- 微生物的培养与应用
- 共1581题
下表所列培养基配方中，能作为选择培养基、鉴别培养基的依次是（ ）
正确答案
解析
解：（1）选择性培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求而设计的培养基允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长，利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来，所以③中加入青霉素的培养基属于选择培养基．
（2）伊红-美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，其原理是大肠杆菌能分解乳糖产生大量的混合酸，菌体带H+故菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽，所以①中加入伊红-美蓝的培养基属于鉴别培养基．
故选：B．
土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答相关问题：
（1）土壤中的细菌之所以能分解尿素是因为它们能合成______．
（2）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用______的培养基进行分离，并加入______指示剂进行鉴别．
（3）若取土样5g，应加入______mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液．因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成不同浓度的土壤溶液．取样稀释前，一定要______以减少误差．将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用______将菌液铺平．这种接种方法称为______．
（4）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有红色环带的菌落数，结果如下表，其中______倍的稀释比较合适．
正确答案
解：（1）土壤中的细菌之所以能分解尿素是因为它们能合成脲酶．
（2）尿素为唯一碳源的培养基上，只有能分解尿素的菌才能以尿素作为氮源生长繁殖，不能分解尿素的菌因缺乏氮源无法生长繁殖，因此分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用尿素为唯一碳源的培养基进行分离，分解尿素的菌在分解尿素时产生氨气，使酚红指示剂显红色，所以要加入酚红指示剂进行鉴别．
（3）若取土样5g，应加入45ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液，样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落的数目，选用一定稀释范围的样品进行培养，取样稀释前，一定要将菌液摇匀以减少误差；将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上．
（4）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有红色环带的菌落既是分解尿素的菌的菌落，估算样品中的活菌数时，往往选取菌落数在30到300之间的平板，分析表格是数据可知，105和106的稀释度平板菌落数在这一范围．
故答案为：
（1）脲酶
（2）尿素为唯一氮源 酚红
（3）45
（4）摇匀（震荡） 涂布器 稀释涂布平板法
（5）105或106
解析
解：（1）土壤中的细菌之所以能分解尿素是因为它们能合成脲酶．
（2）尿素为唯一碳源的培养基上，只有能分解尿素的菌才能以尿素作为氮源生长繁殖，不能分解尿素的菌因缺乏氮源无法生长繁殖，因此分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用尿素为唯一碳源的培养基进行分离，分解尿素的菌在分解尿素时产生氨气，使酚红指示剂显红色，所以要加入酚红指示剂进行鉴别．
（3）若取土样5g，应加入45ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液，样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落的数目，选用一定稀释范围的样品进行培养，取样稀释前，一定要将菌液摇匀以减少误差；将103-107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上．
（4）将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计具有红色环带的菌落既是分解尿素的菌的菌落，估算样品中的活菌数时，往往选取菌落数在30到300之间的平板，分析表格是数据可知，105和106的稀释度平板菌落数在这一范围．
故答案为：
（1）脲酶
（2）尿素为唯一氮源 酚红
（3）45
（4）摇匀（震荡） 涂布器 稀释涂布平板法
（5）105或106
如图中的4支试管分别代表4种微生物在半固体1号培养基中的生长状态，其中乙试管代表幽门螺杆菌的生长状态．下表则表示2号培养基的成分与含量．则下列各项分析与判断，正确的是（ ）
①甲、丙、丁三个试管中的微生物可能分别是固氮菌、产甲烷菌、酵母菌；
②将幽门螺杆菌转移到2号培养基继续培养，由于培养基营养新鲜而更有利于它的生长；
③丁试管中的微生物在2号培养基内不能生长，但与圆褐固氮菌同时接种在2号培养基上可以正常生长；
④在1号培养基中加入人体血清后可以培养乙肝病毒．
正确答案
解析
解：①甲、丙、丁三个试管中的微生物可能是固氮菌、产甲烷菌、酵母菌，①正确；
