- 动物细胞工程
- 共1959题
开学初，小源到建设银行营业网点兑换了此前在网上预约的中国高铁纪念币。这枚纪念币由中国人民银行发行，面额10元，每人限兑20枚，且需要提前预约。小源打算与班上同学分享自己的喜悦。他可以向大家这样介绍
①纪念币面额和实际购买力都是由中国人民银行规定的
②纪念币可以直接购买商品，也具有支付手段等货币职能
③纪念币发行量有限，具有一定的收藏价值和升值空间
④纪念币不能与同面额人民币等值流通，必须在规定时间地点使用
正确答案
解析
①错误，国家无权规定纪念币的实际购买力；④错误，纪念币与同面额人民币等值流通，在任何时间地点都可使用；由中国人民银行发行的纪念币属于法定货币，可以直接购买商品，也具有支付手段等货币职能，因其发行量有限，具有一定的收藏价值和升值空间，故②③正确。
知识点
人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断．如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：
（1）制备单克隆抗体过程中要用到______和______技术．
（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于______，使小鼠产生分泌相应______的淋巴细胞，此过程属于特异性免疫中的______免疫．
（3）在细胞内DNA合成一般有两条途径，主途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基喋呤可以阻断此途径．另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化作用合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径．
①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的______成分具有筛选杂交瘤细胞的作用．
②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是______．
（4）此过程生产的单克隆抗体可以与______特异性结合，从而诊断早孕．
正确答案
解析
解：（1）制备单克隆抗体的诱导过程有：正常小鼠免疫处理、动物细胞的融合、杂交瘤细胞的筛选与培养、专一抗体检验阳性细胞培养、单克隆抗体的提纯．要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术．
（2）如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，给小鼠注射的HCG相当于注射抗原，使小鼠产生分泌抗HCG抗体相应的效应B淋巴细胞．抗体是参与体液免疫的免疫活性物质．
（3））①氨基喋呤可以阻断在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA．因此配制的HAT培养基中添加氨基喋呤的成分具有筛选杂交瘤细胞的作用．
②杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体．
（4）抗体与抗原发生特异性结合．人绒毛膜促性腺激素（或HCG）是抗原，可以与抗HCG单克隆抗体发生特异性结合．
故答案为：
（1）动物细胞培养 动物细胞融合
（2）抗原 抗体 体液
（3）①氨基喋呤 ②能无限增殖并分泌特异性抗体
（4）人绒毛膜促性腺激素（或HCG）
“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述中正确的有几项（ ）
①重组质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来
②单克隆抗体制各过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞
③单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞
④基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因，酶切产物用DNA连接酶连接，为了保证成功率，需将获得韵产物筛选后导入受体细胞
⑤为了快速繁殖无子西瓜，需筛选出特定的体细胞才能进行组织培养．
正确答案
解析
解：①重组质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，但含有标记基因的细胞可能导入了重组质粒，也可能导入了普通质粒，故①错误；
②单克隆抗体制备的过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞，去除未融合的细胞和自身融合的细胞，故②正确；
③单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞
，即第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，故③正确；
④基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因，酶切产物用DNA连接酶连接，将获得的产物直接导入受体细胞，故④正确；
⑤为了快速繁殖无子西瓜，联会紊乱，不能产生可育配子，可筛选出分化程度低的体细胞进行组织培养，故⑤正确．
故选：C．
手足口病的罪魁祸首是肠道病毒EV71型．目前，科技工作者利用细胞工程方法，以该病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体．下列叙述正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，血清中的抗体，其中并不仅仅只含有一种抗体，还含有体内原有的抗体，化学性质不单一，故A错误；
B、由于单个效应B细胞是高度分化的动物细胞，不能无限繁殖，所以在体外培养不可能获得大量的抗体，故B错误；
C、杂交瘤细胞是特指效应B细胞和骨髓瘤细胞融合而成的细胞，而将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，若只考虑细胞间的两两融合情况，就可以形成三种杂交细胞，B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交瘤细胞，故C错误；
D、抗原-抗体杂交法可以鉴定特异性的蛋白质，具有准确、高效、简易、快速的优点，故D正确．
故选：D．
下列关于生物工程技术的叙述中，正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础，动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体，A正确；
B、植物组织培养的过程中，细胞通过有丝分裂不断增殖，在有丝分裂间期可能会发生基因突变，在细胞分裂期可能会发生染色体变异，但不会发生基因重组，因为基因重组发生在减数分裂过程中，B正确；
