热门试卷

2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：

(1)④过程应用的主要生物技术是_____________。

(2)杀虫基因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于____________工程技术范畴。

(3)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(图示部分基因及部分限制酶作用位点)，据图分析：

①．人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入_____________。

②．人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的________(基因)，保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于________。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。

③若用限制酶Ⅱ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是_____________。

(4)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是____________。

转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。 

(1)若要获得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割？___________，说明理由__________。要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒？___________。

(2)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有______基因，作为标记基因。

(3)②、③阶段是否可使用同种培养基？_________；理由是______。

(4)④阶段是否可使用不添加植物激素的培养基？_________；理由是_______。

下图为人β—珠蛋白基因与其mRNA杂交的示意图，①～⑦表示基因的不同功能区。据图回答： 

(1)上述分子杂交的原理是__________；细胞中β—珠蛋白基因中不能翻译的序列是___________(填写图中序号)。

(2)细胞中β—珠蛋白基因开始转录、识别和结合①中调控序列的酶是___________。

(3)决定β—珠蛋白基因的编码区有7000个碱基对，其中有1000个碱基对的序列不编码蛋白质，该序列叫________；剩下的序列最多能编码　　　　　________个氨基酸(不考虑终止密码子)。

(4)家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药。为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的________和________之间。

(5)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含Mg2＋)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、________和________。

(6)利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以______，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

科学家从某些能无限增殖的细胞质中分离出无限增殖的调控基因(prC)，该基因能激发许多动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答以下

(1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进动物细胞融合常用的诱导因素是________。

(2)利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第1次筛选的目的是___________，第2次筛选的目的是________。

(3)有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。

请回答：

①．酶A是指_______，酶B是指_______。

②．对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是____________；题目中Ⅱ所指的细胞是____，Ⅲ所指的细胞具有的特点是____。

③．若将目的基因转入胚胎干细胞中，胚胎干细胞也能够发育成转基因动物，所依据的生物学原理是___________。胚胎干细胞在体外培养的条件下可以增殖而不发生__________，但通过体外定向诱导，能培育出人造__________。

(4)也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程：

番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种，操作流程如图所示，请回答：

(1)过程①需要的工具酶有限制性核酸内切酶和_________。

(2)在构建基因表达载体时，除了需要目的基因外，作为载体的质粒还必需要有_________基因。

(3)提取目的基因采用的限制性核酸内切酶的识别序列和切点如下图所示。在目的基因的两侧各有1个酶的切点，请画出目的基因两侧被限制酶切割后形成的具有黏性末端的目的基因示意图。

(4)从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接导致多聚半乳糖醛酸酶基因表达中的__________阶段无法进行，最终使番茄获得了抗软化的性状，这也是基因敲除的方法之一。

(5)从细胞分化的角度看，培养②和培养③分别是植物细胞的___________和___________过程。

(6)上述转基因番茄会通过花粉将抗多聚半乳糖醛酸酶基因传播给其他植物而造成基因污染，原因是______________________，请你提出一个上述转基因工程的改良方案，以防止这种污染的发生：__________________。

下图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图。据图回答：

(1)随着科技发展，获取目的基因的方法也越来越多，若乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取的，该方法称为____。图中①过程与细胞中DNA 复制过程相比，该过程不需要____酶。③是在____(填酶的名称)作用下进行延伸的。

(2)在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。乙图为获得抗虫棉技术的流程。A过程需要的酶有____、____。图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是____。C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入____。

(3)离体棉花叶片组织经C、D、E成功地培育出了转基因抗虫植株，此过程涉及的细胞工程技术是_____，该技术的原理是____。

(4)检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用_________与提取出的________做分子杂交。

(5)科学家将植株细胞培养到_________，包上人工种皮，制成了神奇的人工种子，以便更好地大面积推广培养。