- 培养基成分及无菌技术
- 共460题
（1）在______（填图中编号）区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是______个细菌．据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是______（用编号表示）．
（2）如表是某微生物培养基成分．
①若培养从土壤中分离出来的自生固氮菌，该培养基应添加______，去除______．
②若要鉴别纤维素分解菌，可用______法，若要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入______．
正确答案
②
1
①→③→②
碳源
氮源
刚果红染色
酚红指示剂
解析
解：（1）分析题图可知，本图是平板划线操作后的实验结果，②区出现了单个菌落，产生的菌落是由一个细菌生长繁殖而来的，分析培养基上细菌的分布可知，①③②区菌落数越来越少，所以划线操作的顺序是①③②．
（2）①自生固氮菌能自身固氮而获得氮源，但自身无法获得碳源，故应在此培养基中增加有机碳源，去除氮源（NH4）2SO4．
②若要鉴别纤维素分解菌，可用刚果红染色法，若要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入酚红指示剂．
故答案为：
（1）②1 ①→③→②
（2）①碳源 氮源 ②刚果红染色 酚红指示剂
如图为利用人成纤维细胞（具分裂能力、能在HAT培养基上成活）和小鼠骨髓瘤细胞（具分裂能力、不能在HAT培养基上存活）进行人类基因定位的操作示意图，请回答：
（1）图示技术名称为______，该技术的基础是______技术．
（2）操作所用的成纤维细胞应在______代以内；该过程中区别于原生质体融合的方法是用______处理．
（3）HAT培养基属于选择培养基，其中需要加入______等天然物质．为防止培养过程中的污染还要在培养液中添加一定量的______．图示操作中加入乌本苷的目的______．
正确答案
解：（1）图示表示骨髓瘤细胞与成纤维细胞的融合过程，需要采用动物细胞融合技术，该技术的基础是动物细胞培养技术．
（2）操作所用的成纤维细胞应在10代以内，10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型；可以采用物理（离心、振动）、化学（PEG）、生物诱导（灭活的病毒）融合方法，其中区别于原生质体融合的方法是生物法，即用灭活的病毒处理．
（3）动物细胞培养时，需要在培养基中加入血浆（血清）等天然物质；为防止培养过程中的污染要在培养液中添加一定量的抗生素．培养基中会出现3中融合细胞，成纤维细胞自身融合、骨髓瘤细胞自身融合和杂交瘤细胞，为了除去成纤维细胞，则需要在培养基中加入乌本苷．
故答案为：
（1）动物细胞融合 动物细胞培养
（2）10 灭活病毒
（3）血浆（血清） 抗生素 除去成纤维细胞
解析
解：（1）图示表示骨髓瘤细胞与成纤维细胞的融合过程，需要采用动物细胞融合技术，该技术的基础是动物细胞培养技术．
（2）操作所用的成纤维细胞应在10代以内，10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型；可以采用物理（离心、振动）、化学（PEG）、生物诱导（灭活的病毒）融合方法，其中区别于原生质体融合的方法是生物法，即用灭活的病毒处理．
（3）动物细胞培养时，需要在培养基中加入血浆（血清）等天然物质；为防止培养过程中的污染要在培养液中添加一定量的抗生素．培养基中会出现3中融合细胞，成纤维细胞自身融合、骨髓瘤细胞自身融合和杂交瘤细胞，为了除去成纤维细胞，则需要在培养基中加入乌本苷．
故答案为：
（1）动物细胞融合 动物细胞培养
（2）10 灭活病毒
（3）血浆（血清） 抗生素 除去成纤维细胞
微生物需要的营养物质包括碳源、氮源、生长因子、水和无机盐，据此可以在培养基中控制某种化学物质的有无、来分离筛选微生物．如加入过量的氯化钠可以抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长；青霉素等抗生素能抑制细菌细胞壁的合成．如表是用于分离筛选硝化细菌、金黄色葡萄球菌、酵母的培养基的部分成分．下列有关叙述正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、配置培养基时，在各种成分都溶化后分装前，要进行调pH，A错误；
B、硝化细菌是自养生物，能利用无机碳源，B错误；
C、金黄色葡萄球能够生活在高渗环境下，所以培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选，C错误；
D、在该培养基中加入适量的青霉素和有机碳源，可筛选培养出酵母菌，D正确．
故选：D．
下表为一种培养液的配方，试根据表中内容作答：
（1）若用于培养微生物，该培养液中有______类营养物质．
