热门试卷

(选做题)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的__________处，DNA连接酶作用于_______处。(填“a”或“b”)

(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和__________法。

(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用_________技术，该技术的核心是__________和___________。

(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_________做探针进行分子杂交检测，又要用_____________方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有______个游离的磷酸基团。

(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越_______________。

(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是_________________。

(4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止_____________。

(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入_______酶。

(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_________________。

(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在_____________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。

(1)图中基因工程的基本过程可以概括为“四步曲”：即______；______；______；______。

(2)能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？_______，为什么？__________。

(3)过程②必需的酶是______酶，过程③必需的酶是______酶。

(4)若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，由③④⑤过程连续进行4次，至少需提供胸腺嘧啶____个。

(5)在利用AB获得C的过程中，必须用_______切割A和B，使它们产生______，再加入_____才可形成C。

(6)为使过程⑧更易处理，可用_______(药剂)处理D。

大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的lacZ基因中，lacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，培养基中的X-gal不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。

据图回答下列问题：

(1)作为受体大肠杆菌应________，以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌，置于试管Ⅱ中，并加入________。

(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入________等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。

(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：

①．________________________________________。

②．________________________________________。

科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性，从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。

方法思路：

①构建干扰质粒____[插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基(hTERT)的mRNA的干扰序列]和对照质粒PSG—CTR(插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列)。

②将空质粒PSG(不含目的基因)、干扰质粒PSG—AS和对照质粒分别感染肝癌细胞。

③一段时间后观察检测细胞的____。计算细胞凋亡率，绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图：

请回答：

(1)完成实验步骤中的空格：①．___________；②．___________。

(2)在构建质粒时，要将质粒导入大肠杆菌细胞并用_______培养基进行筛选鉴定，然后再提取。因此，在构建的表达载体质粒上必须含有__________。

(3)端粒酶可以通过以自身的_______为模板，_______为原料来合成端粒DNA。

(4)分析实验结果，得出实验结论：__________________________。

下图表示我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”主要培育流程，据图回答：

(1)①过程需要的工具酶是__________，④过程应用的生物技术主要是_________。

(2)杀虫基因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构没计并人工合成的，这属于_________工程技术。

(3)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的末端为，则该酶识别的核苷酸序列是__________。

(4)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。上图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(部分基因及部分限制性核酸内切酶作用位点)，据图分析：

①．人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入___________。

②．人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的__________(基因)，保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于__________；第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。

③．若用限制酶1分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒，分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是_______。

(5)检测“华恢1号”抗虫性状的方法是____________。

农业科技工作者在烟草中找到了一种抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请完成下列问题。

(1)为了能把该抗病基因转入到棉花细胞中，常用的载体是___________。

(2)要使载体与抗病基因连接，首先应使用________对其进行切割。假如载体被切割后，得到的分子末端序列为则能与该载体连接的抗病基因分子末端是_________。

(3)切割完成后，采用______将载体与该抗病基因连接，连接后得到的DNA分子称为_______。

(4)再将连接得到的DNA分子导入农杆菌，然后用该农杆菌去____棉花细胞，利用植物细胞具有的____性进行组织培养，从培养出的植株中_______出抗病的棉花。

(5)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是_______。转基因棉花获得的______是由该表达产物来体现的。

糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致西方发达国家把它列为第三号“杀手”。治疗该病的胰岛素过去主要从动物(如猪、牛)中获得，自20世纪70年代遗传工程(又称基因工程)发展起来以后，人们开始采用这种高新技术生产胰岛素，其操作基本过程如下图所示。

(1)图中基因工程的基本过程可概括为“四步曲”，即___________。

(2)图中的质粒存在于细菌细胞内，在基因工程中通常被用作____，从其分子结构可确定它是一种_____。

(3)根据碱基互补配对的规律，在______酶的作用下，把图中甲与乙拼接起来(即重组)，若a段与d段的碱基序列分别是AATTC和CTTAA，则b段与c段分别是_______。

(4)细胞进行分裂后，其中被拼接起来的质粒也是由一个变成两个，两个变成四个……质粒的这种增加方式在遗传学上称为__________。目的基因通过活动(即表达)后，能使细菌产生治疗糖尿病的激素，这是因为基因具有控制________合成的功能，它的过程包括_________。