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1 简答题 · 8 分

生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗,科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)。

(1)用于生产生物柴油的植物油不易发挥,宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。

(2)筛选产脂肪酶的微生物M时,选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供____,培养基灭菌采用的最适方法是____法。

(3)测定培养液中微生物数量,可选用_____法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产技术,可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。

(4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。

1 填空题 · 15 分

请回答下列有关细胞和分子生物学技术的问题:

(1)DNA粗提取的实验原理是:DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在      mol/L的NaCl溶液中的最低;鉴定DNA所用的试剂是     ,沸水浴加热呈       色;实验中使用酒精的目的是           ;实验过程中两次用到蒸馏水,第一次目的是使成熟的鸡血红细胞涨破释放出DNA,第二次目的是                。

(2)PCR技术的中文全称是                    ,在操作过程中需要添加引物,它的化学本质是          。反应过程中控制不同温度的意义是不同的: 90℃以上时         ,双链DNA解聚为单链;50℃左右时         ,引物与两条单链DNA结合; 72℃左右时延伸,Taq DNA聚合酶有最大活性,使DNA新链沿着         方向延伸。

(3)血红蛋白的提取和分离试验中,分离纯化常用的方法有凝胶色谱法和电泳法,前者的原理是                        ,后者的原理是                        ,在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是                        。

1 简答题 · 14 分

37.微生物及基因工程:

  据统计,维生素A缺乏每年导致67万名五岁以下儿童死亡。因此科学家研发了一种通过基因工程使得稻米的食用部分胚乳含有维生素A的前体——胡萝卜素的大米,胡萝卜素在人体内会转化成维生素A,可以缓解人体维生素A缺乏。这种大米因胡萝卜素含量极高因而呈现金黄色,被称为“黄金大米”。

  黄金大米的制作过程应用了根癌农杆菌介导法进行转基因操作,将能够合成胡萝卜素的酶的基因重组后导入大米的基因组中,具体原理如下图所示。

(1)图14原理中X表示______________________;Y过程表示________________________。

(2)图14中Z过程需要用到的植物激素是________。

 A.生长激素   B.细胞分裂素 

 C.赤霉素       D.脱落酸 

 E.乙烯           F.吲哚乙酸

  根癌农杆菌介导法转基因需要利用根癌农杆菌的Ti质粒完成,下图是Ti质粒的具体组成。(T-DNA区大小约17kb)

(3)若将图15质粒用限制酶I与限制酶II进行完全酶切(各个片段大小不一致),并用凝胶电泳分离酶切后的片段,则电泳结果应为上图16(箭头为电泳方向)中的____________。

  将胡萝卜素基因整合进入Ti质粒时,使用限制酶II进行酶切后进行连接,当整合后的Ti质粒进入农杆菌后,需要对农杆菌进行培养,下表为培养农杆菌用的YEB培养基。

(4)据表分析农杆菌的同化作用类型为____________型。

(5)该培养基从物理形态上分应属于____________培养基。培养基配制完成后需要进行高压蒸汽灭菌,其条件是____________________________________。

(6)由表中可知,该培养基含有下列营养成分中的____________。

          A.碳源     B.氮源     

     C.无机盐    D.生长因子

(7)为了筛选符合条件的农杆菌,可以在培养基中加入卡那霉素进行筛选。则可以在此培养基中生存的农杆菌类型为________________________________________________。

(8)根癌农杆菌介导法转基因原理如图17所示。当植物受伤时会产生一种信号分子,该信号会作用于农杆菌细胞表面的____________。试分析接受信号分子后农杆菌将T-DNA导入植物细胞的过程:___________________________________________________________________。



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