热门试卷

图1和图2分别表示两种获取胚胎干细胞的途径．图1表示的是科学家把4个与胚胎发育相关的特异性基因导入成年小鼠细胞，培养出了诱导多潜能干细胞，称为iPS细胞，类似于胚胎干细胞样细胞，再将iPS细胞转入小鼠乙体内培养，结果如图所示．图2表示研究人员利用小鼠（2N=40）获取单倍体胚胎干细胞的一种方法，哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段．请分析并回答下列问题：

（1）图1过程中，通常选择传代培养______代以内的成纤维细胞导入特异性基因；成纤维细胞转变为iPS细胞，类似于植物组织培养中的______过程．

（2）克隆培养iPS细胞时，需要加入一定量的______，以防止杂菌污染．早期研究发现在 iPS 细胞诱导培养的过程中会出现大量不具备干细胞功能的细胞，若用维生素C处理，能显著提高iPS细胞的诱导成功率，推测其原因是______．

（3）研究人员将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长．由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因是______．

（4）图2中，研究人员需要对实验小鼠丙注射促性腺激素使其______，从而获得更多的卵母细胞，再利用SrC12溶液处理、激活卵母细胞，并在体外培养至[④]______期，再利用流式细胞仪筛选出单倍体细胞．

（5）研究发现，单倍体胚胎干细胞也能分化，形成不同功能的细胞、组织和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究______（填“显性”或“隐性”）基因功能的理想细胞模型．

现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员计划通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱．请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列有关问题．

实验原理：______．根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性．

材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片．

实验步骤：

（1）制备细胞悬浮液．

把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液．

（2）进行细胞培养．

①取A、B、C3个洁净的培养瓶，分别放入______；

②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液，C瓶中加入等量的蒸馏水，摇匀；

③把3个培养瓶放在适宜温度的恒温箱中培养．

（3）制作临时装片．

①当细胞增殖到大约8代左右时，同时从恒温箱中取出3个培养瓶，用______．

处理，加入动物细胞固定液，迅速杀死细胞并固定细胞分裂相；

②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，滴加______进行染色，3-5min后，盖上盖玻片．

（4）镜检和统计．

把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜观察，为清晰观察染色体的形态，最好寻找处于______期的细胞，并与小白鼠正常细胞有丝分裂同时期高倍显微照片进行对比，统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数（Q值）．

结果分析与结论：

（1）经研究人员实验得知，A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，

由此可知该实验的结论是______．

（2）在实验中，C培养瓶起______作用，C瓶的Q值说明______．

某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性．供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞．请回答下列有关动物细胞培养的问题：

（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同．一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量______．

（2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是______．细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是______．

（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长______．药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次更______．

（4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的______．

（5）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入______，B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的______或______合成水平的差异，确定Y的药效．