②乙是幽门螺杆菌，是微需氧菌，在大气或绝对厌氧环境下不能生长，但2号培养基缺少氮源，故幽门螺杆菌无法生长，②错误；
③2号试管中没有氮源，所以酵母菌无法再2号试管中进行培养，如果和固氮菌一起培养，则自生固氮菌能固定大气中的氮气，提供氮源，③正确；
④病毒属于高毒寄生生物，只能在活细胞内进行生命活动，所以在培养基上无法进行代谢，④错误．
所以，①③正确．
故选：C．
【生物--生物技术实践】
有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等．研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物．分析回答问题．
（1）培养基中加入的化合物A是______，为微生物的生长提供______，这种培养基属于______培养基．
（2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入______．
（3）在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度．若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是______，操作时采用______灭菌的方法；还可用______方法操作．
（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是______．
正确答案
纤维素
碳源
选择
刚果红
接种环
灼烧
稀释涂布平板
防止造成环境污染
解析
解：（1）要筛选到能产生纤维素酶的微生物，应使用选择培养基，在培养基中加入纤维素作为唯一的碳源，能在此培养基中存活的微生物就是能产生纤维素酶的微生物．
（2）刚果红可以和纤维素形成红色复合物，而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应．纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素，从而使菌落周围形成透明圈．
（3）获得纯净的菌株有两种方法，即平板划线法和稀释涂布平板法．平板划线操作时所用的接种环，每次接种之前都要灼烧，这是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物．
（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，避免细菌污染环境和感染操作者．
故答案为：
（1）纤维素 碳源 选择
（2）刚果红
（3）接种环 灼烧 稀释涂布平板
（4）防止造成环境污染
发酵工程的第一个重要工作是选种优良的单一纯种．消灭杂菌，获得纯种的方法不包括（ ）
正确答案
解析
解：A、根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基可以选择微生物种类，不能获得纯种，A正确；
B、在培养基中增减不同的生长因子的作用也是选择微生物，B正确；
C、根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸（DNA和RNA），它不会直接影响到微生物自身的遗传组成，即使被微生物利用，也是被分解为核苷酸后利用，所以培养基中加入不同比例的核酸，不会对微生物起选择作用，C错误；
D、抗菌素也可对生物起选择作用，D正确．
故选：C．
（1）此培养基能否用于植物组织培养？______，理由是______．
（2）培养基中加入尿素的目的是筛选______，这种培养基属于______培养基．
（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的______和______，实验需要振荡培养，原因是______．
（4）图中将细菌转到固体培养基上时，常采用______的方法接种，获得单菌落后继续筛选．
（5）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是______，需要消毒的是______（填序号）．①培养细菌用的培养基与培养皿 ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管 ③实验操作者的双手
（6）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．A同学的实验结果产生的原因可能有______（填序号）．
①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照
（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行______处理后，才能倒掉．
正确答案
解：（1）该培养基的成分中没有植物激素，因此不能用于植物组织培养．
（2）该实验的目的是筛选到能高效降解尿素的细菌，因此培养基中加入尿素的目的是能高效降解尿素的细菌（目的菌）．不能分解尿素的细菌将因缺少氮源无法生长繁殖，因此从功能上看，该培养基属于选择培养基．
（3）目的菌生长繁殖需要的氮源来自尿素，碳源来自葡萄糖；由于分解尿素的菌是需氧微生物，因此需要震荡培养．
（4）图中将细菌转到固体培养基上时，常采用涂布平板（划线）的方法接种，获得单菌落后继续筛选．
（5）在实验中，①培养细菌用的培养基与培养皿和②玻棒、试管、锥形瓶和吸管需要灭菌，③实验操作者的双手需要消毒．
（6）该同学与其他同学获得的菌落数差异很大，可能的原因是采用的土样不同，培养基灭菌不彻底，培养基被污染；或者是实验过程中没有进行无菌操作．
（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉．
故答案为：
（1）不能 缺少植物激素（或缺少植物需要的各种营养）
（2）目的菌 选择