C、动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均不完全相同，动物细胞融合不能形成杂种个体，而植物体细胞杂交能形成杂种个体，但两者都能形成杂种细胞，C错误；
D、“试管婴儿”实质上就是“体外受精”、早期胚胎培养和“胚胎移植”的“产物”，无法使不能产生精子或卵细胞的夫妇能得到自己的孩子，D错误．
故选：AB．
运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的正确操作步骤是（ ）
①筛选杂交瘤细胞
②制备特异性抗原
③免疫动物
④制备免疫的细胞和骨髓瘤细胞
⑤能产生特定抗体的杂交瘤细胞
⑥大量培养杂交瘤细胞
⑦诱导细胞融合
⑧单克隆抗体的大量制备．
正确答案
解析
解：要获得单克隆抗体，首先需要②制备特异性抗原；将该抗原注射给③免疫动物；然后④制备免疫的细胞和骨髓瘤细胞；通过物理法、化学法或生物法⑦诱导细胞融合；由于融合细胞中可能含有自身融合细胞，因此需要①筛选杂交瘤细胞；在通过筛选获得⑤能产生特定抗体的杂交瘤细胞；最后⑥大量培养杂交瘤细胞，⑧单克隆抗体的大量制备．
因此运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的正确操作步骤是②③④⑦①⑤⑥⑧．
故选：B．
Graves 病（GD）可导致甲状腺功能亢进．研究发现，GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子I（ICAM-1），导致甲状腺肿大．科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了尝试．
（1）用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入______以检测这些小鼠产生的抗体．依据反应结果，选出______反应最强的培养孔所对应的小鼠M．
（2）实验用骨髓瘤细胞置于______恒温培养箱中37℃培养，融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中______（填“有”或“无”）骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求．
（3）取小鼠M 的脾脏细胞制备成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有______能力的细胞．将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用ICAM-1检测，从中选择______的杂交瘤细胞，植入小鼠腹腔中______培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体．
（4）若进一步比较实验用抗体和131I对GD 模型小鼠的治疗作用，可将若干GD 模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计．
正确答案
解析
解：（1）用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入ICAM-1以检测这些小鼠产生的抗体．依据反应结果，选出阳性（或“抗原-抗体”）反应最强的培养孔所对应的小鼠M．
（2）实验用骨髓瘤细胞置于（5%）CO2恒温培养箱中37℃培养，融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中无骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求．
（3）取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有无限增殖能力的细胞．将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用ICAM-1检测，从中选择大量产生抗ICAM-1 抗体的杂交瘤细胞，植入小鼠腹腔中克隆培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体．
（4）根据题干中实验目的“比较实验用抗体和131I对GD 模型小鼠的治疗作用”，单克隆抗体治疗组（C）中应给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL无菌生理盐水的抗ICAM-1单克隆抗体．
故答案为：
（1）ICAM-1 阳性（或“抗原-抗体”）
（2）（5%）CO2 无
（3）无限增殖 大量产生抗ICAM-1 抗体 克隆
（4）给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL无菌生理盐水的抗ICAM-1单克隆抗体
2009年4月，甲型H1N1再次让全世界对流感恐慌，流感的预防和治疗也再次成为世界各国的热点．利用细胞工程方法，以病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体．下列相关叙述正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、单克隆抗体作为诊断试剂，与该病毒核衣壳蛋白特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点，故A正确；
B、用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体化学性质不单一，不是单克隆抗体，故B错误；
C、将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞，故C错误；
D、甲型H1N1流感病毒形成H5N1禽流感病毒是基因突变的结果，两者抗原不同，故D错误．
故选：A．
下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，不正确的是（ ）
正确答案
解析
解：A、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导，A正确；
B、融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体，B正确；
C、B淋巴细胞不具有细胞分裂的能力，因此不能通过培养获得大量的单克隆抗体，C错误；
D、单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显，D正确．
故选：C．
将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（ ）
正确答案
解析
解：A、B淋巴细胞可产生抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞不产生抗体，但能无限增殖，A正确；
B、B淋巴细胞能产生抗体，与是否与骨髓瘤细胞融合无关，B错误；
C、骨髓瘤细胞能无限增殖，但不可以产生抗体，C错误；
D、骨髓瘤细胞不能产生抗体，D错误．
故选：A．
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