- 培养基成分及无菌技术
- 共460题
苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在若降解苯酚的微生物．某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，所以人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品，请回答下列问题：
（1）②中培养菌株的选择培养基中应加______作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基______（A．影响；B．不影响）细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用______法．
（2）④为对照、微生物在④中不生长、在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于______；使用______法可以在⑥上获得单菌落．采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？______
（3）如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？______
（4）实验过程中如何防止其它微生物的污染？______．
正确答案
解：（1）选择分解苯酚的菌的培养基是以苯酚为唯一碳源的培养基；苯酚是唯一的碳源，当苯酚消耗尽时，菌株因缺少碳源而不能继续繁殖，所以②中不同浓度的碳源A影响细菌数量；一般采用稀释涂布平板法来测定②中活菌数目．
（2）④与⑤培养基的主要区别在于④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤培养基的中加入苯酚作为碳源；使用释涂布平板法或平板划线法可以在⑥上获得单菌落．采用固体平板培养细菌时要倒置培养，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基．
（3）取5支洁净培养瓶→分别加入相同培养基加等量的苯酚，→分别接种5种等量的来自不同菌株的菌种→在相同的适宜条件下培养相同时间→再检测这5支瓶内培养基的苯酚的含量，从而比较不同菌株降解苯酚能力的大小．
（4）从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵：a．实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和和消毒；
b．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；
c．为避免周围环境中微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
d．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．
故答案为：
（1）苯酚 A 平板菌落计数（活菌计数或菌落计数）
（2）④含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚为唯一碳源 平板分离（稀释涂布平板或平板划线分离） 避免培养过程产生的水分影响微生物的生长
（3）用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量
（4）培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作
解析
解：（1）选择分解苯酚的菌的培养基是以苯酚为唯一碳源的培养基；苯酚是唯一的碳源，当苯酚消耗尽时，菌株因缺少碳源而不能继续繁殖，所以②中不同浓度的碳源A影响细菌数量；一般采用稀释涂布平板法来测定②中活菌数目．
（2）④与⑤培养基的主要区别在于④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤培养基的中加入苯酚作为碳源；使用释涂布平板法或平板划线法可以在⑥上获得单菌落．采用固体平板培养细菌时要倒置培养，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基．
（3）取5支洁净培养瓶→分别加入相同培养基加等量的苯酚，→分别接种5种等量的来自不同菌株的菌种→在相同的适宜条件下培养相同时间→再检测这5支瓶内培养基的苯酚的含量，从而比较不同菌株降解苯酚能力的大小．
（4）从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵：a．实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和和消毒；
b．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；
c．为避免周围环境中微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
d．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．
故答案为：
（1）苯酚 A 平板菌落计数（活菌计数或菌落计数）
（2）④含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚为唯一碳源 平板分离（稀释涂布平板或平板划线分离） 避免培养过程产生的水分影响微生物的生长
（3）用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量
（4）培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作
现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分如下表：
用这两种培养基分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离（ ）
正确答案
解析
解：（1）固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌，甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌；
（2）乙培养基中不含有机碳源，所以可用来分离培养自养型的自生固氮菌．
故选：C．
下表是筛选异养型细菌的培养基配方．
（1）苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供______（写全得分），该培养基从作用看属于______培养基．制备固体培养基时调节PH在______步骤后；对培养基进行灭菌的常用是方法______．
（2）图1是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图．则获得图B效果的接种方法是______．运用A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目______．在探究“酵母菌种群数量变化”实验已知每个计数室由25×16=400个小格组成，容纳液体的总体积为0.4mm3，观察到图2中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格共有蓝藻80个，则1ml样液中约有蓝藻______个
（3）在以尿素为唯一氮源的培养基中加______可初步鉴定该种细菌能够分解尿素，原理用方程式表示为______；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到______染色法．