（3）尿素 葡萄糖 为目的菌提供氧气
（4）涂布平板（划线）
（5）①和②③
（6）①②③
（7）灭菌
解析
解：（1）该培养基的成分中没有植物激素，因此不能用于植物组织培养．
（2）该实验的目的是筛选到能高效降解尿素的细菌，因此培养基中加入尿素的目的是能高效降解尿素的细菌（目的菌）．不能分解尿素的细菌将因缺少氮源无法生长繁殖，因此从功能上看，该培养基属于选择培养基．
（3）目的菌生长繁殖需要的氮源来自尿素，碳源来自葡萄糖；由于分解尿素的菌是需氧微生物，因此需要震荡培养．
（4）图中将细菌转到固体培养基上时，常采用涂布平板（划线）的方法接种，获得单菌落后继续筛选．
（5）在实验中，①培养细菌用的培养基与培养皿和②玻棒、试管、锥形瓶和吸管需要灭菌，③实验操作者的双手需要消毒．
（6）该同学与其他同学获得的菌落数差异很大，可能的原因是采用的土样不同，培养基灭菌不彻底，培养基被污染；或者是实验过程中没有进行无菌操作．
（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉．
故答案为：
（1）不能 缺少植物激素（或缺少植物需要的各种营养）
（2）目的菌 选择
（3）尿素 葡萄糖 为目的菌提供氧气
（4）涂布平板（划线）
（5）①和②③
（6）①②③
（7）灭菌
某一种细菌株要从环境中提取现成的亮氨酸（20种氨基酸中的一种）才能生长，此菌株对链霉素敏感．实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中细菌菌株类型．根据实验目的，选用的培养基类型是（ ）
注：L--亮氨酸 S--链霉素“+”--加入“-”--不加入
如：L-：不加亮氨酸 S+：加入链霉素
正确答案
解析
解：根据题目要求，筛选出不需要亮氨酸的菌株，即在没有亮氨酸的培养基上能够生长，应使用的培养基为L-、S可加可不加；筛选出抗链霉素的菌株应使用的培养基为S+、L可加可不加，筛选出不需要亮氨酸、抗链霉素的菌株应用的培养基L-、S+．
故选：B．
要将土壤中的自生固氮菌与其它细菌分离开，应将它们接种在（ ）
正确答案
解析
解：自生固氮菌能利用空气中的氮气，培养基中不加含蛋白胨等氮源物质，固氮菌能生长繁殖，不能固氮的菌不能生长繁殖．
故选：B．
通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物：
（1）在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；
（2）在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；
（3）在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌．
依次利用上述方法能从混杂的微生物群体中分离出（ ）
①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④圆褐固氮菌 ⑤根瘤菌．
正确答案
解析
解：（1）固氮菌的氮源氮气，在培养基中不需要氮源，所以缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，但是圆褐固氮细菌可以生长；
（2）霉菌是真菌，在培养基中加入青霉素后，青霉素可以抑制细菌和放线菌，但是不抑制真菌，所以加入青霉素的培养基可以选择出霉菌；
（3）培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌，所以可以筛选放线菌．
故选：B．
1943年，曾获诺贝尔生理及医学奖的美国科学家鲁里亚和德尔布吕克，为了研究大肠杆菌的抗噬菌体突变发生的时间，设计了如下实验．请阅读下列有关资料并回答问题．实验的方法步骤如图所示：
培养皿中培养基的基本配方：
实验分析：
（1）在培养基中加噬菌体的作用是______；加伊红-美蓝的目的是：______．
（2）由于大肠杆菌的同化作用类型是______，因此，在培养基中还加入了一些相应的物质，其中______可作为大肠杆菌生长的碳源，______可作为氮源．
（3）此培养基能否用于工业化培养产生人的生长激素的工程菌？为什么？______．
（4）该实验有两个假设
假设一：大肠杆菌的抗噬菌体突变发生在大肠杆菌与噬菌体接触之前．
假设二：大肠杆菌的抗噬菌体突变发生在大肠杆菌与噬菌体接触之后．
你认为图中的实验结果支持上述哪个假设：______，如果另一个假设成立的话，实验结果应该是：______
（5）在这个实验设计中，研究者是根据培养皿中菌落数的差异来推断______，从而证明了假设的成立．请你分析出现A4和A5实验结果的原因：______．
正确答案
解：（1）在培养基中加噬菌体的作用是选择具有抗噬菌体突变的大肠杆菌；加伊红-美蓝的目的是鉴别大肠杆菌菌落．
（2）在培养基中还加入了一些相应的物质，其中乳糖和蛋白胨可作为大肠杆菌生长的碳源，蛋白胨可作为氮源，因为大肠杆菌的营养类型是异养型．
（3）工业化培养产生人的生长激素的工程菌常用液体培养基，故不能用此培养基培养．
（4）因为AB两组中所有的培养皿中的菌落数没有显著差异，说明大肠杆菌的抗噬菌体突变发生在大肠杆菌与噬菌体接触之前．
（5）由题可知，根据培养皿中菌落数的差异可推断抗噬菌体突变发生的时间差异，证明了假设的成立，由于A5比A4发生突变的时间早，导致具有抗噬菌体突变的大肠杆菌数比A4多，培养皿中出现的菌落数就多．
故答案为：
（1）选择具有抗噬菌体突变的大肠杆菌 便于识别（鉴别）大肠杆菌的菌落
（2）异养型 乳糖、蛋白胨 蛋白胨
（3）不能 工业生产常用液体培养基
（4）支持假设一 A、B两组所有的培养皿中菌落数没有显著差异
（5）抗噬菌体变异发生时刻的差异 A5比A4发生突变的时间早，具有抗噬菌体突变的大肠杆菌数比A4多，培养皿中出现的菌落数就多
解析
