻译。翻译时，氨基酸由对应的tRNA携带加到肽链上，直至核糖体到达mRNA上的______，多肽合成结束。

（2）将得到的转基因水稻在一相对封闭的环境中进行自交，发现从第6代开始水稻的抗虫能力逐代下降，推测昆虫主要是通过基因突变或______获得了对毒蛋白的解毒能力。经20代种植后，发现田间某些杂草也获得了抗虫能力，推测这些杂草主要是通过______获得了抗虫基因。

（3）已知不抗倒伏（A）对抗倒伏（a）为显性，抗虫（B）对不抗虫（b）为显性。上述各代水稻均不抗倒伏且水稻中的毒蛋白含量基本相同，则该水稻抗虫基因的基因型为______。现欲以该不抗倒伏抗虫水稻为一亲本，抗倒伏不抗虫水稻为另一亲本，用单倍体育种法选育抗倒伏抗虫品种，请用遗传图解表示选育过程，并作简要说明。

毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

（1）过程①中最常用的运载工具是_______，所需要的酶是限制酶和____________。

（2）在过程②中，用________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5％CO2的气体环境中，CO2的作用是_________。

（3）在过程③中，用_______处理以获取更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行________处理。

（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_________。在胚胎移植前，通过_______技术可获得较多胚胎。

请回答基因工程方面的有关问题：

（1）利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。  图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_______。

②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。

（2）设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。

①第1组：_______；  ②第2组：_______。

（3） PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的  功能，这是因为_______。

（4）用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb

即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。

请回答胚胎工程和基因工程方面的问题：

（1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、＿＿＿＿、＿＿＿＿＿以及在母体中发育和产出等过程。

（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其＿＿＿＿＿。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和＿＿＿＿＿。

（3）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（4）利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是＿＿＿＿＿＿＿、基因表达载体的构建、＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是＿＿＿＿＿（显微注射法、农杆菌转化法），为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是＿＿＿＿＿（受精卵、乳腺细胞）。