正确答案
解：（1）微生物培养除了表格成分外还应该有碳源和氮源，可以由X提供．该培养基从作用看属于选择培养基，在制备固体培养基时一般要先溶化再调节PH值，常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法．
（2）B图为平板划线法；运用A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目低；5个中格共有蓝藻80个，则25个中格有400个蓝藻，25个中格的体积是0.4mm3，所以1ml样液中约有蓝藻400÷0.4×1000=106个．
（3）在以尿素为唯一氮源的培养基中加酚红指示剂可初步鉴定该种细菌能够分解尿素，原理用方程式表示为CO（NH2）2+H2O
故答案为：
（1）碳源和氮源 选择 溶化后 高压蒸汽灭菌法
（2）平板划线法 低 106
（3）酚红指示剂 CO（NH2）2+H2O-脲酶-→CO2+2NH3 刚果红
解析
解：（1）微生物培养除了表格成分外还应该有碳源和氮源，可以由X提供．该培养基从作用看属于选择培养基，在制备固体培养基时一般要先溶化再调节PH值，常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法．
（2）B图为平板划线法；运用A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目低；5个中格共有蓝藻80个，则25个中格有400个蓝藻，25个中格的体积是0.4mm3，所以1ml样液中约有蓝藻400÷0.4×1000=106个．
（3）在以尿素为唯一氮源的培养基中加酚红指示剂可初步鉴定该种细菌能够分解尿素，原理用方程式表示为CO（NH2）2+H2O
故答案为：
（1）碳源和氮源 选择 溶化后 高压蒸汽灭菌法
（2）平板划线法 低 106
（3）酚红指示剂 CO（NH2）2+H2O-脲酶-→CO2+2NH3 刚果红
下表为某些抗菌药物及其抗菌作用的原理，下列分析错误的是（ ）
正确答案
解析
解：A、分析题干信息可知，青霉素通过抑制细菌细胞壁的合成，细菌没有细胞壁会因大量吸水而涨破，正确；
B、分析题干信息可知，环丙沙星通过抑制DNA解旋酶的活性而抑制细菌DNA的复制过程，B正确；
C、分析题干信息可知，红霉素能与细菌细胞中的核糖体结合，从而使细菌内mRNA与核糖体的结合受阻，C错误；
D、分析题干信息可知，利福平抑制敏感型结核杆菌RNA聚合酶的活性，从而抑制转录过程，进而抑制基因的表达，D正确．
故选：C．
某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A．研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）．实验的主要步骤如图所示．请分析回答下列问题．
（1）培养基中加入化合物A的目的是______，这种培养基属于______培养基．
（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的______．
实验需要振荡，培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是______．
（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是______．
（4）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具要用______灭菌的方法．
（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是______．
（6）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用10-4、10-5、10-6稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿．从设计实验的角度看，还应设置的一组空白对照实验，目的是______．
（7）分离得来的目的菌往往带有一些特殊的基因和蛋白质．
①在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要．PCR扩增反应中加入引物的作用是______．
②利用凝胶过滤法分离该特殊蛋白质时（如图），操作中加样的正确顺序是______
正确答案
解：（1）培养基中加入化合物A是为分解化合物A的微生物提供碳源和氮源，分离出能分解化合物A的微生物；这中培养基从功能上分属于选择培养基．
（2）分析培养基的配方可知，该培养基由化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成，因此化合物A为目的菌提供了碳源和氮源；目的菌是需氧微生物，因此在培养过程中应该震荡培养，增加培养液中的溶氧量满足微生物对氧气的需求．
（3）获得纯净“目的菌”的关键是无菌技术，防止外来杂菌入侵．
（4）平板划线操作的工具是接种环，对于接种环的灭菌方法应该是灼烧灭菌．
（5））实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，防止造成环境污染．
（6）实验设计过程应遵循对照原则，该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备是否被杂菌污染．
（7）①PCR扩增反应中加入引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，提供DNA延伸起始位点．
②利用凝胶过滤法分离该特殊蛋白质时，操作的正确顺序应为图中的④①②③．
故答案为：
（1）筛选目的菌 选择
（2）化合物A 异养需氧型
（3）防止外来杂菌入侵
（4）灼烧
（5）防止造成环境污染
（6）证明培养基制备过程中是否被杂菌污染
（7）①结合在模板DNA上，提供DNA延伸起始位点 ④①②③
解析
解：（1）培养基中加入化合物A是为分解化合物A的微生物提供碳源和氮源，分离出能分解化合物A的微生物；这中培养基从功能上分属于选择培养基．
（2）分析培养基的配方可知，该培养基由化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成，因此化合物A为目的菌提供了碳源和氮源；目的菌是需氧微生物，因此在培养过程中应该震荡培养，增加培养液中的溶氧量满足微生物对氧气的需求．
（3）获得纯净“目的菌”的关键是无菌技术，防止外来杂菌入侵．
（4）平板划线操作的工具是接种环，对于接种环的灭菌方法应该是灼烧灭菌．
（5））实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，防止造成环境污染．
（6）实验设计过程应遵循对照原则，该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备是否被杂菌污染．
（7）①PCR扩增反应中加入引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，提供DNA延伸起始位点．
②利用凝胶过滤法分离该特殊蛋白质时，操作的正确顺序应为图中的④①②③．
故答案为：
（1）筛选目的菌 选择
（2）化合物A 异养需氧型
（3）防止外来杂菌入侵
（4）灼烧
（5）防止造成环境污染
（6）证明培养基制备过程中是否被杂菌污染
（7）①结合在模板DNA上，提供DNA延伸起始位点 ④①②③
扫码查看完整答案与解析