解：（1）在培养基中加噬菌体的作用是选择具有抗噬菌体突变的大肠杆菌；加伊红-美蓝的目的是鉴别大肠杆菌菌落．
（2）在培养基中还加入了一些相应的物质，其中乳糖和蛋白胨可作为大肠杆菌生长的碳源，蛋白胨可作为氮源，因为大肠杆菌的营养类型是异养型．
（3）工业化培养产生人的生长激素的工程菌常用液体培养基，故不能用此培养基培养．
（4）因为AB两组中所有的培养皿中的菌落数没有显著差异，说明大肠杆菌的抗噬菌体突变发生在大肠杆菌与噬菌体接触之前．
（5）由题可知，根据培养皿中菌落数的差异可推断抗噬菌体突变发生的时间差异，证明了假设的成立，由于A5比A4发生突变的时间早，导致具有抗噬菌体突变的大肠杆菌数比A4多，培养皿中出现的菌落数就多．
故答案为：
（1）选择具有抗噬菌体突变的大肠杆菌 便于识别（鉴别）大肠杆菌的菌落
（2）异养型 乳糖、蛋白胨 蛋白胨
（3）不能 工业生产常用液体培养基
（4）支持假设一 A、B两组所有的培养皿中菌落数没有显著差异
（5）抗噬菌体变异发生时刻的差异 A5比A4发生突变的时间早，具有抗噬菌体突变的大肠杆菌数比A4多，培养皿中出现的菌落数就多
如图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物的实验过程．据图回答：
（1）上述实验中除培养外都必须在______旁进行操作．
（2）本实验中所用培养基配制后必须用______灭菌法进行灭菌，各种玻璃器皿所用的灭菌法是______．
（3）要使⑤中形成单个的菌落必须对培养液进行______后再进行涂布培养．
（4）如果要设计实验探究该实验分离出的细菌是否只能利用对羟基苯甲酸作碳源，你的实验设计思路是______．你的实验中最可能出现的结果是______．
正确答案
解：（1）采用富集方法从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物的实验过程中，除培养外都必须在酒精灯火焰旁进行操作，防止杂菌污染．
（2）培养基配制后必须用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，各种玻璃器皿所用的灭菌法是干热灭菌．
（3）要使⑤中形成单个的菌落必须对培养液进行稀释后再进行涂布培养．
（4）如果要设计实验探究该实验分离出的细菌是否只能利用对羟基苯甲酸作碳源，实验所用培养基是以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基．实验中最可能出现的结果是产生了能降解对羟基苯甲酸的单个菌落．
故答案为：
（1）酒精灯火焰
（2）高压蒸汽 干热灭菌
（3）稀释
（4）实验所用培养基是以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基 产生了能降解对羟基苯甲酸的单个菌落
解析
解：（1）采用富集方法从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物的实验过程中，除培养外都必须在酒精灯火焰旁进行操作，防止杂菌污染．
（2）培养基配制后必须用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，各种玻璃器皿所用的灭菌法是干热灭菌．
（3）要使⑤中形成单个的菌落必须对培养液进行稀释后再进行涂布培养．
（4）如果要设计实验探究该实验分离出的细菌是否只能利用对羟基苯甲酸作碳源，实验所用培养基是以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基．实验中最可能出现的结果是产生了能降解对羟基苯甲酸的单个菌落．
故答案为：
（1）酒精灯火焰
（2）高压蒸汽 干热灭菌
（3）稀释
（4）实验所用培养基是以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基 产生了能降解对羟基苯甲酸的单个菌落
下列关于生物技术实践的说法正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的蛋白质不进凝胶颗粒内部，移动速度较快，A错误；
B、细菌是原核生物，其细胞的分裂方式为二分裂，而有丝分裂属于真核生物的分裂方式B错误．
C、自养型微生物能够在缺少有机碳源的培养基上利用二氧化碳合成自身的有机物，C正确；
D、在血红蛋白的提取和分离实验中洗涤红细胞的目的是去除血浆中的杂蛋白，D错误．
故选：C．
MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性．为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如下表．下列说法不正确的是
（ ）
正确答案
解析
解：A、细菌是原核细胞，无细胞核，因而不能通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定，A正确；
B、第2组和第3组对比说明使用低浓度青霉素和高浓度蛋白H混合物可杀死MRSA菌，B错误；
C、由于第2组的青霉素是20μg/mL，而第3组的青霉素是2ug/mL，所以实验还需设计有2μg/mL青霉素做处理的对照组，C正确；
D、此实验设计只发现低浓度青霉素和高浓度蛋白H混合物可杀死MRSA菌，但不能揭示蛋白质H的作用机理，D正确．
故选：B．
为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效，某生物兴趣小组的同学设计了如下实验（符合无菌操作要求）．请分析下述验过程并回答下列问题
①用无菌水漱口，向漱口液中加入适量的该中药牙膏；
②配制牛肉膏蛋白胨固体培养基；
③将上述样品接种到培养基上，在适宜条件下进行培养；
④一段时间后，对培养结果进行观察并进行菌落计数
（1）牛肉膏蛋白胨固体培养基配制时一般加入______作为凝固剂．灭菌与调节pH的先后顺序是______．一般对配制的培养基采用______法灭菌．