（2）若用来培养固氮微生物则应除去的成分是______，应加入的物质是______．若用来进行植物的无土栽培则不易成功，原因是______．若用来培养金黄色葡萄球菌并观察其菌落的形态，除有机物外还应加入______．
（3）用来鉴定饮水中的大肠杆菌是否超标，除需加入有机物、琼脂外，还应加入______．如呈现______反应，则有大肠杆菌．
（4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，某同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落，该同学的实验结果产生的原因可能有______．（填序号）
①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照．
正确答案
解：
（1）碳酸氢铵提供碳源、氮源； 磷酸二氢钾、硫酸钙、氯化亚铁提供无机盐；维生素提供生长因子；水；若用于培养微生物，该培养液中有5类营养物质．
（2）固氮微生物能够固定氮元素，培养基中不用提供氮源．若用来培养固氮微生物则应除去的成分是（NH4）HCO3，应加入的物质是有机物．
（3）大肠杆菌代谢产物与伊红和美蓝结合，使聚落呈深紫色，并带有金属光泽．
（4）土样不同、培养基污染、操作失误均可能导致计数误差．
故答案为：
（1）五
（2）（NH4）HCO3 有机物 必需的矿质元素不全琼脂
（3）伊红、美蓝 紫色
（4）①②③
解析
解：
（1）碳酸氢铵提供碳源、氮源； 磷酸二氢钾、硫酸钙、氯化亚铁提供无机盐；维生素提供生长因子；水；若用于培养微生物，该培养液中有5类营养物质．
（2）固氮微生物能够固定氮元素，培养基中不用提供氮源．若用来培养固氮微生物则应除去的成分是（NH4）HCO3，应加入的物质是有机物．
（3）大肠杆菌代谢产物与伊红和美蓝结合，使聚落呈深紫色，并带有金属光泽．
（4）土样不同、培养基污染、操作失误均可能导致计数误差．
故答案为：
（1）五
（2）（NH4）HCO3 有机物 必需的矿质元素不全琼脂
（3）伊红、美蓝 紫色
（4）①②③
莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，可按下面程序选育能降解莠去津的细菌（目的菌）．请据图回答：（已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明）
（1）由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为______，目的是______．
（2）在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行______，将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和______法，从图中看本实验采用的是______（填“前者”或“后者”）．
（3）一段时间后，培养基出现无透明带和有透明带两种菌落，我们筛选的目的菌是______菌落中的细菌，该茵落生长所需的氮元素主要来源于______．
（4）为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基，应如何设置对照组？______．
正确答案
解：（1）据图分析，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为选择培养，目的是初步选择能降解莠去津的细菌（目的菌），并提高其密度．
（2）在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行梯度稀释，据图分析，本实验采用的是稀释涂布平板法接种的．
（3）目的菌可以降解培养基中的莠去津作为唯一氮源，并形成有透明带的菌落．
（4）本实验的对照组应该为配置的培养基灭菌后不接种，与实验组放在相同条件下培养．
故答案为：
（1）选择培养 初步选择能降解莠去津的细菌（目的菌），并提高其密度
（2）梯度稀释 稀释涂布平板 后者
（3）有透明带 莠去津
（4）配置的培养基灭菌后不接种，与实验组放在相同条件下培养
解析
解：（1）据图分析，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为选择培养，目的是初步选择能降解莠去津的细菌（目的菌），并提高其密度．
（2）在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行梯度稀释，据图分析，本实验采用的是稀释涂布平板法接种的．
（3）目的菌可以降解培养基中的莠去津作为唯一氮源，并形成有透明带的菌落．
（4）本实验的对照组应该为配置的培养基灭菌后不接种，与实验组放在相同条件下培养．
故答案为：
（1）选择培养 初步选择能降解莠去津的细菌（目的菌），并提高其密度
（2）梯度稀释 稀释涂布平板 后者
（3）有透明带 莠去津
（4）配置的培养基灭菌后不接种，与实验组放在相同条件下培养
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