（2）本实验样品接种时最好采用______方法．
（3）本实验设计中的一个明显错误是______，请加以改正：______．
（4）证明所用培养某已经彻底灭菌的方法是______．
正确答案
解：（1）制备牛肉青蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板；因此，牛肉膏蛋白胨固体培养基配制时一般加入琼脂作为凝固剂．灭菌与调节pH的先后顺序是先调节pH，后灭菌．培养基在分装前往往要进行高压蒸汽灭菌．
（2）因为此样品用固体培养基接种且培养一段时间后，培养基表面长出菌落，所以接种最好采用稀释涂布平板法．
（3）本实验设计中的一个明显错误是没有设置对照实验，应将漱口液分为两份，一份加牙膏，一份不加牙膏分别接种培养．
（4）证明所用培养某已经彻底灭菌的方法是对未接种的培养基进行培养，如无菌落出现，则证明培养基已彻底灭菌．
故答案为：
（1）琼脂 先调节pH，后灭菌 高压蒸汽灭菌
（2）稀释涂布平板
（3）没有设置对照实验 应将漱口液分为两份，一份加牙膏，一份不加牙膏分别接种培养
（4）对未接种的培养基进行培养，如无菌落出现，则证明培养基已彻底灭菌
解析
解：（1）制备牛肉青蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板；因此，牛肉膏蛋白胨固体培养基配制时一般加入琼脂作为凝固剂．灭菌与调节pH的先后顺序是先调节pH，后灭菌．培养基在分装前往往要进行高压蒸汽灭菌．
（2）因为此样品用固体培养基接种且培养一段时间后，培养基表面长出菌落，所以接种最好采用稀释涂布平板法．
（3）本实验设计中的一个明显错误是没有设置对照实验，应将漱口液分为两份，一份加牙膏，一份不加牙膏分别接种培养．
（4）证明所用培养某已经彻底灭菌的方法是对未接种的培养基进行培养，如无菌落出现，则证明培养基已彻底灭菌．
故答案为：
（1）琼脂 先调节pH，后灭菌 高压蒸汽灭菌
（2）稀释涂布平板
（3）没有设置对照实验 应将漱口液分为两份，一份加牙膏，一份不加牙膏分别接种培养
（4）对未接种的培养基进行培养，如无菌落出现，则证明培养基已彻底灭菌
临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验．实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性．
回答下列问题：
（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用______法或______法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得．
（2）取该单菌落适当稀释，用______法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板．
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A______；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B______；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明______；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的______．
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素______．
正确答案
解：（1）分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法．
（2）取该单菌落适当稀释，使其“均匀生长”的方法是用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养．
（3）在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌；透明圈的大小表示着此种抗生素抗菌的强弱．据此可判断抗菌强弱依次是A、C、B；D的透明圈中出现了一个菌落，说明该菌落对此种抗生素具有耐药性．
（4）根据（3）的分析，实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好．
故答案为：
（1）平板划线法 稀释涂布平板法
（2）稀释涂布平板法
（3）敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性较A的弱 耐药菌
（4）A
解析
解：（1）分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法．
（2）取该单菌落适当稀释，使其“均匀生长”的方法是用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养．
（3）在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌；透明圈的大小表示着此种抗生素抗菌的强弱．据此可判断抗菌强弱依次是A、C、B；D的透明圈中出现了一个菌落，说明该菌落对此种抗生素具有耐药性．
（4）根据（3）的分析，实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好．
故答案为：
（1）平板划线法 稀释涂布平板法
（2）稀释涂布平板法
（3）敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性较A的弱 耐药菌
（4）A
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